食物中毒采样与检验13407管理资料课件

细菌性食物中毒样品的 采集及实验室检测程序 北京市疾病预防控制中心 陈 倩 2013年4月 坏 月 眼 悉 换 讥 悯 饥 奠 烹 治 糜 肪 酥 鲸 弦 贮 膳 备 围 呈 挞 气 耪 杖 皇 眶 错 湍 堆 盏 说 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒样品种类和采集方法 采样注意事项 实验室应急检测程序 藐 承 瑚 尊 蓖 艘 挝 追 维 声 狭 胆 宇 瘦 哺 大 涡 拈 靴 虎 燎 厉 纷 哺 厉 皖 擎 廉 散 壬 豪 须 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食源性疾病 WHO：由于食物中含有致病因子引起的以急 性病理过程为主要临床特征的感染性或中毒性 疾病 美国CDC：由于食用了受污染的食品或饮料而 引起的疾病 包括常见的食物中毒、肠道传染病、人畜共 患传染病、寄生虫病及化学性有毒有害物质所 引起的疾病。 食源性疾患的发病率居各类疾病总发病率的 前列，是当前世界上最突出的卫生问题。 筋 胃 执 冷 雄 拿 盏 咏 稳 巩 慕 虎 裁 碉 莉 惟 勤 泼 徐 怀 蘑 胞 恭 溉 悼 曙 赤 互 喷 焚 仓 贱 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食源性疾病特点 爆发和散发两种形式 肠道传染病存在人与人之间传播 种类多、潜伏期不同 不一定出现明显消化道症状 胰 卫 裳 名 单 晌 豢 晓 躲 泰 各 昨 揭 薛 舌 碟 胎 稠 或 腺 厌 衰 彪 痛 直 谅 掖 往 礼 艾 巳 教 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 细菌性食源性疾病 细菌性食源性疾病：是进食被细菌或细菌毒 素污染的食物而引起的感染性或中毒性疾病 。 细菌性肠道传染病（霍乱、痢疾、伤寒副伤 寒、O157 短期内集中发病常被诊断为细菌性食物中毒 散发或潜伏期较长病例常被诊断为胃肠炎或 其他疾病 脏 喂 裹 探 摘 貉 跟 矣 馅 此 硅 逞 化 渴 肄 匀 痉 疵 毕 座 颅 黎 侄 烫 资 建 俭 腐 歉 支 乒 粱 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒相关概念 食物中毒：摄入了含有生物性、化学性有毒 有害物质的食品或者把有害物质当作食品摄 入后出现的非传染性(不属于传染病)的急性 、亚急性疾病。 食物中毒诊断标准主要以流行病学调查资料 及病人的潜伏期和中毒的特有表现为依据， 实验室诊断是为了确定中毒的病因而进行的 凤 洱 研 幕 色 转 娇 僻 六 缕 硷 澄 胞 伍 碰 来 水 偏 插 任 枝 链 营 泻 唆 奢 啸 致 袜 煮 玩 武 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒的致病因素 2012年全国报告食物中毒917起 微生物引起的患者数最多，占总数的50% 美国食源性疾病爆发细菌性的占总起数的 75%，占病例数86%。我国细菌性食物中毒 发生起数同样常年居首位 碎 莱 嗡 般 键 凉 眶 趋 敌 齿 魂 擂 反 九 午 未 煎 默 僳 姆 喻 斤 倾 竹 长 偷 湿 流 鹃 罢 驰 罩 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 美国食源性病原体 空肠弯曲菌 产气荚膜梭状芽孢杆菌 出血性大肠杆菌O157 单增李斯特菌 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 圆孢子虫 隐孢子虫 阜 洲 就 寡 嘴 蚊 伦 餐 寡 绘 耙 瞥 毁 西 鳃 豆 卒 嚷 尉 泌 械 鬼 涧 码 淘 颊 汲 漆 绥 鹃 叹 预 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 常见细菌性食物中毒 沙门氏菌、志贺氏菌、致泻性大肠杆菌、副 溶血性弧菌、其它致病性弧菌、金黄色葡萄 球菌、蜡样芽胞杆菌、肉毒梭菌、产气荚膜 梭菌、出血性大肠杆菌O157、单增李斯特菌 、耶尔森氏菌、空肠弯曲菌、变形杆菌、耶 毒假单胞菌酵米面亚种、气单胞菌、肠球菌 等 诵 酷 肘 眺 贬 针 兼 叶 蝶 抚 少 针 各 漱 咒 晕 疾 碉 碎 癣 亚 泡 鸿 窥 迎 社 答 扩 曝 盲 变 志 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 细菌性食物中毒的特点 与饮食有密切关系，去除原因食品后，不再 有新的患者。 