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法检测DNA

双链断裂和碱不稳定性)SCGE技术是一种在单细胞水平上检测有核细胞DNA损伤和修复的方法。组成单位为四种脱氧核苷酸脱氧核苷酸((...实验二十五真核基因组DNA分离纯化外周血白细胞提取DNA(NaI法)实验二十五NaI法提取外周血白细胞DNA学时数。掌握NaI法提取外周血白细胞DNA的原理和方法。

法检测DNATag内容描述:<p>1、SCGE法检测DNA损伤SCGE的原理(中性电泳液,高盐和变性剂检测双链断裂;碱性检测单链,双链断裂和碱不稳定性)SCGE技术是一种在单细胞水平上检测有核细胞DNA损伤和修复的方法。该技术的原理是基于有核细胞的DNA分子量很大,DNA超螺旋结构附着在核基质中,用琼脂糖凝胶将细胞包埋在载玻片上,在细胞裂解液作用下,细胞膜、核膜及其它生物膜破坏,使细胞内的RNA、蛋白质及其它成分进入凝胶,继而扩散到裂解液中,唯独核DNA仍保持缠绕的环区(Loop)附着在剩余的核骨架上,并留在原位。如果细胞未受损伤,电泳中核DNA因其分子量大停留在核基质。</p><p>2、DNA ladder法检测细胞凋亡 关键词 DNA ladder 检测 细胞凋亡 2011 12 12 14 31 发生细胞凋亡时 内源性核酸酶被激活 染色体DNA链在核小体之间被切割 形成180 200个碱基或其整数倍的DNA片段 将这些DNA片段抽提出来进行。</p><p>3、SDS法提取DNA植物各个部位都可用作总DNA抽提的材料,常用的材料一般为植物幼叶。其基本原理是:先用机械的方法使组织和细胞破碎,然后加入十二烷基磺酸钠(SDS)等离子型表面活性剂,溶解细胞膜和核膜蛋白,使细胞膜和核膜破裂。再加入酚和氯仿等表面活性剂,使蛋白变性。最后加入无水乙醇沉淀DNA;沉淀的DNA,即为植物总DNA,溶于TE溶液中保存备用。三、实验材料、器具及试剂水稻幼叶高速。</p><p>4、实验八 紫外吸收法检测DNA的浓度与纯度 生技1101 112301103 顾晨 一 实验目的 学会利用紫外分光光度计测定样品的吸光度 从而测出DNA的浓度与纯度 二 实验原理 DNA的吸收峰在260nm 蛋白质的吸收峰在280nm 纯净的DNA A。</p><p>5、实验九,紫外吸收法检测DNA的浓度与纯度,一、实验目的,学会利用紫外分光光度计测定样品的吸光度,从而测出DNA的浓度与纯度。,二、实验原理,DNA的吸收峰在260nm 蛋白质的吸收峰在280nm,,1 g/ml,A260=0.02,标准DNA样品,A260=1,双链DNA含量为50 g/ml 单链DNA与RNA含量为40 g/ml 寡聚核苷酸的含量为30 g/ml,纯净的DNA A260/A28。</p><p>6、覃振东覃振东 复旦大学生物技术中心复旦大学生物技术中心 DNADNA测序测序技术技术 DNADNA测序测序 DNADNA是是一种长链聚合物,组成单位为四种一种长链聚合物,组成单位为四种脱氧核苷酸脱氧核苷酸( (dATPdATP dTTPdTTP dCTPdCTP dGTPdGTP) )。这些。这些碱基沿着碱基沿着DNADNA长链所排列而成的序列,可组成遗传密码,长链所排列而成的序列。</p><p>7、实验二十五 真核基因组DNA分离纯化 外周血白细胞提取DNA(NaI法),实验二十五 NaI法提取外周血白细胞 DNA 学时数:3 教学目的:掌握NaI法提取外周血白细胞DNA的原理和方法。 教学重点:实验原理与过程 教学难点:实验原理与方法 使用教具:多媒体 教学方法:互动式、讨论式教学法 讲授内容纲要、要求及时间分配 导入:(用一部著名电影导入正题,激发学生探索生命奥秘的兴趣) 12 min。