毕业论文实验步骤(批改稿)

毕业论文实验步骤(批改稿)柳州职业技术学院毕业设计题目：不同温度和PH培养条件下对枯草杆菌的提纯优化姓名：雷小兵学号：20093005032专业：食品检测及管理年级：2009级时间：2011年11月指导老师：覃俊达实验合作者：杨梅娟时间：2011年11月柳州职业技术学院毕业设计（论文）任务书基础部系（部）食品检测及管理专业2班学生雷小兵学号20093005032一、毕业设计（论文）题目：不同温度和PH培养条件下对枯草杆菌的提纯优化二、毕业设计（论文）工作规定进行的日期：200年月日起至200年月日三、毕业设计（论文）进行地点：学校图书馆上网查资料四、任务书的内容：目的：通过此次实验对枯草杆菌有了一个深入的理解，懂得如何根据实际情况培养得出纯种枯草杆菌，会科学地挑选生长环境因素，并在此基础上进行实验，得出结论，找出最佳生长环境，写出对结果的分析。任务：（1）上图书馆查阅微生物方面的科学杂志30-40篇，记录各篇论文的作者、题目、杂志名称、出版地点、时间及页码（如有摘录千万不能弄错是从哪篇文章摘录的）（2）确定一篇论文作为自己的研究起点，查阅该篇论文的参考文献，理出该研究的前因后果（3）依据上述工作确定自己的课题，选择合适的实验设计方案（4）填入模拟数据，进行模拟分析不同温度和PH培养条件下对枯草杆菌的提纯优化摘要】：本文根据实验操作,针对枯草杆菌生长环境的选着，通过对培养基的PH值、生长温度的选择进行实验研究,得出最佳的生长环境。绪论：枯草杆菌是非致病菌细菌，对人畜无害，不污染环境，是好氧的阳性菌，①而且很多学者的研究证明动物饲喂芽孢杆菌后，能显著降低肠道大肠杆菌、产气荚膜梭菌、沙门氏菌的数量，使机体内的有益菌增加而潜在的致病菌减少，因而排泄物、分泌物中的有益菌数量增多，致病性微生物减少，从而净化了体内外环境，减少疾病的发生。氨、胺、吲哚、硫化氢等物质在肠道粘膜对细胞有明显的毒害作用，芽孢杆菌抑制了有害微生物，进而减少有害物质产生，有利于动物健康和生长。②根据（士论文-枯草芽孢杆菌XM16菌株抗真菌蛋白的分离纯化及性质结构研究）中所说‘经过100℃热处理30min，活性未丧失’可知枯草杆菌是十分耐高温的，以此对样品经行预处理。所以本实验以土壤中的枯草杆菌为对象,观察不同温度和PH值对枯草杆菌的生长的影响。从而得到适合枯草杆菌生长的最佳条件。实验阶段：一、准备实验：1、①仪器：恒温培养箱2个、培养皿27个、20ml的吸量管1支、2ml的吸量管4支、干燥箱、高压灭菌锅、水浴锅、250ml的烧杯3个、（制作培养基）250ml的锥形瓶3个、200ml的锥形瓶1个、（废液）洗耳球1个、试管架1个、酒精灯1个、打火机1个、75%的酒精、200ml的试剂瓶电炉1个、3支1ml的吸量管②药品：蛋白胨、牛肉膏、Nacl、琼脂、硫酸、氢氧化钠2、玻璃仪器的灭菌：将所需的玻璃仪器洗净，用报纸包好，放到干燥箱125℃灭菌4h。3、取样：取土壤表层5-10cm下的肥土100g左右，把采得的土壤放入纸袋带回实验室分离。4、样品处理：称取肥土5g放入含有45ml水的锥形瓶中，摇动片刻，然后将此瓶在无菌实验室中用小火加热至悬浊液沸腾，维持15min。而后静置5min。5、培养基的配制：①取蛋白胨2g、牛肉膏0.6g、Nacl1g、琼脂3~4g于250ml的烧杯中，加入200ml的且PH4的蒸馏水，溶解，倒入锥形瓶中。②取蛋白胨2g、牛肉膏0.6g、Nacl1g、琼脂3~4g于250ml的烧杯中，加入200ml的且PH6的蒸馏水。溶解，倒入锥形瓶中。③取蛋白胨2g、牛肉膏0.6g、Nacl1g、琼脂3~4g于250ml的烧杯中，加入200ml的且PH8的蒸馏水。溶解，倒入锥形瓶中。6、生理盐水的配制：称取0.85g的食盐200ml的烧杯中溶解，移入100ml的试剂瓶中。7、湿热灭菌：用棉花塞好装有培养基的3个锥形瓶和装有生理盐水的试剂瓶的瓶口，用报纸包好瓶口。放入高温灭菌锅121℃灭菌20min。8、无菌室的灭菌：将实验服挂于无菌室，打开无菌操作台的紫外光灯，再打开无菌室的紫外光灯，灭菌1h，在做实验前半小时关闭。二、实验操作：1、进入无菌室，用75%的酒精擦拭双手，穿上灭过菌的实验服，将所需玻璃仪器和培养基放入无菌操作台，点上酒精灯。2、吸取2ml样液到1号试管中，再吸取20ml无菌生理盐水到该试管，摇匀，即为10-1。吸取1号试管的样液2ml到2号试管中，再吸取20ml无菌生理盐水加到该试管，摇匀，即为10-2。同方法制作10-3于3号试管中。3、①取PH4的培养基分别倒20ml平铺于3个培养皿中。吸取1号试管中样液1ml，放入培养皿，使样液平铺于培养基上。吸取2号试管中的样液1ml,放入培养皿，使样液平铺于培养皿上。。吸取3号试管中的样液1ml,放入培养皿，使样液平铺于培养皿上。②取PH6的培养基分别倒20ml培养基于3个培养皿中。吸取1号试管中样液1ml，放入培养皿，使样液平铺于培养皿上。吸取2号试管中的样液1ml,放入培养皿，使样液平铺于培养皿上。。吸取3号试管中的样液1ml,放入培养皿，使样液平铺于培养皿上。③取PH8的培养基分别倒20ml培养基于3个培养皿中。吸取1号试管中样液1ml，放入培养皿，使样液平铺于培养皿上。吸取2号试管中的样液1ml,放入培养皿，使样液平铺于培养皿上。。吸取3号试管中的样液1ml,放入培养皿，菌都以上升的趋势生长。表明37℃对枯草杆菌的生长适合。3、从表1、2、3可以看出，在42℃的温度下，PH6和PH8的培养基中的枯草杆菌在36h之前都以上升的趋势生长，但在36h到48h这段时间却变化不大，停滞生长。表明短时间内，能缓慢生长，时间稍长就会出现停滞生长的现象。4、经过比较，在同一时间、同一温度下，PH8条件下的枯草杆菌都比PH6条件下的生长的好，即在同一时间里PH8条件下的枯草杆菌生长状态和速度都比PH6的好。表明在PH8比较适合枯草杆菌的生长。五、得出结论：PH8和37℃的温度下，枯草杆菌生长的比较迅速，旺盛。参考文献：[