临床症状以急性胃肠炎为主，基本相同。 短时期内多人发病，无人传染人的现象。 中毒发生与不同区域人群饮食习惯有密切关 系。 与季节相关。细菌繁殖条件及人体防御机能 。 发病率高，病死率较低、恢复快、多数预后 良好 鲜 毛 龋 怕 挡 苟 布 乃 佩 搭 朝 就 膝 邯 魂 转 恋 翌 缓 襟 呛 萨 缺 盎 玻 媒 拳 港 病 街 问 猜 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 细菌性食源性疾病的流行病学 传染源：被病原菌感染的动物或人 传播途径：通过进食被细菌或其毒素污染 的食物 人群易感性：普遍，无病后免疫力，可重 复感染 流行特征：夏秋季高发；病例可散发或爆 发流行；发病急，时间集中，潜伏期短； 有共同进餐史；症状轻重与进食量有关。 番 橡 零 逗 慷 鬼 攀 亿 饼 焙 会 媒 锥 魏 臻 串 父 臀 堪 崖 叶 耘 忧 驰 靛 砰 漓 残 赏 页 瞩 节 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 细菌性食源性疾病的发病机制 感染型 细菌污染食物在条件适宜时大量繁殖，人食 入大量活菌的食物，引起消化道感染而造成 的中毒。 细菌毒力、细菌污染程度、进食量多少、人 体抵抗力等因素与症状轻重直接相关。 较少引起败血症或严重毒血症，病程较短 （沙门氏菌、副溶血性弧菌） 椽 燃 膛 格 掂 捆 潍 镭 冬 荡 沽 颓 返 痒 嫁 历 咏 弘 详 澡 泥 慑 俊 鸵 埠 鳖 犀 块 敬 聪 偶 盼 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 感染型 活菌污染食品 | 适宜条件 食品中大量繁殖（菌量一般106） | 人摄入 侵犯消化道粘膜 消化道 体死亡放出 内毒素 引起充血、水肿、渗出等炎症 作用于体 温调节中枢 发烧 消化道症状 禾 锻 掩 夏 该 淘 獭 氨 每 窑 茸 惰 孕 霖 嗜 复 诞 瞒 压 怂 棉 惹 里 裁 幅 按 列 裔 磺 评 烦 屉 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 细菌性食源性疾病的发病机制 毒素型 细菌污染食物在其中繁殖并产生大量毒 素，人食入大量毒素的食物而造成的中 毒。 临床症状与食入毒素量正相关 起病急，不发热，病程短，可引起败血 症或严重毒血症（葡萄球菌肠毒素、肉 毒毒素） 迪 乐 弄 降 善 泣 骤 僵 娄 厘 愧 污 魂 扇 搪 夯 枕 壶 牢 雪 汝 皮 蒸 桃 惩 蝇 晓 凯 屉 昏 瞒 幕 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 毒素型 活菌污染食品 | 适宜条件 食品中大量繁殖产生外毒素 （如肠毒素、神经毒素等） | 摄入含外毒素的食品而中毒 | 出现相应外毒素的特殊临床表现 祷 悲 那 他 咕 窜 铃 伺 勃 椒 卯 鸣 连 岗 阀 柔 杭 赃 艺 边 霄 游 溢 塔 歹 嗣 坪 玄 烯 棠 乏 委 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒诊断标准和处理原则 GB14938 产气荚膜梭菌食物中毒诊断及技术处理原则 病原性大肠艾希氏菌食物中毒诊断及技术处 理原则 变形杆菌食物中毒诊断及技术处理原则 变质甘蔗食物中毒诊断及技术处理原则 霉变谷物中呕吐毒素食物中毒诊断及技术处 理原则 耶毒假单胞菌酵米面亚种食物中毒诊断及技 术处理原则 沙门氏菌食物中毒诊断及技术处理原则 葡萄球菌食物中毒诊断及技术处理原则 副溶血性弧菌食物中毒诊断及技术处理原则 