GB/T 18636-2017蓝舌病诊断技术

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T18636—2017

代替

GB/T18636—2002

蓝舌病诊断技术

Diagnostictechniquesforbluetongue

2017-11-01发布2018-05-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T18636—2017

目次

前言

…………………………Ⅲ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

临床诊断

3…………………1

流行病学

3.1……………1

临床症状

3.2……………1

病理变化

3.3……………2

结果判定

3.4……………2

病毒分离

4…………………2

器材

4.1…………………2

试剂

4.2…………………2

试验程序

4.3……………2

病毒鉴定

4.4……………4

结果判定

4.5……………4

免疫酶染色

5………………4

器材

5.1…………………4

试剂

5.2…………………4

试验程序

5.3……………4

试验成立条件

5.4………………………5

结果判定

5.5……………5

抗原捕获酶联免疫吸附试验

6(AC-ELISA)……………5

器材

6.1…………………5

试剂

6.2…………………5

样品

6.3…………………5

试验设计

6.4……………5

试验程序

6.5……………5

试验成立的条件

6.6……………………6

结果判定

6.7……………6

定型微量中和试验

7………………………6

器材

7.1…………………6

试剂

7.2…………………6

试验准备

7.3……………7

筛检试验程序

7.4………………………7

试验成立的条件

7.5……………………8

结果判定

7.6……………8

蚀斑及蚀斑抑制定型试验

8………………8

器材

8.1…………………8

Ⅰ

GB/T18636—2017

试剂

8.2…………………9

蚀斑试验程序

8.3………………………9

蚀斑抑制试验程序

8.4…………………9

结果判定

8.5……………9

反转录聚合酶链式反应

9(RT-PCR)……………………9

器材

9.1…………………9

试剂

9.2…………………10

试验程序

9.3……………10

试验成立的条件

9.4……………………11

结果判定

9.5……………11

荧光检测

10RT-PCR……………………11

器材

10.1………………11

试剂

10.2………………11

试验程序

10.3…………………………12

阈值设定

10.4…………………………13

试验成立的条件

10.5…………………13

结果判定

10.6…………………………13

琼脂免疫扩散试验

11(AGID)…………13

器材

11.1………………13

试剂

11.2………………13

试验程序

11.3…………………………14

结果判定

11.4…………………………14

竞争酶联免疫吸附试验

12(C-ELISA)…………………15

器材

12.1………………15

试剂

12.2………………15

试验程序

12.3…………………………15

读数和抑制率计算

12.4………………16

试验成立的条件

12.5…………………16

结果判定

12.6…………………………16

诊断结果判定

13…………………………16

疑似病例

13.1…………………………16

确诊病例

13.2…………………………16

隐性感染

13.3…………………………16

附录规范性附录细胞培养液的制备

A()………………17

附录规范性附录免疫酶染色试验用溶液的配制

B()…………………18

附录规范性附录酶联免疫试验和定型微量中和试验用溶液的配制

C()……………19

附录资料性附录方法

D()Karber……………………21

附录规范性附录蚀斑及蚀斑抑制定型试验

E()………22

附录规范性附录试验用溶液和引物的配制

F()RT-PCR……………23

附录规范性附录荧光引物和探针的合成与配制

G()RT-PCR……24

附录规范性附录琼脂平板的制备

H()…………………25

Ⅱ

GB/T18636—2017

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准代替蓝舌病诊断技术与相比除编辑性修改外

GB/T18636—2002《》,GB/T18636—2002,,

主要技术变化如下

:

增加了临床诊断

———;

增加了反转录聚合酶链式反应检测方法

———(RT-PCR);

增加了荧光检测方法

———RT-PCR。

本标准由中华人民共和国农业部提出

。

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位云南省畜牧兽医科学院中华人民共和国深圳出入境检验检验局

:、。

本标准主要起草人李华春朱建波花群义肖雷宋建领李乐高林苗海生

:、、、、、、、。

本标准历次版本发布情况为

:

———GB/T18636—2002。

Ⅲ

GB/T18636—2017

蓝舌病诊断技术

1范围

本标准规定了蓝舌病诊断的技术方法和试验程序

(Bluetongue,BT)。

本标准适用于反刍动物蓝舌病的诊断流行病学调查及检疫所述方法包括临床诊断病原分离和

、。、

鉴定病原核酸检测以及血清学检测其中

、,:

病毒分离适用于从动物的血液脏器和精液中分离蓝舌病病毒

———、(BluetongueVirus,BTV);

免疫酶染色和抗原捕获酶联免疫吸附试验

———(AntigenCaptureEnzyme-LinkedImmunosorbent

适用于对分离到的病毒进行血清群的鉴定

Assay,AC-ELISA);

定型微量中和试验和蚀斑及蚀斑抑制定型试验适用于对分离到的进行血清型的鉴定

———BTV;

反转录聚合酶链式反应和荧光

———(Reverse-TranscriptionPolymeraseChainReaction,RT-PCR)

检测适用于动物的血液脏器和精液中核酸的检测也适用于对分离到的病毒

RT-PCR、BTV,

进行血清群鉴定

;

琼脂免疫扩散试验和竞争酶联免疫吸附试验

———(AgarGelImmunodiffusion,AGID)

适用于血清样品中抗

(CompetitionEnzyme-LinkedImmunosorbentAssay,C-ELISA)BTV

体的检测

。

2规范性引用文件

下列文件中对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本

。,

文件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()