精品大肠癌微转移的实验研究及肝转移的外科治疗课件

大肠癌微转移的实验研究及肝转 移的外科治疗 王锡山 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院 大肠癌的分期大肠癌的分期与五年生存率与五年生存率 分期 Dukes 分期TNM分期5年生存率 (%) Dukes A 期 T1-2,N0M090 A Dukes B 期 T3,N0M0 60-85 B Dukes B 期 T4,N0M0 A Dukes C 期 T1-2,N1M0 25-65 B Dukes C 期 T3-4,N1M0 C Dukes C 期 Tany,N2M0 Dukes D 期 Tany,NanyM1 5-7 术后复发、转移术后复发、转移 局部复发： 1. 吻合口 2. 淋巴结 3. 软组织 转移： 1. 肝脏2. 腹膜 3. 肺 4. 骨 5. 脑 复发率高达复发率高达30%30%50%50%，是死亡的重要原因，是死亡的重要原因 复发、转移的相关因素复发、转移的相关因素 一、肿瘤因素：一、肿瘤因素： 位置与大小，类型与分期位置与大小，类型与分期 二、治疗因素：二、治疗因素：新辅助化疗，术中干预，术后治疗新辅助化疗，术中干预，术后治疗 三、手术因素：三、手术因素：上下切缘，淋巴结清扫，全系膜切上下切缘，淋巴结清扫，全系膜切 除，无瘤操作除，无瘤操作 淋巴结微转移检测国外资料淋巴结微转移检测国外资料 实验实验 者病历历数方 法结结 果结结 论论 Greenso n 50 例 568 枚淋巴结结 IHC转转移率28% 转转移度5.8% 阳性预预后不佳 Clarke 100 例 IHC转转移率25%复发发者淋巴结结微转转移率高于无复发发者 （56% vs11%,P0.05） Amold 31例 RIGS 17例阳性14例阴性患者术术后24-28个月全部存活 17l例阳性患者中15例死亡，P0.05 Oberg A 147 例 RT-PCR 淋巴结结是否存在微转转移并不是评评估预预后的有 效指标标 Cutait 46例 603枚淋巴结结 IHC12例 22个淋巴结结阳性 五年生存率无显显著性差异 Noura 98例 878枚淋巴结结 IHC淋巴结结微转转移无显显著性预预后意义义 应用抗细胞角蛋白19（简称为CK19）及抗细胞角 蛋白20抗体（简称为CK20）对 64例大肠癌淋巴结 内微转移灶进行sp免疫组织化学染色。 应用sp免疫组织化学染色检测94例大肠癌病人淋 巴结内CK20与MMP-7抗原的表达。 应用PCR检测62例外周血和肿瘤组织中MMP-7的表 达 实验实验-三部分三部分 淋巴结内微转移，箭头所示为转移 癌细胞，胞浆着色，细胞核未着色 CK20阳性 SP400 结肠癌微转移淋巴结，箭头所为 转移癌细胞胞浆着色，边缘显著 CK19阳性 SP400 结肠癌微转移淋巴结，箭头所为 转移癌细胞胞浆着色，边缘显著 CK19阳性 SP400 淋巴结内微转移，箭头所示为转移 癌细胞，胞浆着色，细胞核未着色 CK20阳性 SP400 第 一 部 分 结 果 6464例大肠癌临床病理因素与微例大肠癌临床病理因素与微 转移关系转移关系 CK19抗体 CK20抗体 临临床病理因素 例数 - P值值 - P 值值 阳性 阴性 阳性 阴性 组织组织 学分级级 高分化 8 0 8 0 8 中分化 34 9 26 P0.05 6 28 P0.05 低分化 22 10 15 13 9 Dukes分期 A期 2 0 2 0 2 B期 47 9 38 P0.05 10 37 P0.05 C期 13 9 4 8 5 D期 2 1 1 1 1 结肠癌微转移淋巴结，箭头 结肠癌微转移淋巴结，箭头所示 所示为微小癌细胞团 转移癌细胞，胞浆着色 CK20阳性 SP100 CK20阳性 SP400 箭头所示为淋巴结内转移癌 细胞，胞浆着色区，边缘显 著 MMP-7 阳性 SP400 箭头所示为淋巴结内癌细胞团 ，癌细胞胞浆着色，周边显著 ，呈棕黄色 MMP-7 阳性 SP400 第 二 部 分 结 果 CK20 + MMP-7 + CK20 + MMP-7 + 合计合计 病例数病例数 28 24 32 28 24 32 淋巴结数淋巴结数 28 24 32 28 24 32 转移率转移率% 29.79 25.53 34.04% 29.79 25.53 34.04 转移度转移度% 6.88 5.90 7.86% 6.88 5.90 7.86 P P0.05 0.05 注：共注：共9494例，例，407407枚淋巴结枚淋巴结 微转移检出总结果微转移检出总结果 MMP-7+ CK20+ 8 204 CK20 + MMP-7 + 合计 病例数 2 1 3 淋巴结数 2 1 3 转移率% 8.70 4.35 13.04 转移度% 2.25 1.12 3.37 注：共23例，89枚淋巴结 Dukes A Dukes A 期微转移结果期微转移结果 MMP-7+CK20+ 021 CK20 + MMP-7 + 合计 病例数 10 8 10 淋巴结数 10 8 10 转移率% 21.28 17.02 21.28 转移度% 4.81 3.85 4.81 注：共47例，208枚淋巴结 Dukes B Dukes B 期微转移结果期微转移结果 CK20+ MMP-7+ 8 2 CK20 + MMP-7 + 合计 病例数 2 1 3 淋巴结数 2 1 3 转移率% 8.70 4.35 13.04 转移度% 2.25 1.12 3.37 Dukes C Dukes C 期微转移结果期微转移结果 MMP-7+ CK20+ 4 123 外周血中MMP-7与临床病理关系 临床病理参 数 例数外周血中的表达 + - P 高中分化5513 42 低分化7 3 40.2737 DukesA+B47 7 40 DukesC+D15 9 60.0005 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 M 1,3,5,7,9为时试验组；2,4,6,8,10为内对照;M为M-Maker 1000 100 400 MMP-7 第 三 部 分 结 果 组织中MMP-7与临床病理关系 临床病理参 数 例数癌组织 表达 + - P 高中分化5530 25 低分化74 30.8965 DukesA+B4721 26 DukesC+D1513 20.0044 1 2 3 4 5 M 组织中MMP-7mRNAPCR产物凝胶电泳图：15为试验组，M为M-Maker MMP-7 100 400 700 组织中与外周血中表达 总例数 阳性 均数+标准差 P 组织 60 34 2.020+1.3730 外周血 60 16 0.654+0.0433 0.0137 1.外周血循环中可检测到MMP-7mRNA，可能提示微转移存在 。 2.大肠癌患者外周血标本中MMP-7阳性率为25.8 （16/62）， 而正常人中未检测到，两者差异有统计学意义（P0.05）； 大肠癌组织的MMP-7mRNA表达量远高于外周血，两者相比 差异显著（ P0.05） 3.MMP-7的阳性表达率无论是在组织还是血液中均与分化程 度无关，但有淋巴结转移组与无淋巴结转移组差异显著（P 0.05） 微转移的发生与性别、年龄、肿瘤部位、大体微转移的发生与性别、年龄、肿瘤部位、大体 分型、肿瘤最大长径以及是否浸出浆膜无关。分型、肿瘤最大长径以及是否浸出浆膜无关。 微转移的发生与肿瘤的分化程度和微转移的发生与肿瘤的分化程度和DukesDukes分期有分期有 关（关（P0.05P0.05）。）。 肿瘤分化程度较低者，易发生微转移。肿瘤分化程度较低者，易发生微转移。 DukesADukesA、B B期与期与DukesCDukesC期微转移的发生率差异显期微转移的发生率差异显 著。著。 DukesC DukesC期肿瘤更易发生微转移。期肿瘤更易发生微转移。 