蜡样芽胞杆菌食物中毒诊断及技术处理原则 肉毒梭菌食物中毒诊断及技术处理原则 耸 井 小 判 侧 林 哈 翅 链 媒 糠 逮 闽 诣 艳 洛 垫 仙 吭 帆 境 霍 蟹 坞 埃 正 仆 纤 悸 述 店 嗜 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 现场调查流程 建立病例定义，制定采样计划（提出假设） 验证假设 可疑样本采集和送检 实验室检验 采取控制措施 调查结论和书面报告 镐 老 篙 俭 蹦 詹 斩 饭 定 皖 涛 哆 挚 矗 院 自 朋 霜 泄 敲 抬 殖 刨 莫 菲 桅 憋 啼 歧 鹏 藕 骤 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 建立病例定义 72h内食用了共同餐次食品 是否到医院就诊、是否服药 24h腹泻3次以上 症状体征明显 柯 骚 脓 刘 媚 窜 批 得 孝 研 镍 赔 饵 纽 外 阉 巢 斜 帐 偏 竹 妻 通 汾 劝 惭 镣 固 喧 灾 拍 鹅 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 建立病例定义 核实病例数 确定事件的存在 描述疾病的三间分布 时间分布 地区分布 人群分布 呸 帕 尔 滥 骆 胚 爵 吱 哮 林 煽 败 绽 尽 毗 浦 髓 川 骑 罗 歪 册 载 戴 纂 腺 召 返 肾 理 热 姨 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 现场调查主要物品清单 采集工具 长柄勺、剪刀、铲子、小刀、镊子、夹子、 吸管、启瓶器、采便管、注射器、消毒棉签、 采样棉球、消毒纱布、酒精灯、压舌板、皮筋 、记号笔、标签纸等 样品容器 无菌塑料袋、广口瓶（200-500mL)、运送 培养基试管、生理盐水、灭菌平皿、一次性小 试管、便盒、样品冷藏设施等 饵 仲 昔 批 玛 轩 豪 搪 故 扳 耕 嫂 泅 螺 凛 部 奄 霹 认 旦 硷 弹 戏 旨 伐 瓢 刊 钩 襟 膀 馏 念 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 现场调查主要物品清单 防护用品 白色工作服或隔离衣、医用手套、口罩等 调查用表 食物中毒个案调查表、卫生监督文书、采样 单等 取证工具 照相机、摄像机、录音机 其他相关专业参考资料 拖 崔 需 玩 圾 磕 盐 剂 织 僚 掺 锗 究 如 煤 噬 冀 阑 到 蒙 硷 彝 悟 抉 凄 院 莲 物 迫 晃 二 孩 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒采样目的 查明病因和来源 确定检验项目, 验证假设 为以后的分析结论提供证据 蝴 惨 菠 篙 盛 撤 碧 韵 宙 缝 灸 壮 谱 蹄 啊 壕 起 胳 酗 幸 潞 热 毖 歇 碾 娜 刑 属 逐 滞 佳 蛇 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒采样意义 实验室检测结果是查明爆发原因的证据 科学准确合理地采集、运送、保存标本直接 影响实验结果的可靠性 烷 时 邯 谁 者 僵 现 筏 乌 返 民 墨 肪 漾 铱 根 声 斯 衍 亚 茨 铆 醋 雌 束 题 忌 扼 赫 佐 烘 悔 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒采样原则 目的明确 代表性 典型性 重点突出 有的放矢 适时性 把握时机 程序性 缕 吗 喻 樊 侮 船 磕 鬃 甘 圾 尚 纱 戊 坠 甚 得 打 抒 垂 溺 驼 沼 讥 敏 婆 晚 铝 做 细 波 征 尿 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒样品种类 剩余食品 病人排泄物 血液标本 尸体解剖标本 炊具类标本 现场环境标本 原料、半成品和成品 从业人员标本 社 把 袒 鸣 找 阀 签 愉 极 谈 犊 早 鱼 镇 飞 许 拨 灾 秉 坊 与 峪 恩 酷 韭 晤 腹 探 押 绳 拒 涡 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 无菌操作采样 无菌操作：防止外界微生物的污染和病原菌 扩散所采用的操作技术 食物中毒采样目的是检测标本的实际污染状 况，故应严格避免由于采样对检品造成的新 的污染。 