467残留溶剂检查法解析

1、（ 467）有机挥发性杂质残留溶剂限度在药典中，药品中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产过程中，以及在制剂制备过程中使用 过或产生的有机挥发物。残留溶剂在实际的生产工艺中未能完全去除。在原料药或辅料合成过程中 选择适当的溶剂可以提高产量，或用于测定物质特性，如结晶形态、纯度、可溶性等。所以，溶剂 有时候是合成过程中的关键因素。本章讨论的溶剂并非辅料，也不是溶剂化物。但是，药品中的溶 剂必须要评价并证明符合要求。由于残留溶剂没有任何医疗效果，因此应尽可能地去除，使达到原料和成品的规定标准，生产 工艺规定以及其它的质量要求。药品中的残留溶剂的含量不得高于规定的安全范围。已知会产生严 重毒性的溶剂（

2、表1,第一类）在药品原料、辅料和成品的生产中必须避免使用，除非它们严格符合毒性安全评估。毒性稍低的溶剂（表 2,第二类）必须限制含量，从而保护病患免除可能的副作 用。理论上，毒性最低的溶剂（表 3,第三类）在实际需要的时候可以使用。本章讨论的溶剂在附 录1中已全部列出。但这些表格和附录并不全面。当有关调整部门正式批准同意使用其它溶剂时， 这些溶剂可能就要添入表格和目录。如果已知药品生产或净化过程中存在残留溶剂，那么原料、辅料和成品中必须检测残留溶剂。但仅需检测在药品生产或净化过程中使用或产生的残留溶剂。生产厂家可能会选择检测药品成品，但药品各成分的残留溶剂限度都可能需要逐步计算。若计 算的结果

3、低于或在本章规定的范围内，那药品成品就没有必要检测残留溶剂。但是若计算的结果高 于规定范围，那成品就必须检测残留溶剂以确定处方在配制过程是否将有关的溶剂范围降低到可接 受的量。药品生产过程中如果使用了残留溶剂，那成品也必须检测。见附录2有关残留溶剂的附加资料。残留溶剂按毒性评估的分类国际化学安全会用“每日容许摄取量” （TDI , tolerable daily intake ）来衡量毒性化学药品的 接触极限，而世界卫生组织（WHO）与其它国家、国际卫生机构和研究所则使用“每日允许摄取量”（ADI , acceptable daily intake ）。在药品领域中，为了避免同一物质有不同的A

4、DIS,将“每日安全接触量“（PDE , permitted daily exposure ）统一规定为残留溶剂的允许摄取量。附录 1详细列 出了本章讨论的残留溶剂的通用名和结构。按对人类健康的潜在危险分为如下三类：第一类残留溶剂：应该避免使用已知对人类的致癌作用对人体极有口能存在致癌作用对环境有危害作用第F残留溶剂：应该限制使用对动物无遗传毒性， 但可能存在其他不可逆的毒性，如神经毒性、致畸性。溶液可能还存在其他潜在的严重的可逆毒性。第三类残留溶剂：溶剂的潜在毒性较低对人体的潜在毒性较低；不需要限定安全的接触极限。注第二类溶剂 PDEs可能是f 最高为 50mg或大*于 50mg。* . P

5、DEs大于50mg /天的残留溶剂，见第二 类溶剂的残留溶剂限度项卜的讨论。确定接触极限的操作方法确定残留溶剂每日安全接触量的操作方法见附录3。第二类残留溶剂的测定水平的方法第二类残留溶剂的测定水平有两个可行的方法。方法1浓度限度在表2中以ppm表示，等式1以每天使用10 g产品计算。/成 /、1000 PDE侬度（ppm ）= （1）剂重式中，PDE以mg/天表示，剂量以 g/天表示。该式算出的限度对所有原料药、辅料、成品都适用。所以，这种方法在每日剂量未知或未定的时候都可以使用。若处方中所有原料药、辅料符合方法 1给出的限量值，那么这些成分可以按任何比例 使用。如果每日剂量小于10g ,那