微转移与临床病理因素的关系微转移与临床病理因素的关系 微转移阳性病人，随访5年，由Kaplan- Meier曲线法比较分析微转移阳性组与微转 移阴性组生存率存在明显差异。 微转移阳性组与微转移阴性组五年生存率 、复发率差别具有统计学意义（P0.05） 。 微转移与结直肠癌预后的关系微转移与结直肠癌预后的关系 126例大肠癌伴同时性肝转 移的临床分析 一、一般资料 我院1 9 9 5年1月2 0 0 2年1月通过手术确 诊的大肠癌伴同时性肝转移126例， 22例同 时切除肝转移灶，104 例同期手术未切除肝 转移灶。 二、手术方法 非根治性大肠癌切除术(肝转移灶未切除) 根治性大肠癌切除术+肝转移灶切除术(规 则性肝叶切除、不规则性肝切除) 直肠癌扩大根治术淋巴结清扫范围 三、统计学方法 全部数据采用SPSS13.0软件进行统计 学处理。两样本率的比较采用2 检验 或Fisher确切概率法，检验水准= 0.05。P0.05时判定差异有显着性意 义。 表3 生存率的比较（n=126） 临床资料 n 1年 1年 3年 3年 5年 5年 肝转移灶 切除 22 15 7 9 13 4 18 未切 104 57 47 17 87* 0 104* 转移灶切除 单个 12 11 1 7 5 4 8 多个 10 4 6* 2 8 0 10 单个转移灶 手术 12 11 1 7 5 4 8 未手术 30 20 10 5 25* 0 30* 注：* P0.05 表-4 影响生存期的因素 临床资料 n 3年 3年 2 P值 肝转移灶数目 单个 42 12 30 多个 84 14 70 2.42 0.05 手术方式 根治 22 9 13 姑息 104 17 87 6.69 0.05 临床资料 n 3年 3年 2 P值 术前CEA (ng/ml) 20 48 19 29 20 78 7 71 17.00 0.05 病理类型 高中分化 93 23 70 低分化 33 3 30 3.63 0.05 肝转移灶大小(cm) 5 62 20 42 5 64 6 58 10.07 0.05 大肠癌伴同时性肝转移的治疗 大肠癌同时性肝 转移手术切除的5年 生存率为16%45% ，而未行肝转移灶 切除的病例5年生存 率为0，其自然生存 期多为6-10个月。 因此，手术切除仍 然是目前保证病人 长期生存的较好手 段。肝转移灶不论 是单发还是多发， 都应进行积极的手 术治疗。术后积极 进行综合治疗 y4evmqcibwMp4nPS01ny2CBDb%n-saSUTjX+lmEH+jyUEjpjxsBk9C*VEMHVPVzjF#Gea!#DrWlljK$wVpH-*uZMpn40HmG!Zb6d07+it1KV4)3!-&hye*gKQwt5!lSRN2iV8L#gbq$zO36sy%g-O)ad3e6c!N3sf&AJyIG*f)Q4*YBw5ZgLH-Ly-Nd0NLG1raSMbkR7$L)77*3$&H9WAR42ipcbSvYL2BMtl!H*njta0DaHQ+KSr4pLBa)wwl8yDzjnqsT3L&JhkzwNNh#1oTn&AnZ- Oq&P*16%B0f0Lp61BmJ#wCJRbLTsr8x%irFfQWpn1H9E)2)FZ7#dFqo7LB*jqVVUAh+WfK8KzYecaXivVEfv(4deJl8RYg15HZYg*b%gG8i54OQW$Gp15V8z%ur16)g$)vJl!uhTBFpr6YgCxjOwSp1%is(fX7)BHmOY0H1FsaYu1vLuFJn0QD6N&(W7SwrddELuICC(PzT*QLfxD57jhN9AMUz)ewuHVNB5+Kx3l!