DB32∕T 2403-2013 火焰南天竹组织培养繁殖技术规程

ICS 65.020.20 B61 备案号：41062-2014 DB32 江苏省地方标准 DB 32/T 24032013 火焰南天竹组织培养繁殖技术规程 The Technical Regulation of Tissue Culture Plantlet Production for Nandina domesticaFire power 2013 12 30 发布 014 01 30 实施 江苏省质量技术监督局 发 布 DB 32/T 24032013 I 前 言 为了规范火焰南天竹组培苗的生产技术，促进火焰南天竹组培苗的生产持续健康发展特制定本标 准。 本标准编写格式按 GB/T 1.1-2009标准化工作导则：标准的结构和编写的规定编写。 本标准由江苏农林职业技术学院提出。 本标准由江苏农林职业技术学院起草。 本标准主要起草人：史清云、朱艳、史云光、鲍荣静、张荣良、蔡宏宇。 DB 32/T 24032013 1 火焰南天竹组织培养繁殖技术规程 1 范围 本标准规定了火焰南天竹组织培养繁育技术规程的培养基配制、培养材料及消毒、初代培养、组 培苗增殖与继代培养、组培苗生根、组培苗炼苗移栽、移栽苗管理。 本技术规程适用于火焰南天竹组培苗生产。 2 培养基配制 2.1 培养基选择 根据火焰南天竹生长发育特性选择 MS 基本培养基和激素配比。 2.2 母液的配制和保存 2.2.1 母液的配制 母液配制成几种化合物的混合母液。大量元素母液配制 50 倍，微量元素母液配制 100 倍，植物生 长物质配制浓度 0.5mg/ml1.0mg/ml。 2.2.2 母液的保存 母液配制好后存放于 4的冰箱中。 2.3 消毒灭菌 采用高压蒸汽灭菌器进行灭菌。 已灭菌的培养基瓶不得与未灭菌的培养基瓶混放， 合格的灭菌培养 瓶应注明灭菌日期，合格标志。 3 培养材料及消毒 3.1 培养材料的选择 选取生长健壮、无病虫害、能保证原品种优良性状的火焰南天竹的茎尖部位作为培植材料。 3.2 外植体的消毒 70%酒精浸泡数秒钟，无菌水冲洗 2 次3 次，再用 0.5%2%的次氯酸钠浸泡 10min15min，用无 菌水冲洗 3 次后接种。 4 初代培养 4.1 初代（诱导）培养基 MS + TDZ 0.1mg + BA 1.0mg + IBA 0.02mg。 4.2 外植体的接种 培养材料经过消毒后，在无菌滤纸上切割成所需大小，然后进行接种。 DB 32/T 24032013 2 5 组培苗增殖与继代培养 5.1 增殖培养 每升基本培养基 + ZT 0.5mg + BA 1.0mg + IBA 0.05mg+ Charcoal 1000mg。 5.2 继代培养 每升基本培养基 + ZT 0.2mg + BA 0.5mg + IBA 0.1mg+ Charcoal 1000mg；继代培养周期一般 30d 继代 1 次。 6 组培苗生根 6.1 生根材料的选择 在继代培养的组培苗中剪取或切取生长健壮、叶色正常、叶片舒展、适于生根的无根苗，接种在生 根培养基上进行生根培养。 6.2 诱导生根 生根处理产生根原基培养：每升基本培养基 + NAA 0.2mg + IBA 0.4mg+ Charcoal 2000mg。 7 组培苗炼苗移栽 7.1 组培苗炼苗 组培苗在移栽前将培养瓶放置温室自然散射光下，温度控制在 253，闭口炼苗 7d 左右，去 掉瓶盖再炼苗 3d5d，然后再移栽。 7.2 组培苗移栽 用镊子将生根苗从培养瓶中取出， 洗去基部培养基， 在 800 倍多菌灵溶液中浸泡 30min 后移栽到基 质中。基质采用蛭石、草炭、珍珠岩或混合基质等。控制温度 252，相对湿度前期 80%90%，以 后逐渐降低湿度。当试管苗根系发达，形成侧须根以后，可以移栽到营养钵中，成为容器苗。 8 移栽苗管理 8.1 肥、水管理 组培苗移栽 7d 后开始喷施专用营养液，也可以喷施 NPK 比例为 112 的复合肥营养液，浓度一 般不高于 0.5， 施肥浓度可随着苗龄的增加适当加大； 基质不宜太湿， 以攥在手中指间不滴水为原则， 喷水与施肥相结合。 8.2 病虫害