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  • 正在执行有效
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  • 2004-02-15 实施
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GB/T 19438.2-2004H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法_第1页
GB/T 19438.2-2004H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法_第2页
GB/T 19438.2-2004H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法_第3页
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ICS11.220B41中华人民共和国国家标准GB/T：19438.2-一2004H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法Methodofthereal-timeRT-PCRforthedetectionofavianinfluenzavirussubtypeH52004-02-14发布2004-02-15实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布中国国家标准化管理委员会

GB/T19438.2—2004前GB/T19438-2004《禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》分为以下四个部分：GB/T19438.1-2004《禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法》：-GB/T19438.2—2004《H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》B/T19438.3—2004《H7亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》；-GB/T19438.4—2004《H9亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》本部分的附录A是资料性附录。本部分由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出本部分起草单位：中华人民共和国北京出入境检验检疫局、深圳市匹基生物工程股份有限公司本部分主要起草人：刘环、张鹤晓、赖平安、周琦、刘宁。

GB/T19438.2—2004H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法范围本部分规定了H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR操作方法本部分适用于活禽及其产品中H5亚型禽流感病毒的检测规范性引用文件下列文件中的条款通过本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件.其随后所有的修改单(不包括勒误的内容)或修订版均不适用于本部分然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件.其最新版本适用于本部分。GB/T19438.1—2004禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法缩略语下列缩略语适用于本部分3.1荧光RT-PCR荧光反转录-聚合酶链反应3.2C值每个反应管内的荧光信号达到设定的闽值时所经历的循环数3.3RNA核糖核酸3.4Ta酶T4gDNA聚合酶。3.5PBS磷酸盐缓冲生理盐水3.6DEPC焦碳酸乙二酯原理采用TaqMan方法·在比对禽流感病毒血凝素基因的基础上.设计一对仅在H5亚型禽流感病毒血凝素基因间保守的特异性引物和一条特异性的荧光双标记探针。该探针的结合部位位于目的扩增片段内部。其中5°端标记FAM荧光素为报告荧光基团(用R表示).3"端标记TAMRA荧光素为泽灭荧光基团(用Q表示),它在近距离内能吸收5"端荧光基团发出的荧光信号。反应进人退火阶段时,引物和探针同时与目的基因片段结合.此时探针上R基团发出的荧光信号被Q基团所

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