6、就没有必要进行下一步计算。如使用的产品每日剂量大于10 g ,那就需要按方法2测定。方法2药物制剂的所有成分并不需要都符合方法1的限量值。通过表2中规定的PDE值（mg/天）、已知的每日最大剂量以及式 （1）可以测定制剂中残留溶剂的允许浓度。若已证实残留溶剂已降低到实际最小值，那这些限度都是可行的。限量值必须考虑到实际的分析精密度、生产可行性、生产过程中 合理变更，同时也要考虑当时的生产标准。应用方法2可能要往药物制剂中每一成分加入一定量的残留溶剂。每日溶剂总数必须小于给定的PDE。下面举例应用方法1和2测定某种药物制剂中乙睛的浓度。乙睛的每日安全接触量是 4.1mg/天；因此，方法1的限度是

7、410ppm。该制剂的每日最大用量是 5.0g,它含有两种辅料。该制剂的组成和 计算出的残留乙睛最大量见下表。成分处方中的量(g)乙庸量(浓度限度)(PPm)每日接触量(PDE)(mg)原料药0.3800 >4100.24辅料10.9400 <4100.36辅料23.8800 >4103.04药物制剂5.0728 >4103.64 <4.1辅料1符合方法1的限度；但原料药、辅料2、药物制剂都不符合方法 1的限度。不过，药物制剂符合方法2每日4.1mg的限度，这就符合本章允许的标准。再用残留溶剂乙睛举个例子。药物制剂的每日最大用量是5.0g,包含两种辅料。该制剂的组

8、成和计算出的残留乙睛最大量见下表。成分处方中的量(g)乙庸量(PPm)每日接触量(mg)原料药10.38000.24辅料10.920001.80辅料23.88003.04药物制剂5.010165.08 >4.1此例中，药物制剂不符合方法1的限度，也不符合方法 2的限度。厂家可以测定药物制剂来确定处方配制过程是否降低了乙睛的含量。如果乙睛的含量经过处方过程没有下降到限度范围内，那么产品就不符合检测要求。残留溶剂限度环氧乙烷注一环氧乙烷只有在各论中有规定时才需要测定。标准溶液参数和测定的操作方法在各论中都有规定。除另有规定外，限量是 10闻/g。第一类第一类残留溶剂(表 1)由于会产生严重的

9、毒性或环境污染，应该避免在原料药、辅料、制剂的生产过程中使用。除另有规定外，如果使用了第一类残留溶剂，就应该按表1规定严格控制限量。1,1,1-三氯乙烷因为具有环境危害性，所以也列在表1中。根据有关安全数据，它的限量是 1500Ppm。一旦在原料药、辅料或制剂生产过程中使用了第一类残留溶剂，在任何可能的情况下，都应当使用 本章中鉴别、对照、残留溶剂限量项下的方法。否则，就需要使用适当的验证操作方法，且方法要 符合USP有关各论中的内容。表1.第一类残留溶剂溶剂浓度限度(PPm)危害苯2致癌作用四氯化碳4毒性、环境污染1,2-二氯乙烷5毒性1,1-二氯乙烷8毒性溶剂浓度限度(PPm)危害苯2致癌

10、作用1,1,1-三氯乙烷1500环境污染第二类第二类残留溶剂(表 2)因其本身的毒性应该在原料药、辅料、制剂生产过程中限制使用。它们的 PDEs在0.1mg/天左右，浓度限量在10Ppm左右。这些数据并不表示操作过程中必须要达到的分析 精密度。在操作规程验证过程中必须确定精密度。一旦第二类残留溶剂大于方法1的限量，就需要进行鉴别和定量。在任何可能的情况下，都应当使用本章中鉴别、对照、残留溶剂限量项下的方法。否则，就需要使用适当的验证操作方法，且方法 要符合USP有关各论中的内容。注一下列第二类残留溶剂不宜用本章顶空进样方式的鉴别、对照、残留溶剂限量条件测定：甲酰胺、2-乙氧基乙醇、2-甲氧基乙