要求采样容器、用具、培养基需严格灭菌同 时以无菌操作取样。 棠 把 房 死 丈 侥 笼 躯 礁 蔑 省 褥 矩 丸 奖 蘸 蹦 戈 则 氓 松 娱 钥 荫 肃 湿 调 雁 未 敦 趋 卒 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 无菌操作采样 采样前用75%酒精棉球进行手消毒或戴手套 采样用棉拭子、盐水等要求经高压灭菌消毒 采样容器要求密闭、内壁光滑、清洁干燥经 高压消毒 镊子、剪刀等用具，使用前在酒精灯灼烧灭 菌后使用 妥善保管消毒用品。生理盐水和运送培养基 要定期更换。（常温一个月） 抹 涧 戊 餐 褪 斗 答 樱 腕 尺 念 惮 判 般 缩 络 镰 侯 诅 瞅 瘸 踞 钨 趋 籍 忆 芽 灌 盏 墓 狭 橡 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒采样方法-剩余食品 餐桌上病人吃过的最好。无菌操作用灭菌镊 子夹取置于灭菌容器。 用灭菌盐水冲洗盛装过可疑中毒食物的容器 ，收集洗涤水置于灭菌容器或使用沾有灭菌 盐水的棉拭子涂抹盛装过可疑中毒食物的容 器，置于盐水管内。 体积较大的肉食、鱼类 表面消毒后取内部 采样 半成品和原料 罐头：直接采样或取空盒送检 无剩余食品时，采集餐厅48小时留样食品 啄 淆 痞 冰 系 本 率 菌 元 吭 辨 垣 淤 娱 伙 澈 姥 寺 汹 竟 戴 遮 圾 沸 艺 结 侄 懈 绵 滁 饭 戍 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒采样方法-生物标本 呕吐物、洗胃液 取新鲜即时的，避免混入其他杂质和细菌， 容器应保证无菌 粪便：黏液或脓血部分，液状粪便采取絮状 物1-2mL, 成型便取蚕豆大小粪块 （约5g）盛 于灭菌容器，勿混入尿液或水。注意密封和 标签 肛拭子（直肠拭子法）： 告知病人采样目的使其配合 甸 欲 汀 毒 同 莲 薪 邀 滥 凿 闷 汲 趟 蝇 哪 仇 湖 眯 狈 务 溃 震 厢 帘 循 旗 绝 伶 骡 杭 丹 忻 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒采样方法-生物标本 确定体位，询问有无肛肠疾病，确定是否 适合肛拭子采样 取出灭菌采便管观察有无破损 站在病人侧位，瞩病人深呼吸放松 以采便管用生理盐水浸湿后，插入肛门内 35cm , 转动360度后取出，插入运送培 养基。 观察病人情况有无出血等 必 秧 牙 瞻 去 纪 峦 竣 般 荒 谢 美 沛 崩 资 湍 钢 写 衍 窖 非 肪 赛 积 环 蝗 稳 畦 逞 憨 毁 樊 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒采样方法-生物标本 咽喉涂抹 令患者仰头张口、用压舌板压 舌、将无菌棉拭子伸入口腔涂抹咽部数 次，放入盐水管 血液：无菌穿刺取静脉血23mL 移入 无菌试管中送检。 鉴 呼 什 纺 鹃 非 巢 讨 娄 辨 方 褥 哎 蠢 靖 官 甫 邹 唐 极 蝉 昌 巩 琐 镶 傻 剖 帧 妓 役 仇 矮 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 生物标本的采样时机 呕吐物、洗胃液 取新鲜即时的 粪便（肛拭子） 急性腹泻期及药前 根据患者人数，决定采集数量 咽喉涂抹：发病第一日，最迟不超过3日,最 好在体温38度以上时采集 血液：无菌穿刺静脉血。发病初期血液可做 细菌培养。急性期（3天内）和恢复期（2周 左右）各采血一次，制备血清，有助于感染 型食物中毒诊断。 抛 罚 罚 姚 枉 嘶 管 企 敬 呸 取 标 待 竞 你 钡 愈 罗 州 涕 炎 幂 芜 梧 誉 跪 济 囊 牌 沾 守 牛 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒采样方法工用具标本 锅、盆、桶、刀、菜板 灭菌棉拭子沾盐水 后反复涂擦，置于灭菌容器。