毕业论文——盐酸普萘洛尔含量的hplc测定研究

毕业论文题目盐酸普萘洛尔含量的HPLC测定研究专业应用化学班级091班姓名吴XX指导教师李成平教授所在学院生物与环境工程学院完成时间20XX年6月1承诺书我谨此郑重承诺本毕业设计（论文）是本人在指导老师指导下独立撰写完成的。凡涉及他人观点和材料，均依据著作规范作了注释。如有抄袭或其它违反知识产权的情况，本人愿接受学校处分。承诺人（签名）年月日2盐酸普萘洛尔含量的HPLC测定研究生物与环境工程学院应用化学专业吴XX摘要本文采用高校液相测定了盐酸普萘洛尔片中盐酸普萘洛尔的含量，固定相为安捷伦C1846MILLX250MM，5URN，甲醇一醋酸钠缓冲溶液PH5517030为流动相，检测波长为290NM；结果盐酸普萘洛尔在25125UG/ML范围内呈现良好的线性关系，R09998盐酸普萘洛尔的平均回收率为9405，RSD为014N9；此方法简便、准确、重现性好，可用于盐酸普萘洛尔片中盐酸普萘洛尔的含量测定。关键词高效液相色谱法；盐酸普萘洛尔；含量3DETERMINATIONOFPROPRANOLOLHYDROCHLORIDETABLETSBYHPLCWUHANYU,MAJORINCHEMISTRYSPECIALITY,COLLEGEOFBIOLOGYANDENVIRONMENTALENGINEERINGABSTRACTTOESTABLISHAHPLCMETHODFORDETERMINATIONTHECONTENTOFPROPRANOLOLHYDROCHLORIDETABLETSMETHODDIAMONSILC18COLUMN46MM150MM,5UM,WASUSED,THEMETHANOLSODIUMACETATESOLUTIONPH5517030ASMOBILEPHASE,THEFLOWRATEWAS10MLMIN1,THEDETECTIONWAVELENGTHWAS290NMRESULTTHEMETHODSHOWEDAGOODLINEARRELATIONSHIPWITHINTHERANGEOF25125UG/ML,R09998,THEAVERAGERECOVERYWAS9405WITHRSD0149CONCLUSIONTHEMETHODISSIMPLE,RAPID,RELIABLEKEYWORDSHPLCPROPRANOLOLHYDROCHLORIDEDETERMINATION4目录1引言111本课题研究的背景12研究内容221仪器和药品222实验过程2221流动相的选择试验5222色谱条件5223溶液配制5221流动相的选择试验523方法与结论3231标准曲线的制备5232精密度和重复性试验5233稳定性试验5234加样回收率试验5235样品含量测定5236有关物质的检查方法5237分离专属性53试验结果与讨论31试验结果432讨论4致谢10参考文献1151引言11本课题研究的背景一项有关亚洲心血管疾病治疗的研究结果显示，亚洲一半以上的心血管疾病患者，因不能按时定量服药而未实现疗效。2009年亚太心血管峰会19日在北京召开，会上首次公布了泛亚高胆固醇血症治疗情况研究（CEPHEUS）的研究结果。CEPHEUS是由亚洲顶级心血管专家进行的一项科学研究，旨在调查高胆固醇血症（血液胆固醇含量高）的治疗情况。而血液胆固醇含量升高是导致心血管疾病的主要危险因素。研究人员对逾7千名心血管疾病患者和医生进行调查，结果显示患者当中441偶有忘记吃药的情况，四分之一的患者认为忘记吃药并不会影响治疗。而参与研究的医学教授则表示，治疗心血管疾病最好的方法就是遵医嘱服药，而患者没有认识到这一点。研究还指出，改变生活方式也是降低胆固醇，治疗心血管疾病行之有效的方法。医学专家认为，亚太地区生活方式最严重的问题是吸烟，中国尤其如此。中国卫生部发布的2007年中国控制吸烟报告指出，中国约有35亿吸烟者，每年死于吸烟相关疾病的人数近100万。世界卫生组织2004年全球疾病负担报告指出，心血管疾病是全球头号杀手，2004年全球有17000万人死于心血管疾病，到2030年之前，死亡人数预计超过两千三百万。普酸普萘洛尔是B受体阻断药，应用于心绞痛、高血压、心律失常等的治疗。盐酸普萘洛尔片含量测定方法有紫外分光光度法、二阶导数分光光度法、高效液相色谱法，本文采用高效液相色谱法测定盐酸普萘洛尔片的含量，方法简单、快速，结果可靠。盐酸普蔡洛尔，其化学名称为异丙氨基萘氧基丙醇盐酸盐。分子式C16H21NO2HCL，分子量29581。盐酸普萘洛尔的主要药理作用1用于治疗心绞痛；2用于治疗高血压；3竞争性拮抗异丙肾上腺素和去甲肾上腺素的作用，阻断2受体，降低血浆肾素活性。抑制胰岛素分泌，使血糖升高，掩盖低血糖症状，延迟低血糖的恢复。4有明显的抗血小板聚集作用，这主要与药物的膜稳定作用及抑制血小板膜CA2转运有关。62研究内容21仪器和药品高效液相色谱系统VARIAN9012三元泵、9050紫外可见检测器、STAR531数据处理工作站、VARIANCARY100紫外可见分光光度计、盐酸普萘洛尔对照品由食品药品监督局提供（含量为999）；盐酸普萘洛尔片为市售药品；甲醇为色谱纯；醋酸钠为分析纯。