发酵工艺流程

1、发酵工艺标准操作流程 (SOP)生产前准备每次生产前按品种配方将所需原料称重准备齐全,并确认生产原料库存量 ,保证原料库存量足够下次生产所需 .二 生产前检查1 检查蒸汽、压缩空气、冷却水进出的管路是否畅通 , 所有阀门是否良好 , 并关闭所有阀门2 检查电路、控制柜、开关的状态 , 确保控制柜运行正常 .3 检查空压机油表油表及轴承、三角带、气缸等是否正常, 确保空压机运行正常 .4 检查发酵罐搅拌减速机的油量及密封轴降温水是否正常.三 总过滤器灭菌当蒸汽总管路上的压力为 0.2-0.25MPa 时 ,打开总过滤器进气阀输入蒸汽 ,同时打开出气阀 的跑 分阀、排气阀、排污阀 ,当三个阀均排出

2、蒸汽时 ,调整进气阀、排污阀 ,稳定总过滤器压力 0.150.2MPa, 此时打开压力表下跑分 ，计时灭菌 2-2.5 小时 ?灭菌结束后启动空压机 ，当空气输 入管道压 力大于总过滤器压力时 ,关闭蒸汽阀 ,打开空气阀 ,将空气出入总过滤器 ,然后调整进 气阀与排污 阀，稳定总过滤器压力在 0.15-0.2MPa, 保持通气在 15-20 小时, 当出气阀跑分和排 污阀放出的空气 为干燥空气时 ,完成灭菌 .四 分过滤器灭菌1 当蒸汽管路压力为 0.2-0.25MPa 时 ,打开蒸汽过滤器的进气阀和排污阀 ,当蒸汽管路中无 蒸汽凝 结液后 ,再将蒸汽输入空气管路 ,然后打开分过滤器的进气阀、

3、排污阀及出气阀上的跑分 ,当所有阀门均有蒸汽排出后 ，调整进气与排污阀 ，是压力稳定在 0.11-0.15MPa, 计时灭菌 30-35 分钟 .灭菌结 束后 ,关闭蒸汽过滤器进出气阀、排污阀 ,并立即将空气输入预过滤器 ,使空 气通过预过滤器进入到 分过滤器 ，再调整分过滤器排污阀使压力稳定在 0.11-0.15MPa, 备用 .五 发酵罐空消 （ 可与分过滤器灭菌同时进行 ）空消前先将发酵罐去垢洗净 ,添加少量清水 ,然后密封进料口 ,将排气阀打开少许 ,同事将蒸 汽引入 盘管（或夹套 ）进行预热 ，待罐温升到 80 C 时（种子罐 40C 即可） ,关闭盘管 （或夹套 ）进气 阀, 再从

4、出料口、进气口、取样口三路输入蒸汽 ,（蒸汽管路压力不低于 0.2-0.25MPa ）,当罐内温 度达到 125-130 C 时, 通过三路蒸气浴出气阀调整罐内压力，使其稳定在 0.11-0.15MPa, 计时灭 菌 30-35 分钟.空消结束后 ，关闭所有进气阀并将排气阀开大 ，当罐内压力下降至 0MPa 后 ，打开进料口和排 污 阀 , 再将发酵罐进行一次冲洗 .六 发酵罐实消打开进水阀 ,按照生产要求放入所需水量,再根据生产品种按配方依次投入培养基原料,并同时打开搅拌 ,搅拌 5-10 分钟后取样 ,用氢氧化钠和浓盐酸调PH 值 7.2-7.5 之间 ,然后密封进 料口将排气阀打开少许

5、,同时打开盘管 （或夹套 ） 的进出气阀门输入蒸汽进行预热,等到罐内温 度到达80C 以上后 ，关闭盘管 （或夹套 ）进气阀门 ，并将排气阀关小 ，然后将蒸汽从进气口、出料口、取样口三路直接通入罐内，当罐内温度上升到 121-125 C 后 ，打开发酵罐体上与空气进气阀上的所有跑分 ，再通过调整三路进气与排气阀将罐内压力稳定在0.11-0.15MPa, 此时开始计时灭菌 30-35 分钟 ，灭菌期间将搅拌停止 .灭菌结束后 ，关闭所有进蒸汽阀门 ，将排气阀开大 ， 同 时开启搅拌 ，并立即打开进气阀 ，输入无菌空气 ，保证罐压不低于 0.05-0.06MPa （当发酵罐通入 无菌空气后 ，一定

6、注意分过滤器与空气总管路压力一定要大于发酵罐内压力），打开盘管 （或夹 套）冷却水进出阀门 （确定蒸汽出阀门关闭 ） ，开始降温 ，按照不同菌种接种温度要求控制降温结 束时间（一般在34C左右），降温结束后即可接种.七 接种1 种子罐接种先将进气阀逐渐关闭 ，同时将排气阀开大 ，当罐体压力表与空气流量计降到 0 刻度时 ，关闭排 气阀 ，用酒精棉围在接种口四周并点燃 ，然后打开接种口 ，将制备好的菌种孢子悬浮液在火焰 中 直接从接种口倒入罐内 ，马上关闭接种口 ，同时迅速打开进气阀使罐内压力上升到 0.05MPa 以 上，打开排气阀 ，调整进气与排气阀使罐内压力稳定在 0.05-0.06MPa

7、2 培养罐接种接种前应先将蒸汽输入接种管道，再把接种管道两端的跑分打开 ，当跑分都有蒸汽排出时 ，计时灭菌 15-30 分钟 ，灭菌结束后关闭跑分和进蒸汽阀 ，将种子罐排气阀关小 ，当种子罐内压力 大于培养罐压力后 ，先将接种管道进口阀门打开 ，再打开培养罐端出口阀开始接种，接种量按不同菌种生产需求控制 .接种完毕后 ，先将培养罐端出口阀关闭 ， 再将接种管道进口阀关闭 ， 完成接种 ，最后把种子罐所有进出气阀门关闭 ，停止搅拌八 发酵罐培养控制接种后调整进气阀与排气阀 ,将罐内压力稳定在 0.05-0.06MPa, 同时按照不同菌种的需求调 整好罐 内的温度和通气量当罐内温度超出或者低于标准

8、温度时,打开盘管或夹套进出阀门 ,出入冷却水或者蒸汽 , 等 温度达到标准温度后关闭进出阀门 ,停止冷却水或者蒸汽的输入 ,这就完成了一次温度的控制 调整 .通气量的控制 ,按照不同菌种的要求 ,在确保管内压力稳定的前提下 ,根据空气流量计的显 示,通过 进气阀和排气阀的调整进行通气量的调整 .冬季结冰期到来以后 ,每次生产停止后 ,应把蒸汽和空气管路及发酵罐盘管或者夹套的冷凝水和冷却水排尽 ,排不尽的可用空气把水吹出来 ,以防止冻裂管路和设备 ,给生产造成不便 .九 取样与放罐取样检测时间 ,按照生产菌种的种类来制定 12-16 小时不等 ,开始取样检测后 ,前期每 2 小时 一次 , 后期取样时间缩短为 0.5-1 小时,每次取样前后都要对取样口进行 10-15 分钟灭菌处理 ,. 当取样检 测，发现符合芽孢大量形成 ，芽孢含量 70%,杂菌量 w 3%,含菌量 30*108CFU/ml 的