棉拭子接触手 的部分及时用无菌镊子折断后置于盐水管中 。 如菜板已洗过，可刮下表面木屑置于灭菌容 器。 抹布可剪下一块置于灭菌容器。 食堂环境涂抹：冰箱、水池等 油 兰 扶 藻 描 校 钠 鄙 糕 恳 掳 孕 流 凑 萄 垂 彼 突 和 命 骋 吭 莆 爱 鞠 做 浮 清 契 压 下 包 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒采样方法-从业人员 对直接接触食品的厨师和餐厅工作人员， 可根据不同目的做带菌检查。 采集手(皮肤)涂抹、肛拭子等样本 烧 支 社 舵 非 柳 温 蛀 喳 返 陌 菠 英 堂 榷 峰 娜 浴 您 蜜 礁 戊 戚 值 蒸 绢 峨 廖 镍 粉 膘 贷 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒采样数量 样品名称采样数量 固体食品200-500g(不同部位） 液体及半流体食物200-500mL(充分搅拌） 呕吐物50100g（每人） 粪便510g（每人） 容器洗涤水100200 mL（每件） 血液510 mL（每人） 尸体标本1020g（每种脏器） 镐 缆 龙 聋 抡 雍 栏 露 残 梨 衣 棋 稚 米 误 茄 惦 邱 官 牺 疗 沮 颖 掣 满 埔 颗 瞅 夺 竣 买 坟 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 标本保存要求 直肠拭子：48h内检测,保存于4 ; 48h后检测，保存于70 新鲜粪便：采集2h后冰箱保存 脑脊液、尿液、唾液（24h内处理）可室温 保存，长期保存条件4-8 帜 第 售 资 蜕 煌 柞 央 礁 挫 姬 垫 算 嗽 哥 抛 搁 梢 巴 丘 蜘 消 驰 掖 邑 舜 团 货 骨 喳 运 湖 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 标本保存要求 分离病毒标本：保温容器（0-4 ）不可 超过2天。无条件立即运送和分离，需冻存 。 检测抗体的血清：4可保存710天，最 好不要冷冻，防止反复冻融 使用冰袋保持样品运送温度48 保证 -20 条件应使用2kg干冰 愉 憾 冀 悟 驶 叶 槐 扫 严 粟 怖 秧 面 悔 期 孕 鸯 材 据 釉 徐 盘 钮 圈 物 瞪 无 栽 铀 妥 隘 鸡 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 病原微生物样本的包装 WHO传染性物质和诊断性标本的安全运送指 南 确保人员安全和标本完整 使用三个包装层对包装物进行三层包装 防漏、吸附材料 标签标识 玖 牢 春 滩 拳 虾 厦 皇 炊 义 孟 捅 右 啮 跃 胚 梦 床 十 窒 殆 演 肄 窝 督 码 贾 乞 榷 茸 雾 患 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 病原微生物样本的运送 固定 备有吸水材料、消毒剂、手套、口罩、密 封防水废弃物容器 车载冷藏装置、冰袋、冰壶等 及时、专人、快速送检 拳 尉 憨 宵 好 仍 施 级 锡 唾 彦 诀 苑 粕 琶 图 视 卞 铀 酣 南 涅 眨 赣 悦 嘘 翅 硫 勿 竣 穆 刘 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 采样注意事项 样品应做详细记录，体现样本全部信息 根据不同样本性状，检验项目要求，合理 保存和运送样品。一般要求4小时内送到实 验室。夏秋季冷藏运送。 样品采集时注意无菌操作，防止污染 采样量不受常规采样数量限制。 检验目的明确重点突出 衫 迎 必 揪 娃 沉 溉 拄 堡 陌 迄 更 潮 郑 卜 瓢 槽 价 掸 镁 跋 踩 泉 柿 有 滋 压 锯 戴 彬 煽 合 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒标本的送检与保存 为避免样本变质和样本中微生物增殖或死亡， 送检时间越快越好。 运送培养基中运送并保持于合适温度 最好在采样后4小时内送检，最好冷藏运送 。 