22实验过程221流动相的选择试验运用不同比例的流动相1、甲醇水；2、乙腈水；3、丙酮水；4、甲醇005MOL/L醋酸钠溶液用醋酸调PH为40；5、甲醇005MOL/L醋酸钠溶液用醋酸调PH为60；6、甲醇005MOL/L醋酸钠溶液用醋酸调PH为70；7、甲醇002MOL/L醋酸钠溶液用醋酸调PH为601；8、甲醇002MOL/L醋酸钠溶液用醋酸调PH为648；9、甲醇002MOL/L醋酸钠溶液用醋酸调PH为551；进行峰型、保留时间、理论塔板数、拖尾因子等因数的比较，结果表明，甲醇002MOL/L醋酸钠溶液PH为551（7030）为佳，分离度好，分析时间不长，出峰时间约为8MIN。但在其他的流动相比例时有的峰型出现拖尾的现象比较严重，有的出峰时间太早的情况，使得甲醇002MOL/L醋酸钠比例在（7030）最为合适。222色谱条件色谱柱C18（250MM46MM）；流动相甲醇002MOL/L醋酸钠溶液用醋酸调PH为551（7030）；流速10ML/MIN；检测波长290NM；进样量20UL。盐酸普萘洛尔峰与相邻杂质峰的分离度符合要求。7MINUTES020406080101201408128468210MV1A对照品MINUTES02040608010120140812846821MV1B样品图1HPLC色谱图223溶液配制对照品溶液的配制取盐酸普萘洛尔片对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ML中约含盐酸普萘洛尔100UG的溶液，溶液经045UM滤膜滤过。供试品溶液的配制精密量取样品适量，加甲醇稀释制成每1ML中约含盐酸普萘洛尔100UG的溶液，溶液经045UM滤膜滤过。823方法与结论231标准曲线的制备取盐酸普萘洛尔对照品10MG，精密称定置10ML容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。精密量取对照品储备液025ML,05ML,075ML,10ML,125ML置10ML容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用045UM滤膜滤过，进样。结果表明，盐酸普萘洛尔在25125UG/ML浓度范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系，回归方程为Y24994X25412，R209996，结果见图1。图2盐酸普萘洛尔标准曲线232精密度和重复性试验取盐酸普萘洛尔对照品储备液1ML置10ML容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，用045UM滤膜滤过连续进样3次，测得峰面积，计算RSD为003。取盐酸普萘洛尔供试品100UG/ML的溶液，连续进样3次按外标法计算，其平均含量为9344，RSD为133。233稳定性试验取盐酸普萘洛尔片1片（约相当于盐酸普萘洛尔10MG），置于50ML烧杯中，加甲醇溶解完全后转移到100ML容量瓶中，淋洗烧杯3次，加甲醇至刻度，摇匀，用045UM滤膜滤过。分别在1,4,8,12,24小时测定，记录峰面积，RSD为053。9MINUTES020406080101201408128468210MV1组分名保留时间MIN峰高MV峰面积MVSEC浓度样品含量UNKNOWN77300084192722040000000000图31小时后MINUTES020406080101201408128468210MV1组分名保留时间MIN峰高MV峰面积MVSEC浓度样品含量UNKNOWN77966784612722270000000000图44小时后10MINUTES020406080101201408128468210MV1组分名保留时间MIN峰高MV峰面积MVSEC浓度样品含量UNKNOWN7797508526272027000001000000图58小时后MINUTES020406080101201408128468210MV1组分名保留时间MIN峰高MV峰面积MVSEC浓度样品含量UNKNOWN77000088412721630000000000图612小时后11MINUTES020406080101201408128468210MV1组分名保留时间MIN峰高MV峰面积MVSEC浓度样品含量UNKNOWN77008388362721740000000000图724小时后234加样回收率试验取盐酸普萘洛尔供试品储备液05ML至10ML容量瓶中，分别加入02ML，04ML，06ML盐酸普萘洛尔对照品储备液，再加入甲醇稀释至刻度，摇匀，用045UM滤膜滤过，再进样。用外标法测定计算平均回收率为9405，RSD为014。结果见表一。