HPLC-ELSD法对麦片中蔗糖含量的测定.doc

hplc-elsd法对麦片中蔗糖含量的测定关键词：elsd，蔗糖 gb 5413.5-2010 elsd 蔗糖 食品 摘要：本报告参照了食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中乳糖、蔗糖的测定建立了hplc-elsd法对麦片中蔗糖含量的测定。蔗糖标准品在15mg/ml范围内线性关系良好，相关线性系数r为0.9960.997。同时应用hplc-elsd法对麦片中蔗糖的含量进行检测，检测快速，结果准确可靠。实验部分：1. 仪器仪器：labtech p600-elsd 高效液相色谱仪色谱柱：labtech 氨基柱( 4.6mm*250mm，5m)天平：感量为0.1mg超声波振荡器。2. 药品及试剂：蔗糖标准品：50mg，国家标准物质中心乙腈：色谱纯3. 实验内容3.1. 标准溶液制备蔗糖标准储备液：称取蔗糖标准品500mg并用水稀释至100ml容量瓶中，浓度为5.00mg/ml。蔗糖标准工作液：分别准确吸取不同体积蔗糖标准储备液，将其稀释为蔗糖含量分别为1mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml的混合标准使用液。3.2. 试样处理称取固态试样1g（精确到0.1mg）于50ml容量瓶中，加15ml 50-60水溶解，于超声波振荡器中振荡10min，用乙腈定容，通过0.45um滤膜过滤，滤液供色谱分析。可根据具体试样进行稀释。3.3. 色谱条件： 流动相： 乙腈：水=70:30 流速： 1.0 ml/min色谱柱： labtech 氨基柱， 4.6mm*250mm，5m进样量： 20l 柱温： 30 蒸发光散射检测器条件：漂移管温度：80 雾化管温度：203.4. 测定 取蔗糖标准工作液和试样各20l注入hplc-elsd进行分离测定，以其标准工作液的保留时间（取对数）和峰面积（取对数）为据制定标准曲线，以试样峰面积代入标准曲线中测定试样中蔗糖含量。4. 实验结果4.1. 蔗糖标准品的分离分析根据实验条件3.3分离分析蔗糖标准品蔗糖标准溶液（1mg/ml，2 mg/ml，3 mg/ml，4 mg/ml，5 mg/ml）色谱图。序号名称保留时间（min）浓度(mg/ml)峰面积1mg/ml蔗糖3.037114242502mg/ml蔗糖3.043221126993mg/ml蔗糖3.019325038034mg/ml蔗糖3.027427911285mg/ml蔗糖3.036532667194.2. 标准曲线的绘制将浓度分别为1mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml的蔗糖标准工作液，按3.3的色谱条件，各吸取20l进样分析，根据各组分的响应峰面积与相应的质量浓度进行线性回归，绘制标准曲线，相关线性系数均达到0.996以上。曲线线性关系和相关系数如下所示蔗糖标准曲线线性关系和相关系数 4.3 样品分析结果4.3.1将实验3.2处理好的麦片样品根据条件3.3进行分析,样品检测平行三次1#、2#、3#，分别重复进样三次，样品中蔗糖检测浓度及样品中含量的计算值见下表。麦片中蔗糖含量样品浓度计算1#浓度(mg/ml)2#浓度(mg/ml)3#浓度(mg/ml)平均浓度(mg/ml)样品含量（mg/g）蔗糖1.7731.8241.7961.79889.9麦片试样1#,2#,3#中蔗糖分离分析色谱图： 麦片试样分析色谱图1 麦片试样分析色谱图2 麦片试样分析色谱图3实验结论：本实验采用hplc-elsd法将麦片中的蔗糖完全分离检测。在15mg/ml范