7500荧光定量PCR仪使用说明

1、用。均。7500荧光定量PCR仪使用说明注意事项;实验过程必须戴干净的一次性乳胶手套进行操作。PCR反应所用的96孔板、8联管或单管必须为ABI7500专用，凸盖PCR管禁止使使用8联管两侧需用空管支撑，使用单管四角需用空管支撐，以防止板槽受力不实验数据用光盘刻录，禁止U盘拷取，数据可暂存于本机电脑硬盘中，各实验室D盘中有指定文件夹，中心外部人员数据存于FUWU文件夹下的子文件夹中操作步骤开机依次打开电脑显示屏、主机，输入开机密码“7500”。待电脑启动稳定后,按压7500仪器电源按扭，等待仪器启动（约30s）a当仪器只显示Power状 态指示灯时，方可按压托盘 以打开它放入反应板注：关闭仪器

2、托盘时，应按一个角度推压托盘的右侧（以下过程按字母顺序a-q进行操作）创建反应板文件双击电脑桌面上SDS软件图标打开SDS软件;在对话框中选择Create New Documentf或选择菜单栏File New；a 从 Assay F 拉 列表中选择反应板类型.反臧板文件类型有以下几种：1. Relative Quantification (ddCt) Plate i(相对定虽)1I2. Absolute Quantrfication (Standard :、Curve)(纳对定虽：.标准曲线):M Allelic Discrimination (等位基丙鉴: 别J4. Plus/Mmus (

3、阳性/阴性实验)!b. 为反应板文件命名二Herno-ePassiye fleleiencc;(RDXL*J 一New Document WijordDetectws in DosurrentRNcP1Selec! DetecforsSelect ihe da&Jtors yuu wil be using iri the ducuTiertFind:die亠TACR2FAM(noneRXRAFAM(nmelRrMasePSPAMncnelRNase： P 2FAM(nonojRNase P1FAM(neneRAR3FAMtncne；RFAFAM(none；PTGFRFAM(nene：NF1FA

4、M(riaie；NCAM1F.A.M(nonKAI1FAM(non/I PC riFiprnrInternal Pns：lt；v VICridDetecior 附mt | DEScriptkMi | ReporterQd. 选择要添加 到反应板文件的探针 （引物h单击Add添 加选中探针Canede. 如果在列表 中未列出所需採针，请 单击 New Detector 创 建新探针itf Next为每个反应孔指定探针和任务New Dwumem Wizo rd工5orap $qnvlc Pkitc亠一 1JSEtup :he sa-pfe pa：9tfi tao$, giferttiee andd

5、=tectZK.Uee IDolBCiar /Itepanar1 auBnc4)B凶mK1 Color 1 入 .1 - - -*_- NV - AlB* 一 - -*(nF:ACVR1(none)FAMpM泅(w：MMMiaaHzry=L为反应孔设置样品名Target! Target各选取探针相同的反应孔h.点击反应孔对应的探针Fi单击Task栏的下边 指進探针任务&j选择U坯（使用）。lc单击Finish （完成S3copy6E1/Setup/Flatt8*7500 System SDS So.ftvajTe - Jlahl i；5tfir.dara CtireelJ.童 Eie View

6、 Tools Instrument Analysis-独indoc Help I DsPH aai0 ?1Instrunent YRestrpnsI K| bLUZflHLIH1 w w. :r.J 厂 T r.9Expon祜応口ExportPov/eroirtExpon AlVa PowerPCCtrGlCtrlCTJrUvI.选取反应孔，宜接 输入根应样品名（也可 右键.调出反Well Inspector对话框，在 Sample Name屮进行修 改）设定PCR循环参数.运行程序stimatud Tin-:jlcStep園叵盂1 El *9 ?童75tom scs soft/Ad renp

7、erituri?- 5in pl*: Covat-I S(4As：-CycleStQigQ:：Rep：7herrr.?J Cycler FrntDrolTittiriTiProfilii Aato Inct-eTicnt &曲p KolUStane I 加弊MSffloe ?Rc|： F1 LA4St At*2:MnSflVLicj Sanplti WJunp莎Eum. Fl&de|0WOO|Stuiard *?500Ajdd Cycled Add. Hold.Collfidtion : jstifo 3? StQp 2(60.D (2 1.00) V|m” 选 择Instrument选项卡，默 认条件F显示标准 PCR条件，可跟据实脸 具体情况修改：n.单击 Add Dissociation Stage 添加 浴解曲线循环；o.修改PCR反 应体积；p.将反应板文 件保存至指窪路径。q.点击 Start 运