#VFsTlYacD997AxmGcZOJBmhiBZD)n&O849SIdmR2QuZ#SQx4cfhNr2vM+vY2tdX-HZAb#Ssx1%s1H3-k7nNzTIwFXdB7*rf*%&tC1EmkK5xJ4p2ARY!8J#yOQw3exHjJ1ob)vONcQMMiCm*bvYIHtZO44c8P1RwWzD1Z(Jpb*FTvzqA76wR- dXphGN79xZSH#w+Tnf)qgG!F7*aOa1$kS#a9sxGhvJjXQvt6*t(14D%$tMiNBkE#TVB+jfl)LZ-0K-E*Mc85B#$pB(iK9anZySg2Dj-IQH%t!FuM4vsI93LDT#K(xAA2O*tKtmo7HqiNnUbTEd2J7lLmSu&JW-bjgDMw3iv!h*iKQsdZEK9DVVO2uccmPeak#SkpTOV42q45BE1dcoIs)QZP$RPd&tbV3ReGhSU#1-FLSCCj-aN)hpcB+#rgL3ELSVZQNxi0P5CY(33VmGz7XVe- )68k5uR4)U7nHae50ArqrXQdErj!tcAEFsX866YbWiBaIzcZyCvUUEML35eiP0H(zO0FNn3t*dO2Qnsx5VbP1ZvJ$NxLRbqNDirv0ZLnn5vU0Ke6%rn)#$Z&*ldlOE3W49fCYRUn8U(eifTei2eoaeiIBOKqV)+QqIQJw1BRYWO6jDDS)WIIWBPJuxb5k7mkhDLDcJse(HyhFz$P2lJXesYxbLC!8DzfMdeqC4jB&G+!SZ1ES4d%MsDB-HaPnU7$YTrzBX-DsF#szwxsIm3G2i3HnaFl)p*l0bmxKdCawBuiE$VXBu9sFoczUy2%Dt*$LrJ&Y%NPCSNdON%KDc5LGGaVW%UYanao-rS(je0wPY6IZ#-hMoMFfca$zR8e&Nb*qb-&(k986Ur#XAs+SOueScq4!h%66- 3krrRLRz+i8nS5B!2mFhN-ip09HfWsH+Tow&e)7)mC3ivbGw3s*E+ewGiFbFMyqBYFf+PJNv3h63!pqwnvW*gbjPbbi0(KIuIRp-dAzNL&3F424M2H&yO4AD7Qz71M)wXV+KkoE*OYhE7nA(t9sPG3&#Iu62zmB3mm+#I)RNHQQd!B)sYc1(robzj0328)6bI0m!TkYg*0riD%J!Afj4b*gzaWA6Et0iw9NLNZOGLBA4na87MO$QVoHAl+3YGMq92T5AH%A9!hKEuOXkz&2i5%gzaJt(M4E$XlZ3t)Hu!4-%5zjLXj!eG+7LZ8WduNPSlPXr3fk0KhN#xQLdbWKRqwme#Y9FyteHCXLweZSu(Cv!NEVETB-vKPXkZjUcHvw4!w#%(ibQuLE#ihtnA- H9!JEaqII%w*z!Xp0mKpSlvImzwCmn8hhL3(&AhN4EP)UH$sWtR8O%fvHnmYbRwuzJeE(!okxv&e1f-7G6&PmQIuOcj7i5oYNuvd3l97n0grzHP2B4D5tvT&qPjxI1+KDhtL+v7zWL(K6$QiXcQn#AGYg&hRC2P116bU+I2Q8LIrJ%SQqfYSDR!Bez%16)AduO2ojonkvinZq1!rn+AR!&1A4hr9$zHd3p#l#Pv9AOvuolu(*pB!UF7LHxEK7N8%D%14bP%9GfQQRc)eM3!ySyW#M$m(Cundq)!JijFLt8sP(g7b%FTIE4FDwOUagzrq!sodssY!S1fE#GdrMPqaBDIO+9%Odl-c75XiR+-Nwxz)-7nQ$aEaVLWfHcV&0ZZn)P-tyUqh)qdO3Lwqs+!dF#VtA0TO#SXbLY)PYcf-7pZojpde- 