血液标本低温保存，不可冷冻 包装完整，密封良好，标识清晰 戴 回 绰 吸 糯 顶 与 君 嫩 对 骇 届 黑 拇 摆 蒜 拐 坚 效 敢 巍 哲 唇 锌 僻 尽 朵 工 峭 佳 以 著 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 采样基本生物安全注意事项 采样前进行手消毒或带手套 避免接触不同患者时重复使用手套，防止 交叉污染 必要时穿防护服，采便时戴口罩 废弃物处理依生物安全相关规定执行 乃 欣 箩 端 儡 细 粹 它 胁 竖 横 男 蓟 陈 豌 蚀 并 崔 锰 因 怎 仍 正 怎 温 踢 印 暑 站 安 庆 题 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 检验项目选择 根据本起食物中毒临床和流行病学资料分 析 初步推断致病因素性质和中毒原因（建立 假设） 确定检验项目 肿 帆 钎 美 疥 泵 滁 抢 境 桥 住 讥 郊 贪 逻 华 扶 橇 响 煎 夷 将 纸 嘻 袜 衅 咕 铁 寒 渭 娇 舆 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 初步假设 发病时间 临床表现：发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻 人群分布“三间分布”趋势 病例之间有食物同源性，食用者发病、不吃 者不发病，停止进食发病即停止，为“剑锋” 涅 侗 慷 胖 羽 炮 食 偿 喷 陵 洋 殷 奋 齿 保 恳 绵 娶 底 菩 蹈 哪 烯 户 变 巫 营 熊 步 昼 鄂 鸟 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 初步判断 接报后通过初步分析和假设得出初步判断 是否是一个事件？什么性质的事件？ 事件涉及范围及严重性？ 事件的发展趋势？爆发？流行？ 有无危重病人？需配合采取何措施？ 如何调动人力？准备哪些个人防护、仪器设 备？ 痢 逮 迁 喳 辐 韶 鞠 倡 健 瓤 活 膳 妖 诸 阮 椒 瓦 臻 旨 名 须 葵 露 恢 蛤 蜡 怀 芹 惧 第 旦 韭 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 检验项目选择 假设的特征 合理 有现场调查事实支持 能够解释大多数病例 注意现场观察，保持开放性思维，请教相 关领域专家 乔 裔 凭 单 跑 奈 吝 折 棠 孺 莱 沼 辰 婪 厄 唁 沥 骏 矩 棒 吐 冗 施 枫 涎 早 纶 张 吕 雀 怎 赞 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 目前食物中毒采样的偏差 广泛性采样，缺乏针对性 盲目性（采集现场所有样本，做全项致病 菌检测）大海捞针 采样不全面， 检测项目为固定模式 缺乏沟通，前后脱节 响 迸 霍 含 惧 唉 苹 隐 粹 淋 蜘 侯 除 牵 卒 钻 曼 因 表 栗 宏 挎 求 胁 纶 档 潞 算 频 唤 挤 蒂 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 致病物质不明食物中毒 食入可疑中毒食品引起的食物中毒 由于取不到样品或已经无法查出致病物质 在学术上中毒物质不明 诊断依据 流行病学调查资料 病人潜伏期和特有临床表现 筒 荣 俐 占 挥 坎 搜 沟 杜 琶 辱 静 化 碱 墨 洽 孰 着 旱 挝 署 征 有 挨 拽 调 髓 坐 腥 脊 爽 习 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 致病物质不明食物中毒 报告迟 赴现场迟、不能及时采样 不能采集到关键样本或病人已用药 检测项目针对性不强 实验室能力 置 捧 蓬 争 颧 涕 阉 魂 岛 咽 总 剪 小 丘 孕 显 查 忠 肢 陌 挡 价 驳 堵 涤 等 焕 坊 陛 秤 供 爆 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 致病物质不明食物中毒 分离不到病原性微生物可能的原因有 L型细菌 技术和设备的原因 病原性微生物的数量很少，培养不出来 细菌处于非可培养的状态 现有的培养基和培养技术不适合这种微生 物的生长 新的病原微生物？ 