</p><p>8、目的和要求】 1. 学会CTAB法提取细菌总DNA。 2. 掌握DNA的琼脂糖凝胶电泳法。 【实验原理】 DNA在生物体内是与蛋白质形成复合物的形式存在的,因此提取出脱氧核糖核蛋白复合物后,必须将其中蛋白质去除。CTAB(溴代十六烷基三甲胺)是一种去污剂,它能与核酸形成复合物,在高盐溶液中可溶并且稳定存在,若降低盐浓度,CTAB与核酸的复合物会沉淀出来,而大部分蛋白和多糖仍溶于溶液中。 DNA的。</p><p>9、DNA残留残留检测检测方法比方法比较较及及Threshold特点和特点和优势优势 2011 Molecular Devices, Inc. Devices products are for Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. Molecular Devices, the Molecular Devices lo。</p><p>10、精子DNA碎片检测,检测原理没有DNA碎片的精子在经过酸变性和去掉核蛋白后DNA扩散形成特征性的光晕,而带有DNA碎片化的精子不会产生这种特征性的光晕,根据光晕的有无和大小判断精子DNA碎片化的程度,1.男性不育检测的新指标,(1)最新的世界卫生组织统计数据显示,在已婚夫妇中,非意愿性不孕不育的发生率为7%-46%,并呈逐年增加的趋势,目前精液常规检查项目不能全面评估男性生育力,随着我国工业化。</p><p>11、实验原理 DNA RNA在260nm处有最大的吸收峰 蛋白质在280nm处有最大的吸收峰 盐和小分子则集中在230nm处 因此 可以用260nm波长进行分光测定DNA浓度 OD值为1相当于大约50 g ml双链DNA 如用1cm光径 用 H2O稀释DNA RNA样。</p><p>12、实验一 真核细胞染色体DNA的 分离、纯化和检测,实 验 目 的,通过实验学习从血液中制备染色体DNA的方法。 学习琼脂糖凝胶电泳,检测DNA的纯度、DNA的构型、含量以及分子量的大小。 掌握DNA样品的纯化和定量检测方法。,红细胞裂解液裂解红细胞 细胞裂解液裂解白细胞 用蛋白酶K水解蛋白质 有机溶剂酚、氯仿抽提 在高盐条件下,用乙醇沉淀DNA 再用70%乙醇洗除沉淀中的盐分 即可获得染色体。</p><p>13、一、CTAB法提取DNA主要试剂及配方:CTAB缓冲液(2%):试剂用量(g/L)CTAB20NaCl81.816Tris-base7444EDTA-Na212.114巯基乙醇 23mLpH 8.0称量好后65水浴,搅拌,直至完全溶解,然后定容,调pH24:1。</p><p>14、磁珠法核酸纯化技术采用了纳米级磁珠微珠,这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团,能同核酸发生吸附反应。硅磁(Magnetic Silica Particle)就是指磁珠微珠表面包裹一层硅材料,来吸附核酸,其纯化原理类型于玻璃奶的纯化方式。离心磁珠是指磁珠微珠表面包裹了一层可发生离心交换的材料(如DEAE,COOH)等,从而达到吸附核酸目的。不同性质的磁珠微珠所对应的纯化原理是不一致。使用磁珠法来纯化。</p><p>15、DNA抽提缓冲液 lysis buffer 50mM Tris Hcl Ph7 2 50mM EDTA 3 SDS 1 巯基乙醇 用时加 饱和酚 氯仿 V V 1 1 异丙醇 3M醋酸钠NaOAc Ph8 0 1 称取0 075 0 085g干菌丝置于预冷的研钵中 加入液氮研磨至细粉末状 迅速转至。</p>
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