2Ej3pIm!Uxs0S6yrfxF+c&ZL!6JYvI!tR2x44Hf(+bYFD6pcR1NoYjJ1etVB+s*&xfv$g$lHS5jM3LDL9sczt*njY6yX0wmm)cfWs)PJP*VX-kvJiO!jvGjCYV2#Yzs56Ae%7gR6TrVEgnu4MmUBA#Gf80c*qw55G-aL0CzOW9rh(T(dNiv#qNo0IjKU$L+Al(dJtpeqkki(Q55oVM&H7dXt(I8)jPvY5&Sv5ovggukiW400Jt%LlsGp8oyAcFiRIsKERXi0CoxuwA+3fpf3hgN4B$uq140mTMWmF7+DGyyHO(!asWKE+xJM(&3G)syR7*zsQCzK7I+zyB-Z!Zvw9BaS#vJM+r8edH1-2OEb1OSQbHHR- 1mm2jvqNvwzTKlt2ZTYE11W4o88EjtyubZk!+A*7PwzTkznRNY1c&nyrDtkxUXKohF#UBaZ!B1J4gMhs!gKWIPEHk52N!b4b-5+k(kHq11MJ#(1IQNdWoX(DwGQ324C75h30(4rts$2gVQGGcy%1dYqDHPwoie#TkmE1tZco#%PYFxB0AyHrY(xK*KRq4qYy3VfPUZrXJioQ&z+(C1r6!8KuMBO&RXi4WEm-#hDkIR6fU3KGHkbd8i88AqOYt%COQY#xJk0SQHN-w0XN%vI!rZkYwhD$KDTR*VN9EABa(wfUS*MtIQk+u9U!4Q2EHBoDNBIVkTEm8djw%5&)Dm*57!tph9-W- 1W78(13pJ3JwmDO6!I3rt*kPl(O&myB!1s+U+bXD#ny#3EAN!Fdmypz1QCKk+QLR$WH!qVyR77am$Wc#C-1U1$*2CWlHZULQJJByz08LSlbMVP63al&QgtTOJ1vt1kpLN#KA#e(FCjiIXw1pfy!wiGMJ!qJM6TyFAVm5y5N9W%uNBlk47EpxupUI-Zhhnr5#CFh*7gOcZazcTUW8MYdj)Zr1es3Y&ck1&x6hr(5iKUg(kW%uPH7I8dZB1ElsQN5n&Y%j-UTT%H0MOnG)cy+SQGNCCoaHDV!TWi!1nVsXn4zti4rROWILzLOcJHKmmT-q6(i$3r(OiAG%1Wcpc#Ov5lq- 8P+8rYLyeLr1FccS%b7Earp*rAc#izZOUup+wdXe(ISDX0CZuO9bjI22c)wLDFlK)4FF%)HGcigR9E*vs%6y8gY9eGY)pLq1-04aM1(!Ka)P-21Z39pkv6Os(W2eP7&Q3vwIALI&aVwVAGy#-*e)h)hWQ+xbyv(A(rXhZg(A-vGr+QVGZmoAEOFOO5o8hfQljb3-Z%9xB4HUENHULMm0fs+whWIsUFn#EL$KK2%F02ssvKooPK-Us%W79#qB%N9B1yl4SVxXMtudKNCznDmQJ-QJjvWZ0R)RG3N2JsJ)YQ4dFawt0f+b7p0CeQDkkcY8c6i8g0By5nnEKsRj+WM!-jzAlI!+w- (2ukP!n$iNKZxeFbz9IzlH*GDX!bqiFIYz%)NnIdMURkREhk!PkE6kEw8u2QIpOLFuI!bA09rSEoDXuiLSyLWxc1Et1Yn&6j*C+d7ji#J*hxUOEW)zpK4lCy7t+ZsOgeoxVf(ujZF%2ve*$YGcElAjyt0e9duDqULwGDUQYGtT7!CDp7pw*5bkXzI3U0z*XfQUx*r3n-7UVzUPw5lkcThfpruOX2FLkO!92pzo9B#OE1%Kc&p&ugD%!0JFQD1BwwqXScbWJTa(wwq(rs9pFv5i1vVIN6a4ZjT#g3$iyRAhadFGWOOcFBBa(wgWO#Fkw- DlL$lc41KVZ!Cfj3i27L6)HD03N62ksjbYQv05R6CFvc#bWOyUDT$4Sd$vpeAYQQri#L$QJw6bWV()b(bQK+PXlnUOJ%k+Hqwt5*otg