DB54T 0328-2024 巨须裂腹鱼规范

ICS65.15054CCSB5254西 藏 自 治 区 地 方 标 准DB54/T0328—2024巨须裂腹鱼2024-04-09发布 2024-05-09实施西藏自治区市场监督管理局  发布DB54/T0328DB54/T0328—2024PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前言 II范围 1规范性引用文件 1术语和定义 1主要形态结构特征 1外部形态特征 1内部结构特征 2生长与繁殖 3生长 3繁殖 4遗传学特征 4细胞遗传学特征 4生化遗传学特征 5检测方法 5抽样 5性状测定 5年龄鉴定 5染色体检测 6肾细胞醇脱氢酶（ADH）同工酶检测 6检验规则与结果判定 6附录A（资料性） 生长方程、体长和体重关系式 7体长和体重生长方程 7体长与体重关系式 7附录B（规范性） 同工酶试剂的配制 8凝胶制备 8加样指示剂 8电极缓冲液 8染色液的配制 8前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规起草。本文件由西藏自治区农业农村厅提出。本文件由西藏自治区农业农村标准化技术委员会归口。本文件起草单位：西藏自治区畜牧总站、华中农业大学、四川律贝生物技术有限公司。袁齐涛、孙锋博、于航、乐地、郭荣明、王润锦、吴海彬、石彬、邹雨婷、廖吕、张鑫崴、胡程鹏。DB54/T0328DB54/T0328—2024PAGEPAGE1巨须裂腹鱼范围本文件给出了巨须裂腹鱼（Schizothoraxmacropogon）的主要形态构造特征、生长与繁殖、遗传学特性以及检测方法。本文件适用于巨须裂腹鱼的种质检测。规范性引用文件（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T18654.11GB/T18654.22GB/T18654.33GB/T18654.44GB/T18654.66部分：繁殖性能的测定GB/T18654.1212GB/T18654.1313术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1学名巨须裂腹鱼（Schizothoraxmacropogon）。3.2地方名胡子鱼。3.3分类位置硬骨鱼纲（Osteichthyes，鲤形目（Cypriniformes，鲤科（Cyprinidae，裂腹鱼亚科（cinae，裂腹鱼属（Schzohora。主要形态结构特征外部形态特征外形细狭，表面具乳突。唇后沟中断。须2对，发达；上颌须末端后伸达前鳃盖骨之后，口角须末端后伸可鳍起点稍前于背鳍起点之下方。体背呈青灰色，体侧青黑色，腹部浅黄色，体侧有少数暗斑。巨须裂腹鱼的外形见图1。图1 巨须裂腹鱼的外形图可数性状背鳍鳍式D.iii-7～8臀鳍鳍式A.iii-5第一鳃弓鳃耙数外侧鳃耙数：15～24；内侧鳃耙数：20～27。鳞式31−339223−26−v101可量性状巨须裂腹鱼可量性状实测比例见表1.表1 巨须裂腹鱼可量性状比例值比例性状平均值（范围）比例性状平均值（范围）体长/体高4.5（4.1~4.9）头长/吻长2.8（2.7~3.1）体长/头长4.4（4.2~4.8）头长/眼径5.8（5.6~6.2）体长/尾柄长5.1（4.6~5.6）头长/眼间距3.0（2.5~3.3）体长/尾柄高9.2（8.6~10.4）尾柄长/尾柄高1.7（1.5~2.0）4.2 内部结构特征鳔鳔分两室。后室细长，其长度为前室长的2.5～3.1倍。下咽齿下咽齿3行，2·3·5/5·3·2或2·3·4/4·3·2。下咽齿细圆，顶端尖而稍钩曲，咀嚼面凹入呈匙状。脊椎骨脊椎骨总数：48～50。腹膜腹膜黑色。生长与繁殖生长雌鱼最大年龄24龄，雄鱼最大年龄27龄。依据664尾样本估算的不同年龄组的鱼体长和体重实测值见表2。生长方程和体长与体重关系式参见附录A。表2 巨须裂腹鱼各年龄组的体长和体重实测值龄组龄雌鱼雄鱼体长(平均±S.D.)mm体重(平均±S.D.)g体长(平均±S.D.)体重(平均±S.D.)g3172.3±14.384.7±13.04207.0±12.8136.5±23.1211.0±15.7151.1±34.35240.3±20.3222.8±49.0233.3±23.0195.0±49.66257.9±18.4279.8±55.5248.1±29.5244.5±90.77286.0±29.8383.9±127.8288.6±38.1401.9±145.38291.0±26.0401.2±101.2300.8±28.0453.4±140.59314.6±32.5514.8±145.4317.1±39.8533.5±159.310333.4±28.0610.1±131.9361.3±27.5785.2±159.711346.5±19