11、醇、乙二醇、 N-甲基口比咯烷酮、二氧曝吩烷。这些残留溶剂的对照需要 应用其它适当的验证操作方法，且方法要符合USP有关各论中的内容。表2.第二类残留溶剂溶剂PDE（mg/ 天）浓度限度(PPm)乙睛4.1410氯苯3.63600.660坏己胺38.838801,2-二氯乙烯18.718701,2-二甲氧基乙烷1.0100N,N -二甲氧基乙酰胺10.91090N,N -二甲氧基甲酰胺8.88801,4- 一氧八环3.83802-乙氧基乙醇1.6160乙二醇6.2620甲酰胺2.2220正乙烷2.9290甲醇30.030002-甲氧基乙醇0.550甲基基酮0.550甲基环己烷11.81180二

12、氯甲烷6.0600N-甲基毗咯烷酮5.3530溶剂PDE（mg/ 天）浓度限度（PPm）硝基甲烷0.550口比咤2.0200二氧曝吩烷1.6160四氢味喃7.2720四氢化泰1.01008.9890三氯乙烯0.880一甲苯21.72170* 、 _、. . . . 通常含有60%间二甲苯，14%对二甲苯，9%邻二甲苯和17%乙苯第三类与第一类和第二类残留溶剂相比，第三类残留溶剂（表3）对人类健康的危害和风险性相对要小的多。根据医药领域公认的标准，第三类溶剂对人类健康的没有危害。但是，大多第三类残留溶剂都 没有长期的毒性和致癌性研究。现行的资料表明它们在急性或短期研究的毒性以及遗传毒性研究的 副

13、作用都比前两类小。除另有规定外，第三类残留溶剂不得大于50mg/天（方法1的限量是5000Ppm或0.5%）。如果各论中第三类残留溶剂大于 50mg/天，那必须进行鉴别并量化。在任何可能的情况下，都应当使用本章中鉴别、对照、残留溶剂限量项下的方法。否则，就需要使用适当的验证操作方法，且方法要符合 USP有关各论中的内容。表3.第三类残留溶剂（GMP或其它质控要求限制使用）乙酸庚烷丙酮醋酸异丁酯苯甲醛醋酸异丙酯1- 丁醇乙酸甲酯2- 丁醇3-甲基-1- 丁醇乙酸丁酯甲基乙基甲酮叔丁基甲基醍甲基异丁基酮异丙基苯2-甲基-l-丙醇二甲亚碉戊烷乙醇1-戊醇乙酸乙酯1-丙醇乙醛2-丙醇甲酸乙酯乙酸丙酯甲

14、酸其它残留溶剂表4中的残留溶剂在原料药、辅料或制剂生产过程中可能也经常使用。但是，尚无足够的PDE基础的毒理学资料。残留溶剂的规范使用将在各论中规定。表4.其它残留溶剂（尚无足够毒理学资料）1,1-二乙氧基丙烷甲基异丙基酮1,1-二甲氧基甲烷甲基四氢吠喃2,2-二甲氧基甲烷溶剂乙烷三氯乙酸异丙醒三氟乙酸残留溶剂的鉴别、对照以及量化注-为避免给色谱系统带来干扰，下列操作过程要求使用“无有机物水”。第一类和第二类残留溶剂水溶性物质操作方法A第一类标准贮备液一一移取USP第一类残留溶剂混合液RS 1.0ml到100-ml容量瓶中，加入 9ml二甲亚碉，用水稀释到刻度，摇匀。移取 1.0ml此溶液到另

15、一 100-ml容量瓶中，加水稀释到刻度，摇 匀。移取1.0ml此溶液到10-ml容量瓶中，用水稀释到刻度，摇匀。第一类标准溶?夜移取1.0ml第一类标准贮备液到适宜的顶空瓶中，加入 5ml水，加盖密封，摇匀。第二类标准贮备液一一移取1.0mlUSP第二类残留溶剂 RS到100-ml容量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀。第二类标准溶?移取1.0ml第二类标准贮备液到适宜的顶空瓶中，加入5.0ml水，加盖密封，摇匀。供试贮备液一一精密称取供试品约250mg到25-ml容量瓶，用 水溶解并稀释到刻度，摇匀。供试液一一移取5.0ml供试贮备液到适宜的顶空瓶中，加入 1.0ml水，加盖密封，摇匀。第一类系统

