[生物医药论文精品]黄芩的新型提取方法研究.pdf

- 1 - 黄芩的新型提取方法研究黄芩的新型提取方法研究黄芩的新型提取方法研究黄芩的新型提取方法研究 摘要 目的目的目的目的: : : : 探索黄芩的新型提取方法。 方法方法方法方法: : : : 采用紫外分光光度法测定黄芩 苷含量，比较水提法与液-液连续萃取法对黄芩苷提取率的差别。结果结果结果结果: : : : 水提法 与液-液连续萃取法对黄芩苷提取率差别有统计学意义。 结论结论结论结论: : : : 液-液连续萃取法 是一种新型高效提取方法。 关键词 黄芩；液-液连续萃取法 a novel extraction method of baicalin from radix scutellariae abstract objective: to explore the novel extraction method of baicalin from radix scutellariae. methods: liquid-liquid continuous biphasic extraction was compared with the one of the traditional method of aqueous extraction and acidic deposition, determining the contents of total flavone by uv. results: the novel extraction method was much better than the traditional one. conclusion: the novel extraction method is easy operation and has good reproducibility. key words radix scutellariae; liquid-liquid continuous biphasic extraction 黄芩（radix scutellariae baicalensis）为唇形科植物黄芩（scutellaria baicalensis georgi）的干燥根。具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎之功，用于发热烦躁、 肺热咳嗽、泻痢热淋、湿热黄疽、胎动不安、痈肿疮毒等症 ?。主要有效成分是 黄酮类：黄芩苷、黄芩苷元、汉黄芩苷、汉黄芩素等。黄芩根中含有黄芩酶，能 够促进黄芩苷和汉黄芩苷水解，生成黄芩黄素和汉黄芩黄素，黄芩黄素分子中带 有三个邻位的酚羟基，性质不稳定，容易被氧化转为醌类衍生物，质量随之降低 ?。目前黄芩提取方法有水提取酸沉淀法、超声法、超滤法、醇提取酸沉淀法、 微波提取法等，而常用的为水提取酸沉淀法，但水提取存在黄芩有效成分提取不 完全、提取出的杂质较多等缺点，因此本文采用液-液双向萃取法提取黄芩有效 成分3，并与常用的水提法进行比较。 仪器与试剂仪器与试剂仪器与试剂仪器与试剂 1.仪器仪器仪器仪器 phs-3c 精密 ph 计（上海雷磁仪器厂） ；旋转蒸发器 re-52a（上海亚荣 生化仪器厂） ；shz-型循环水真空泵（河南省巩义适英峪仪器厂） ；uv1700（日 - 2 - 本岛津） ；bs2245 电子天平（北京赛多利斯一起系统有限公司） ；紫外分析仪； 超声清洗仪。 2.试药试药试药试药 黄芩苷标准品 （中国生物制品检定所） ； 无水乙醇、 磷酸、 na2hpo412h2o、 nah ?po?2h?o、盐酸、醋酸、95%乙醇均为分析纯，黄芩药材经兰州大学药学院 生药研究所马志刚教授鉴定为唇形科植物黄芩（scutellaria baicalensis georgi）的干 燥根，粉碎过 60 目筛；磷酸盐缓冲液自配（以磷酸溶液及磷酸氢二钠溶液配制 ph 值为 2、3、4、5、6、7 的磷酸缓冲液） 。 方法与结果方法与结果方法与结果方法与结果 1.1.1.1.黄芩苷标准曲线绘制黄芩苷标准曲线绘制黄芩苷标准曲线绘制黄芩苷标准曲线绘制 ? ? ? 精密称取干燥至恒重的黄芩苷对照品 10.29mg， 加 70% 乙醇超声溶解， 定容于 50ml 容量瓶中。 精密量取黄芩苷对照品液 （0.2058mg/ml） 0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml 分别置于 25ml 容量瓶中，加入 20ml0.2mol/l 盐酸，再加 70%乙醇至刻度，摇匀。于 276nm 波长处测定吸收度， 随行试剂空白。以吸光度 a 为纵坐标，浓度 c 为横坐标绘制标准曲线。回归方程 为：y = 0.0551x0.0021, r ? =0.9993（n=6） ，黄芩苷在 4.11624.696mg/l 范 围内具有良好的线性关系。 ? ! “ # $ % 46789:;46789:; 46789:; fig.2 device of liquid-liquid continuous biphasic extraction 2.2 普通方法提取 精密称取黄芩药材粉末约 5g，提取三次，第一次以 10 倍量 沸水烫过煎煮 2 小时，第二、三次分别加 8 倍量水进行煎煮、每次 1 小时，合并 煎液，滤过，滤液加 2mol/l 盐酸（80）调节 ph 值至 2 保温 1 小时，静置 24 小时，滤取沉淀，用水洗至 ph5.0，继用 70%乙醇洗涤至 ph7.0，低温干燥，即 得，同法提取 6 组。 3.3.3.3.样品测定样品测定样品测定样品测定 于样品提取物中加入少量 70%乙醇微热使溶解，转入 100 ml 容量 瓶中，超声溶解 30min，以 70%乙醇定容，滤过，弃去初滤液，精密吸取 5.0ml 续滤液以 70%乙醇定容于 50 ml 量瓶中,精密吸取 1.0 ml 置于 25ml 容量瓶中， 加入 20ml0.2mol/l 盐酸，再加 70%乙醇至刻度，摇匀。于 276nm 波长处测定吸 光度。 4.薄层检视薄层检视薄层检视薄层检视 黄芩苷对照品的 70%乙醇溶液作为对照品溶液、 黄芩液-液双向萃取 样品提取物及普通方法样品提取物的 70%乙醇溶液作为供试品溶液，照薄层色谱 法试验， 以毛细管吸取上述溶液， 分别点于同一聚酰胺薄膜上， 以醋酸为展开剂， 展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。 5.5.5.5.提取物含量比较提取物含量比较提取物含量比较提取物含量比较 所得含量为每克黄芩药物中所含的黄芩苷的毫克数。 levene 方差齐性检验 f=4.794，p=0.0530.05，可认为两总体方差相等。取 t= -8.148， df=10，p=0.0000.05，可认为普通提取与液-液双向萃取所得 m ?/m之间差异 有统计学意义。 a aa ab bb bcdefghefijklmnop cdefghefijklmnopcdefghefijklmnop cdefghefijklmnop - 4 - qrstbquv qrstbquvqrstbquv qrstbquvsrwxrywzxzvz srwxrywzxzvzsrwxrywzxzvz srwxrywzxzvz xzr xzrxzr xzr_ _ _varxwz varxwzvarxwz varxwzbvuc bvucbvuc bvuc defghi j k lgmnop g q eheg q f r fh q eg s h qr gih q g i dh q g f g n k mn tu vnwmwx ed q eied qs eei q ege sq efe y q f de yq d y j z z lgmnop d yqyy| ef q eefdh qs hddg q dhgdh q r i s d f q r d d n z z mn tu vnwmwxrrqr hddi q de ysqy i y|qyyys q fgi s q | i 6.6.6.6.薄层检视结果薄层检视结果薄层检视结果薄层检视结果 薄层检视显示两种方法提取物的供试品色谱中， 在与对照品色 谱相应的位置上，均显相同颜色的荧光斑点。 讨讨讨讨论