20040114_gb13105－1991

中华人民共和国国家标准GB1310591食品中硒限量卫生标准TOLERANCELIMITOFSELENIUMINFOODS1主题内容与适用范围本标准规定了食品中硒最大允许限量标准。本标准适用于粮食、豆类及制品、蔬菜、水果、肉类（畜、禽）、肾、鱼类、蛋类、乳类等食品。2食品中硒限量卫生指标食品中硒限量卫生指标见下表。项目指标（以SE计），MG/KG粮食（成品粮）豆类及制品蔬菜（包括薯类）水果肉类（畜、禽）肾鱼类蛋类鲜奶类奶粉030301005053010050030153测定方法31原理将样品用混合酸消化，使硒化合物氧化为无机SE4，在酸性条件下SE4与2,3二氨基萘（2,3DIAMINOAPHTHALENE,缩写为DAN）反应生成4,5苯并苤硒脑4,5BENZOPIASELENOL，然后用环己烷萃取。在激发光波长为376NM，发射光波长为520NM条件下测定荧光强度，从而计算出样品中硒的含量。32试剂试剂规格需用分析纯或优级纯。水均需用去离子水,其比电阻在30104以上。321硒标准溶液中华人民共和国卫生部19910607批准19920301实施GB1310591精确称取元素硒1000MG，溶于少量浓硝酸中，加入2ML过氯酸（7072），置沸水浴中加热34H，冷却后加入84ML盐酸（盐酸浓度为01MOL/L）。再置沸水浴中煮2MIN。准确稀释至1000ML。此为储备液（SE含量100G/ML）。应用时用01MOL/L盐酸将储备液稀释至每毫升含05G硒。置于冰箱内保存。32201DAN试剂此试剂在暗室内配制。称取DAN200MG于一带盖三角瓶中，加入01MOL/L盐酸200ML，振摇约15MIN使其全部溶解。加入约40ML环己烷，继续振荡5MIN。将此液倒入塞有玻璃棉（或脱脂棉）的分液漏斗中，待分层后滤去环己烷层，收集DAN溶液层，反复用环己烷纯化直至环己烷中荧光降至最低时为止（约纯化56次）。将纯化后的DAN溶液储于棕色瓶中，加入约1CM厚的环己烷覆盖表层，置冰箱内保存。必要时在使用前再以环己烷纯化一次。323混合酸液将亚硝酸及高氯酸（7072）按21体积混合。324去硒硫酸取浓硫酸200ML加于200ML去离子水中，再加入48氢溴酸30ML，混匀，置沙浴上加热至出现白浓烟，此时体积应为200ML。325EDTA混合液A02MOL/LEDTA二钠盐称取37GEDTA二钠盐加热至完全溶解于水中，冷却后稀释至500ML；B10盐酸羟胺溶液称取10盐酸羟胺溶于水中，稀释至100ML；C002甲酚红指示剂称取甲酚红50MG溶于少量水中，加稀释氨水111滴，俟完全溶解后加水稀释至250ML。将上述A及B液各取50ML，加C液5ML，加水稀释至1L，混匀。326稀释氨水氨水水11（V/V）。327浓盐酸（比重12）。328环己烷市售品需先测试有无荧光杂质，必要时重蒸后使用，用过的环己烷可回收，重蒸后再使用。32910盐酸溶液10ML浓盐酸加90ML水33仪器主要仪器为荧光分光光度计。34试样341粮食样品用水快速洗三次，置60烤箱中烤2030MIN，俟表面水分除去后，以不锈钢磨磨成粉状，储于塑料瓶中，放一小包樟脑精，盖紧瓶塞保存，备用。GB1310591342蔬菜和其他动物性食物取可食部，用蒸馏水冲洗三次后，用纱布吸去水滴，用不锈钢刀切碎，取一定量样品在鼓风烤箱中于60烤干，称重，计算水分。磨成粉保存，备用。计算时应折合成鲜样重。35分析步骤351样品的消化称含硒量约为00105G的粮食或蔬菜及动物性样品0520G于磨口三角瓶内，加10ML5去硒硫酸，俟样品湿润后再加20ML混合酸液放置过夜，次日置沙浴上逐渐加热。当剧烈反应发生后，溶液呈无色，继续加热至白烟产生，此时溶液逐渐变成淡黄色，即达终点。某些蔬菜样品消化后出现混浊，以致难以确定终点，这时可注意瓶内出现滚滚白烟，此刻立即取下，溶液冷却后又变为无色。有些含硒较高的蔬菜含有较多的SE6，需要在消化完成后再加10ML10盐酸，继续加热，使再回终点，以完全还原SE6为SE4，否则结果将偏低。3524,5苯并苤硒脑的生成与测定3521上述消化后的溶液加入20MLEDTA混合液，用氨水（11）及盐酸调至淡粉红橙色（PH1520）。3522以下步骤在暗室中操作加入DAN试剂3ML，混匀后，置沸水浴中加热5MIN，取出冷却后，加环已烷30ML，振摇4MIN，将全部液体移入分液漏斗，俟分层后放掉水层，小心将环已烷层由分液漏斗上口倾入带盖试管中，勿使环已烷中混有水滴，于荧光分光光度计上用激发光波长376NM、发射光波长520NM测定苤硒脑的荧光强度。353硒标准曲线绘制精确量取标准硒溶液005G/ML00,02,10,20及40ML相当000,001,005,010,及020GSE,加入去离子水5ML后，按样品测定步骤同时进行测定。已知当硒含量在05G以下时荧光强度与硒含量呈线性关系，所以在大量测定样品时，每次只需作试剂空白与样品硒含量相近似的标准管（双份）即可。36分析结果的计算SF2F0XF1F0M式中X样品中硒含量，G/G；S标准硒含量，G；F1标准硒荧光读数；F2样品荧光读数；F0空白管荧光读数；GB1310591M样品质量，G。37精密度变