16、适应性溶液一一移取1.0ml第一类标准贮备液到适宜的顶空瓶中，加入5.0ml供试贮备液，加盖密封，摇匀。色谱系统（见色谱法621）气相色谱仪，带 FID检测器，0.32-mmX 30-m的弹性石英色谱柱， 液膜为厚1.8- m的G43层，或0.53-mm x 30-m的多孔性色谱柱，液膜为厚3.0- m的G43层。以氮气或氨气为载体， 线速度约为35cm/s,分流比为1: 5。柱温先在40。维持20分钟，再以10。 /min的升温速率升至 240。，并维持20分钟。进样口和检测器的温度分别维持在140。和250 ° o取第一类标准溶液，第一类系统适应性溶液，第二类标准溶液进样，并按操

17、作方法记录峰响应：第一类标准溶液的1,1,1-三氯乙烷的S/N不得少于5;第一类系统适应性溶液每个峰的S/N不得少于3;第二类标准溶液乙氧和二氯甲烷的分离度R不得少于1.0。操作方法一一将相同体积（约1.0ml ）的第一类标准溶液、第二类标准溶液、供试液分别进样（按照表5的顶空进样操作参数），记录色谱图，并测定主峰响应。若供试液的任一峰响应大于或相同 于第一类标准溶液或第二类标准溶液相应的峰面积，则需继续操作规程B鉴别该峰；反之，该物质符合本次检测要求。表5.顶空进样操作参数顶空进样操作参数设定F1123平衡温度（0）8010580平衡时间（min.）604545气路温度（口）85110105

18、载气：氮气或氨气（在适宜气压下）加压时间（s）303030进样体积（mL）111操作方法B第一类标准贮备液、第一类标准溶液、第二类标准贮备液、第二类标准溶液、供试贮备液、供试液、 第一类系统适应性溶液一一照操作方法A配制。色谱系统（见色谱法621）气相色谱仪， 带FID检测器，0.32-mm x 30-m的弹性石英色谱柱， 液膜为厚0.25- 口的G16层，或0.53-mm x 30-m的多孔性色谱柱， 液膜为厚0.25-叩的G16层。 以氮气或氨气为载体，线速度为35cm/s,分流比为1:5。柱温先在50。维持20分钟，然后以6。/min的速率升温至165。，并维持20分钟。进样口和检测器的

19、温度分别维持在140。和250。取第一类标准溶液、第一类系统适应性溶液和第二类标准溶液进样，并按操作方法记录峰响应：第 一类标准溶液中苯的 S/N不得少于5;第一类系统适应性溶液每个峰的S/N不得少于3;第二类标准溶液中乙氧和三氯乙烯的分离度R不得少于1.0。操作方法一一将相同体积（约1.0ml ）的第一类标准溶液、第二类标准溶液、供试液分别进样（按照表5的顶空进样操作参数），记录色谱图，并测定主峰响应。若经操作方法A鉴别后的供试液，其峰响应大于或相同于第一类标准溶液或第二类标准溶液相应的峰面积，则需继续操作方法C量化该峰；反之，该物质符合本次检测要求。操作方法C第一第一类标准溶液、第二类标准

20、溶液、供试贮备液、供试液、第一类系统适应性溶液一一照操作方法A配制。标准溶液一一精密移取经操作方法A和B鉴别后的每个峰 USP参比标准的体积到适宜的容器中，用水定量稀释（如有必要，需逐步稀释），使溶液的最终浓度为表 1和2中浓度限量项下数据的1/100。移取5.0ml该溶液到适宜的顶空瓶中，加入 1.0ml水，加盖密封，摇匀。色谱系统（见色谱法621）注一一若操作方法 B得到的色谱图比操作方法A的色谱图好，则采用操作方法B的色谱系统。气相色谱仪，带 FID检测器，0.32-mm x 30-m的弹性石英色谱柱， 液膜为厚1.8- m的G43层，或0.53-mm x 30-m的多孔性色谱柱，液膜为