.5689.9±11.8352.0±35.4795.7±269.412348.7±22.4721.5±136.5372.3±25.8829.0±159.013351.2±23.6721.0±143.9382.1±21.7922.5±136.914362.5±25.0803.6±162.0391.1±16.81031.5±107.315365.4±18.1857.8±177.3397.5±23.41052.7±141.616378.7±22.4876.8±150.4401.2±24.81092.9±88.517360.4±12.8808.9±108.3408.2±13.81225.0±192.918373.8±23.0832.9±141.0415.7±19.71295.8±166.419384.0±11.31174.9±236.8425.9±20.61368.1±94.820356.5±13.5741.2±83.0417.5±19.11374.9±58.321421.0985.8422.8±23.71173.5±223.422388.01002.4396.0±49.11187.1±200.223427.3±27.11366.9±217.224408.01065.3389.5±41.71720.6±54.125474.01772.126404.01355.627441.01693.5繁殖性成熟年龄雌鱼为9龄，雄鱼为6龄。产类类型性腺一年成熟一次，一次性产出。繁殖期繁殖期为1月～2月。怀卵量依据71尾样本估算不同年龄组个体怀卵量见表3。表3 巨须裂腹鱼不同年龄组的个体怀卵量年龄组龄体重范围g怀卵量（均值±标准差）粒/尾12911.0~1192.69778±5476141106.0~1132.310099±146161074.6~1098.910555±652181277.4~1531.514078±3907遗传学特征细胞遗传学特征染色体数：2n=98，核型公式：20m+28sm+22st+28t，臂数（NF）：146。染色体核型见图2。图2 巨须裂腹鱼肾细胞染色体组型图生化遗传学特征肾细胞醇脱氢酶（ADH）酶带扫描图见图3。图3 巨须裂腹鱼肾细胞醇脱氢酶（ADH）酶带扫描图检测方法抽样按GB/T18654.2的规定执行。性状测定按GB/T18654.3的规定执行。年龄鉴定采用耳石鉴定年龄。方法按GB/T18654.4的规定执行。染色体检测按GB/T18654.12的规定执行。肾细胞醇脱氢酶（ADH）同工酶检测试剂及配制方法同工酶各试剂的配制见附录A。样品的采集与制备从尾静脉抽取2ml血，于4℃、1000r/min离心6min，取上清备用。制胶将混匀的7.0%分离胶液倒入模板，插好梳子，置于36℃左右，待凝胶聚合好后，置于冰箱中备用。点样点样量为20μL。吸取20μL样与2μL～3μL加样指示剂混匀，一起加到样孔中。电泳分离采用聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳。分离胶浓度7.0%。电极缓冲液：pH为8.3的Tris-甘氨酸。280V（起始电流约电泳0.5h5h～6h（酚蓝跑出胶后2h以上）。染色：电泳结束，放入预先配好并在37℃恒温箱中保温的同工酶染色液中染色。检验规则与结果判定按GB/T18654.1的规定执行。附录 A（资料性）生长方程、体长和体重关系式体长和体重生长方程雌性和雄性群体的体长和体重生长方程分别见式（（（A.3）和（）：雌性：Lt=446.0[1-e-0.190(t-0.576)]… Wt=1310.0[1-e-0.190(t-0.576)]2.937 （A.3）雄性：Lt=428.5[1-e-0.218(t-0.218)]… （A.2）Wt=1247.8[1-e-0.218(t-0.218)]2.867 （A.4）式中：Lt－tWt－t龄时鱼体体重，g；e－自然对数；t－鱼的年龄。体长与体重关系式雌性和雄性群体的体长与体重关系式见（A.5）和（A.6）：雌性：W=2.476×10-5L2.937 （A.5）雄性：W=3.551×10-5L2.867 （A.6）式中：W－鱼体体重，g；L－鱼体体长，mm附录 B（规范性）同工酶试剂的配制凝胶制备凝胶制备溶液配制各种凝胶制备溶液的配方及配制方法见表B.1。表B.1各种凝胶制备溶液配方溶 液配 制 方 法凝胶缓冲液Tris56.75g200mLpH250mL4℃贮存。凝胶储液（TEMED溶于蒸馏水中定容到150mL。4℃贮存。AP取过硫酸铵1.5mg溶解到100mL蒸馏水水中。4℃贮存。凝胶的制备7.0%聚丙烯酰胺垂直版凝胶配方见表B.2。表B.27.0%凝胶制备配方凝胶缓冲液,mL凝胶储液mLAPmL纯水mL总体积mL2.412.62.422.640加样指示剂0.15%溴酚蓝-50%甘油：称取0.15g溴酚蓝溶于50mL蒸馏水，再加50mL甘油混匀。电