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文档简介
1、双毁髓法处死蟾蜍; 2、血涂片的制作; 3、洗涤方法(标本片的冲洗); 4、染色方法(整个染色过程的规范化); 5、显微观察技术(显微镜的正确使用)。 上次实验所涉及的理论知识: 1、细胞化学法 2、线粒体 上次实验所涉及的基本操作技能: 回顾 第二次实验 1、细胞膜的通透性观察 P34 2、小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动 的观察 P38 I I 细胞膜的通透性观察细胞膜的通透性观察 P34 P34 一、实验目的 掌握细胞膜对不同性质和不同分子 量大小的物质的通透性。 二、实验原理 将红细胞悬液滴加到数种 等渗溶液中,由于红细胞膜对 各种溶质的通透性不同,有的 溶质可以进入,有的溶质不能进入,溶质进入红 细胞内渗透压则增高,水分子随即进入细胞,引 起溶血。由于溶质进入速度互不相同,因此溶血 时间也不相同。 由此可以判断细胞膜对物质的 通透能力。 正常红细胞 红细胞溶血 三、实验观察 1.观察10兔红细胞悬液 2.观察溶血现象: 取一支试管加入4.5ml蒸馏水, 再加入0.5ml兔红细胞悬液混匀,观 察溶液颜色变化。 0.5ml兔红细胞悬液 浓度: 0.17mol/L 4.5ml 氯化 铵 硫酸 钠 草酸 胺 硝酸 钠 氯化 钠 3.观察兔红细胞膜对不同等渗溶液的通透性 0.5ml兔红细胞悬液 浓度:0.32mol/L 4.5ml 葡萄 糖 甘油 乙醇 四、注意事项 1、两人一组,一人观察,一人记 时,10min 为限; 2、观察完一种溶质后,将试管洗 净,并尽量控干水分; 3、滴管不能混用。 小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察 P38 P38 一、实验目的 了解巨噬细胞的吞噬活动。 二、实验原理 巨噬细胞(macrophage)在机体的非 特异性免疫中具有重要作用,当它接触 到病原体等异物时,伸出伪足将其包围 并吞入细胞,形成吞噬泡,进而与初级 溶酶体融合,将异物消化分解。 巨噬细胞吞噬异物的能力在一定程 度上反映了机体免疫水平的高低。 巨噬细胞(macrophage) 三、实验步骤 腹腔注射淀粉肉汤(含台盼蓝 ) 1ml/次/天(3天) 诱生巨噬细胞 (已完成) 腹腔注射1鸡RBC悬液 0.51ml 轻揉小鼠腹部 30min 颈椎 脱臼 处死 腹腔注入生理盐水 0.51ml 取材、滴片 盖片、镜检 四、注意事项 1、小白鼠腹腔注射要点; 2、颈椎脱臼法要点; 3、滴片时细胞悬液不宜过多; 4、剖开腹腔时尽量避免剪破血管; 5、两个实验不能交叉做。 示范:小白鼠的抓取 颈椎脱臼处死 腹腔注射 分组:两人一组(一只小白 鼠、一套器械) 操作:学生操作 1、绘制不同阶段巨噬细胞吞噬鸡红细 胞图(示吸附、正在吞噬、完全吞 入三个阶段) 2、兔红细胞膜对不同溶质的通透性的 结果分析 五、作业 小结: 掌握的内容: 膜的通透性 掌握的技能: 1. 腹腔注射 2. 颈椎脱臼处死法 3. 正确的显微镜检方法 4. 生物学绘图方法 z1C4G7JaMePhSkWnZr$u*x+A2D5H8KcNfQiUlXo#s%v)y0B3F6I9LdOgSjVmYq!t&w-z1D4G7JbMePhTkWnZr$u(x+A2E5H8KcNfRiUlXp#s%v)y0C3F6IaLdOgSjVnYq!t*w-z1D4G8JbMeQhTkWoZr%u(x+B2E5H9KcOfRiUmXp#s&v)y0C3F7IaLdPgSjVnYq$t*w-A1D4G8JbNeQhTlWoZr%u(y+B2E6H9KcOfRjUmXp!s&v)z0C4F7IaMdPgSkVnZq$t*x-A1D5G8KbNeQiTlWo#r%u(y+B3E6H9LcOfRjUmYp!s&w)z0C4F7JaMdPhSkVnZq$u*x- A2D5G8KbNfQiTlXo#r%v(y0B3E6I9LcOgRjVmYp!t&w)z1C4F7JaMePhSkWnZq$u*x+A2D5H8KbNfQiUlXo#s%v(y0B3F6I9LdOgRjVmYq!t&w-z1C4G7JbMePhTkWnZr$u(x+A2E5H8KcNfRiUlXp#s%v)y0B3F6IaLdOgSjVmYq!t*w-z1D4G7JbMeQhTkWoZr$u(x+B2E5H9KcNfRiUmXp#s&v)y0C3F7IaLdPgSjVnYq$t*w-A1D4G8JbMeQhTlWoZr%u(x+B2E6H9KcOfRiUmXp!s&v)z0C3F7IaMdPgSkVnYq$t*x-A1D5G8JbNeQiTlWo#r%u(y+B3E6H9LcOfRjUmXp!s&w)z0C4F7IaMdPhSkVnZq$t*x- 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