21、厚3.0- m的G43层。以氮气或氨气为载体，线速度约为35cm/s,分流比为1 : 5。柱温先在40。维持20分钟，再以100/min的升温速率升至 240。，并维持20分钟。进样口和检测器的温度分别维持在140。和250。取第一类标准溶液，第一类系统适应性溶液，第二类标准溶液进样，并按操作方法记录峰响应：第 一类标准溶液的1,1,1-三氯乙烷的S/N不得少于5;第一类系统适应性溶液每个峰的S/N不得少于3;第二类标准溶液乙氧和二氯甲烷的分离度R不得少于1.0。操作方法将相同体积（约 1.0ml ）的标准溶液、供试液分别进样（按照表5 的顶空进样操作参数），记录色谱图，并测定主峰响应。按以下

22、公式计算供试品中每一种残留溶剂的量，以 ppm 计：4（C/W）（rU / rS）,式中， C 指标准溶液在 USP 相应的参比标准浓度， ppm ；W 指用于配制供试贮备液的供试品的重量， g ；ru、rs分别指供试液和标准溶液的残留溶剂的峰响应。水不溶性物质操作方法 A第一类标准贮备液、第一类标准溶液、第一类系统适应性溶液、第二类标准贮备液、第二类标准溶液以及色谱系统照水溶性物质的操作方法 A 配制。供试贮备液精密称取约 250mg 供试品到 25-ml 容量瓶， 用 二甲基酰胺溶解并稀释至刻度， 摇匀。供试液 1 移取 5.0ml 供试贮备液到适宜的顶空瓶中，加入 1.0ml 二甲基酰胺

23、，加盖密封，摇匀。供试液 2精密称取约 250mg 供试品到 25-ml 容量瓶中，用 1,3-二甲基 -2- 眯唑啉酮溶解并稀释至刻度，摇匀。移取 5.0ml 溶液到适宜的顶空瓶中，加入 1.0ml 1,3-二甲基 -2- 眯唑啉酮，加盖密封，摇匀。1 、供试液 2 分1 的任一峰响B 鉴别该峰；操作方法将相同体积（约 1.0ml ）的第一类标准溶液、第二类标准溶液、供试液别进样（按照表5 的顶空进样操作参数），记录色谱图，并测定主峰响应。若供试液应大于或相同于第一类标准溶液或第二类标准溶液相应的峰面积，则需继续操作方法B 鉴别该峰；反之，该物质符合本次检测要反之，该物质符合本次检测要求。若

24、供试液2 中二甲基酰胺或N,N -二甲基乙酰胺的峰响应大于或相同于第二类标准溶液相应的峰响应，则需继续操作方法求。操作方法 B第一类标准贮备液、第一类标准溶液、第二类标准贮备液、第二类标准溶液、第一类系统适应性溶液照水溶性物质的操作方法 A 配制。供试贮备液、供试液1 、供试液2照操作方法A 配制。色谱系统照水溶性物质的操作方法 B 配制。操作方法将相同体积（约 1.0ml ）的第一类标准溶液、第二类标准溶液、供试液1 、（或）供试液 2 分别进样（按照表5 的顶空进样操作参数），记录色谱图，并测定主峰响应。若经操作方法A鉴别后的供试液1 的峰响应大于或相同于第一类标准溶液或第二类标准溶液相应

25、的峰面积，则需继续操作方法C 量化该峰； 反之， 该物质符合本次检测要求。 若供试液 2 中二甲基酰胺或N,N -二甲基乙酰胺的峰响应大于或相同于第二类标准溶液相应的峰响应， 则需继续操作方法C 量化该峰； 反之，该物质符合本次检测要求。操作方法C第一类标准溶液、第一类系统适应性溶液、第二类标准溶液照水溶性物质的操作方法 A 配制。供试贮备液、供试液1 、供试液2照操作方法A 配制。标准溶液、色谱系统照水溶性物质的操作方法 C 配制。操作方法将相同体积（约 1.0ml ）的标准溶液、供试液1 、（或）供试液2 分别进样（按照表5的顶空进样操作参数），记录色谱图，并测定主峰响应。按以下公式计算供