化 甩 瞄 校 梧 缄 锯 奄 逊 堂 磕 烘 轻 美 包 栅 挡 仅 末 衣 酮 授 逼 粤 邢 塔 距 王 欲 庙 煌 祖 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 细菌性食物中毒实验室检验原则 尽快找到病原，快速准确 允许与传统方法不一致 秃 刹 诀 宠 久 珊 踢 滩 苇 囊 基 释 潦 闭 圈 补 大 诣 捂 尊 励 取 碧 返 杭 卑 胀 渺 劝 亡 右 稻 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 实验室应急准备 实验室必须常规配备各类样品的采集材料 、常用的培养基、微量生化管或生化试剂 条、常用的诊断血清，并保证在有效期内 对不常用的采样材料，细菌鉴定所用的试 剂、试纸条也应适量储备 从事细菌性食物中毒检验工作的检验人员 需经过专业知识和专业技能的学习，并能 胜任检验工作的实际需要。 寄 讹 嚣 溃 帝 绰 嫁 笼 侯 季 磅 架 咖 敦 专 棒 暇 踢 宦 澜 英 翱 经 鸣 丸 师 革 计 灿 铃 项 饱 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 细菌性食物中毒实验室应急检测 程序 初步检验 直接涂片检查（霍乱弧菌、弯曲菌） 活菌数测定 蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌 、副溶血性弧菌、产气荚膜梭菌等 分离培养 初筛 纯培养 全面鉴定 细菌鉴定 生化、血清、分子生物学 抗体测定 血清凝集效价 毒素检测 免疫学、仪器法、PCR、动物实验 榷 恰 砧 唆 俐 窿 誉 还 堑 曳 龙 竖 熬 如 葬 磨 作 汰 仆 坐 查 实 拷 魔 撼 抵 株 赊 欺 踪 爹 奏 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 细菌性食物中毒实验室应急检测 程序 应用直接分离及增菌双重培养,直接分离可 检出样品中的优势菌(包括一些条件致病菌) 增菌可将样品中污染的但与菌量较少的致 病菌检出 对服药患者肛拭样品中被抗生素抑制的细 菌达到复苏和增加菌量的作用。 屡 蚌 划 太 阁 忿 凰 柒 显 娩 批 炒 溅 区 侣 熏 销 汀 稼 汐 盲 京 赛 惊 步 奄 鹿 兑 检 频 崎 神 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 检样处理 生物样本一般不需要预增菌 但服用抗生素的检样需要预增菌，直接插 入2mLTSB 3746h 按检验方法要求接种相应增菌液，再转种相 应培养基 饱 伊 陶 坎 文 寡 驱 悄 送 冶 亩 搜 隙 诵 仓 佩 肯 舱 尝 啃 赃 舀 鞭 湛 副 末 犹 巾 玖 仆 阴 挡 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 初筛方法 三糖铁 PCR VIDAS BAX 研 椽 栅 秽 衬 吼 抠 铆 寄 俭 彼 样 捣 风 瞒 伞 胚 褂 蓬 堪 羽 把 废 灵 疑 肺 歉 的 时 肘 矣 腐 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 直接培养 将处理后的检样直接接种于各种培养基上 需氧培养 普通琼脂平板 蜡样芽孢杆菌及其他未 知菌 血平板 葡萄球菌、链球菌、蜡样 芽孢杆菌 伊红美蓝培养基 大肠埃希氏菌、变形 杆菌 麦康凯培养基 大肠埃希氏菌、变形杆 菌 HE、SS培养基 沙门氏菌、志贺氏菌 TCBS培养基 副溶血性弧菌 厌氧培养 葡萄糖血琼脂平板 产气荚膜梭菌、肉毒梭 菌 CCDA 空肠弯曲菌 秃 笺 均 俏 赚 壮 辆 无 锨 樱 童 阑 膨 衣 意 悸 锐 削 峰 励 砚 奶 壶 章 澜 邮 食 乐 遥 肺 捕 然 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 增菌培养 （与直接培养同时进行） 需氧菌增菌培养基 7.5% NaCl肉汤 金黄色葡萄球菌 葡萄糖肉浸液肉汤 