表一回收率测定结果样品浓度标样浓度测得浓度回收率平均回收率RSD（UG/ML）（UG/ML）（UG/ML）（）（）（）5020658194016585940765799399504084519390847094118473941550601033693961037894341033593959405014235样品含量测定精密量取样品适量，加流动相甲醇稀释制成每1ML中约含盐酸普萘洛尔100UG的溶液，溶液12经045UM滤膜滤过，滤液作样品溶液。另取盐酸普萘洛尔对照品，加流动相甲醇制成100UG/ML的溶液作对照溶液，按上述色谱条件，分别进样20UL。结果见表二。表二样品含量测定盐酸普萘洛尔对照品溶液123浓度（UG/ML）100100100峰面积272204272227272073平均峰面积272168RSD003盐酸普萘洛尔供试品溶液123峰面积258247252533252200浓度（UG/ML）948992799266平均浓度（UG/ML）9344RSD133236有关物质的检查方法分别精密量取对照品和供试品的储备液适量，加流动相制成每1ML约相当于盐酸普萘洛尔100UG的溶液。溶液经045UM滤膜滤过，再取供试品溶液和对照溶液各20UL,分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2倍。供试品溶液如显杂质峰，则各杂质峰面积之和不得大于对照溶液主峰面积。MINUTES020406080101201408128468210MV1图8对照品13MINUTES02040608010120140135426912350MV1图9供试品237分离专属性精密量取对照品储备液适量，加流动相制成100UG/ML的溶液，共3份，分别经01MOL/L的酸、碱和1（体积分数）的过氧化氢溶液经过60恒温处理2小时。再取样测定，记录色谱图。MINUTES0501015020250308128468210MV1图10酸破坏14MINUTES05010150202503068236506475MV1图11碱破坏MINUTES05010150202503068236506475MV1图12过氧化氢破坏238最低检测限和定量限最低检测限和定量限分别是基线噪音的3倍峰高和10倍峰高。通过电脑软件计算出基线噪声为8621UV，再经过一遍一遍的降低盐酸普萘洛尔的浓度，进样，获得色谱峰，计算，最后得出最低检测限为01UG/ML浓度的盐酸普萘洛尔溶液而最低定量限位03UG/ML浓度的盐酸普萘洛尔溶液。3试验结果与讨论31试验结果在有关物质的检测中，对比供试品的色谱峰和对照品的色谱峰可以发现两者的峰型较好，没15有明显的杂质峰，说明了供试品盐酸普萘洛尔片内的杂质较少。在分离专属性的过程中，在酸破坏、碱破坏和过氧化氢破坏的环境下，盐酸普萘洛尔的峰型依旧没有改变。通过这一测试，说明盐酸普萘洛尔的化学成分很稳定。32讨论在实验的过程中，走过不少的弯路。最初，盐酸普萘洛尔溶液的配制选择的溶剂是水，由于在文献上看到学者在配制盐酸普萘洛尔溶液时有人选择水做溶剂，也有人选择流动相作为溶剂。经过考虑，在最开始的时候选择了水溶解盐酸普萘洛尔片，但是，发现峰型非常不好，后来经过老师的提醒，用流动相配制盐酸普萘洛尔溶液，最终得到较好的峰型。在流动相的选择上，用了不同比例的甲醇醋酸钠溶液，以及不同PH值的醋酸钠溶液，比较了各自的保留时间和理论塔板数等因数，最终选择甲醇002MOL/L醋酸钠溶液PH为551（7030）作流动相。致谢在本次论文的撰写中，我得到了李成平教授的精心指导，不管是从开始定方向还是在查资料准备的过程中，一直都耐心地给予我指导和意见，使我在总结学业及撰写论文方面都有了较大提高；同时也显示了老师高度的敬业精神和责任感。在此，我对李成平教授表示诚挚的感谢以及真心的祝福。四年大学生活即将结束，回顾几年的历程，老师们给了我们很多指导和帮助。他们严谨的治学，优良的作风和敬业的态度，为我们树立了为人师表的典范。在此，我对所有的生环学院的老师表示感谢，祝你们身体健康，工作顺利最后，对即将参加论文评议、评阅和对本论文提出宝贵意见的所有专家和老师表示诚挚的感谢。吴寒雨2012年5月16参考文献1沈耀良，王宝贞废水生物处理新技术理论与应用M北京中国环境科学出版社，1999，0433372李科林啤酒工业废水处理与利用技术研究进展J中南林学院学报，1999，0171723孙金融啤酒生产废水综合治理和探讨J环境保护，1995，118104何增耀，叶兆杰农业环境科学概论M上海上海科学技术出版社，1991，0320235史家梁，徐亚同，张圣章，等环境微生物学M第二版华东师范大学出版社，2000，0521256闰庆松，杨本杰啤酒废水的综合治理技术J重庆环境科学，1996，18533357朱月海，啤酒废水处理工艺及浅析J给水排水，1999，0132368刁俊明水解酸化好氧法处理啤酒废水的原理与实践D广东工业大学，2005，1231013王水生SBR法处理啤酒废水J环境保护，1997，08212220SCHMIDTJE,AHRINGBRGRANULARSLUDGEFORMAT