26、试品中每一种残留溶剂的量，以 ppm 计：4（C/W）（ru / rs）,式中， C 指标准溶液在 usP 相应的参比标准浓度， ppm ；W 指用于配制供试贮备液的供试品的重量， g ；ru、rs分别指供试液和标准溶液的残留溶剂的峰响应。第三类残留溶剂如存在第三类残留溶剂，残留溶剂水平按干燥失重731测定。如干燥失重值大于 0.5%,则需按此分测定法921对样品进行水分测定。除另有规定外，按方法 Ia测定水分。如在各论中的第三类残 留溶剂限量大于50mg/天（方法1的限量为5000Ppm或0.5%）,那就需要进行鉴别并量化，且尽 可能采用以上的操作方法。反之则需要采用一种适当的验证操作方法。

27、操作方法必'须符合 USP相关各论的内容。表1是残留溶剂测定试验应用的流程图。符合要求无需进一步试验计算残留溶剂的量添上标签，写明残留 溶剂的名称及含量不符合试验要求表1.残留溶剂的鉴别和限度试验应用图表其它分析操作方法以下的操作方法是各论中规定的方法，可能会有必要的改动。方法I以下操作方法需要具程序升温的气相色谱仪，多孔涂层的开口管柱，FID检测器。标准溶液一一用无有机物水或各论规定的溶剂配制溶液，使每ml溶液中含有12.0四二氯甲烷,7.6囚1,4-二氧六环，1.6 g三氯乙烯，1.2 g氯仿。注一一每日新鲜配制。供试液一一精密称取一定量的供试品，用无有机物水或各论规定的溶剂溶解并

28、稀释，使得到的溶液 中每ml含有20mg供试品。色谱系统（色谱法621）气相色谱仪，带 FID检测器，0.53-mm 乂 30-m的弹性石英分析柱，液膜为厚5-m 的化学交联G27固定相，和0.53-mm x 5-m的石英保护柱，去活化二苯基一二甲 基硅氧烷。以氨气为载气，流速约为35cm/so 注一一如需要补充气体，可选用氮气。进样口和检测器的温度分别为 70。和260。柱温按如下操作升温。 柱温先在35。维持5分钟，然后以8。/min的速率升至175。，接着以350/min的速率升温至260。，并在260。至少维持16分钟。取标准溶液进样，然后按操作方法记录峰响应：系统适宜时，能使标准溶液

29、中所有成分都能在色谱 图上体现出来；任何两种成分的分离度R不得少于1.0;重复进样后各峰响应的相对标准偏差不得大于15%。操作方法一一取相同体积（约1比）的标准溶液、供试液分别进样，记录色谱图，并测定峰响应。依据保留时间来鉴别色谱图中供试液各峰。通过大量的光谱相对丰度的操作过程或使用第二种具不 同固定相的有效色谱柱，测出相应的保留时间，在该保留时间内，用下表任一有机挥发性杂质或其 他有机挥发性杂质洗脱，从而对色谱图进行鉴别和峰响应分析。除另有规定外，原料中每种有机挥发性杂质的含量不得超过下表给定的限量。有机挥发性杂质限量（闻/g）氯仿601,4-二氧六环380二氯甲烷600三氯乙烯80方法N标准溶液一一按方法I配制标准溶液。用移液管移取5ml溶液到带隔膜瓶盖的进样瓶中，加入1g无水硫酸钠，密封。将封好的瓶子在80。加热60分钟。供试液 精密称取 100mg供试品到并S中，加 5.0ml水或各论规定的溶剂，加 1g无水硫酸钠，加盖密封。除另有规定外，将密封好的瓶子在80。加热60分钟。色谱系统及操彳方法一一注一一可以使用自动转移测定体积的顶空进样装置。顶空进样操作无需使用保护柱。除使用加热气密注射器，1ml顶部空间外，其