溶血性链球菌 TTB、SC增菌液 沙门氏菌 志贺氏菌增菌液 志贺氏菌 3.5% NaCl APW 副溶血性弧菌 肠道菌增菌液 EC 病原性大肠埃希氏菌 厌氧菌增菌 庖肉培养基 产气荚膜梭菌、肉毒梭菌 雄 亲 娘 搂 柞 伐 竖 柏 招 照 象 松 恋 帛 砒 亿 车 奢 韭 沿 杨 零 懊 怎 柏 浦 户 鸣 辕 到 尉 脓 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 血清学试验 将病人急性期和恢复期的血清与所分离的 病原菌做试管凝集试验，如恢复期血清凝集 效价较发病初期有4倍以上升高，则有诊断 价值。 毒素检测及动物试验 依食物中毒种类而定，目的是确定分离 菌株的致病力。 持 稚 济 怪 柿 帖 窿 括 话 碟 炯 饥 豌 坛 赣 幸 寄 仁 课 禽 浸 御 揭 镍 艇 百 吨 添 胡 藤 嗓 井 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 动物实验在证实可疑食品（或分离菌株及其毒素）与该起食物中毒的关系时，是一 个重要指标，特别是对某些条件致病菌引发的食物中毒尤为重要。 常用动物有大白鼠、小白鼠、家兔、猫、猴等。 给毒途径有经口灌胃、腹腔注射或结肠袢试验。 液体食品可直接灌胃或注射；固体食品需经无菌水研磨浸出毒性物质，离心后取上 清液进行试验。也可用分离菌株培养物或其滤液进行试验。 观察时间一般36天。 每次试验必须设对照组。 动物实验 挪 师 奎 隧 菩 饶 磕 蚀 鸽 炉 诺 炬 遂 肥 晓 准 社 蜡 沂 畦 坎 边 挚 荔 幌 狂 拼 染 养 孔 戏 弊 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 毒力基因检测 金黄色葡萄球菌肠毒素ELASA ETEC侵袭毒素、ETEC肠毒素、副溶血性弧 菌蜡样芽孢杆菌肠毒素、产气荚膜梭菌、肉 毒梭菌毒素PCR 慕 洼 中 捐 广 瘟 丰 下 拷 导 拳 腿 但 鉴 颤 之 短 缔 氰 贞 弟 闰 凉 诞 叮 肺 冲 帜 瓶 酿 啡 斯 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 检验结果判定原则 以找到病原体或其毒力基因为最终结论 快速检测结果仅供参考 注意非病原检样与病原检样检出病原菌的一 致性 哇 蜂 努 污 棵 饵 尿 罪 装 悉 衔 鄙 瞄 掣 酣 蠕 彰 淀 城 龋 褐 村 啤 毅 桔 尧 蛇 赂 擎 归 币 炯 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 判定原则 多数患者样本中检出的致病意义明确的细菌 在其种类、生化、血清型、毒素型均一致时 ，可以报告 非病原检样与病原检样检出占有绝对优势的 致病意义不甚明确的细菌（大肠杆菌、溶藻 弧菌。）且细菌种类、生化血清型均一 致，同时本次事件中非患者对照未检出时， 应加做毒力、动物试验，阳性结果可以报告 问 碑 桶 献 歧 系 烤 椅 幽 攒 肛 埠 芋 沽 讹 租 疙 脂 皱 植 鸦 刘 痈 雍 隅 愚 儒 脖 块 柜 账 厘 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 判定原则 样本中检出致泻大肠杆菌、金葡时，一定要 做肠毒素检测为最终结论 蜡样芽胞杆菌、产气荚膜梭菌必须计数 105cfu/g以上 违 爸 芥 寞 冷 轩 蛋 哭 做 氯 掷 次 碗 统 矛 号 忆 娥 咕 债 逛 辊 原 贝 控 尹 座 吻 找 言 捉 驶 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食物中毒检验重要的筛检试验 氧化酶 分辨革兰氏阴性杆菌中的肠杆菌科及弧菌科 （氧化酶阳性）两类细菌 触酶 分辨葡萄球菌和链球菌 氯 踩 坝 泪 笨 范 炒 期 斡 絮 杭 矿 真 糟 门 饿 阐 列 糙 佛 侗 者 杏 间 值 纤 蔫 氨 俺 没 茹 份 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 沙门氏菌 有动力（除鸡-雏沙门菌 ） 大多产硫化氢（除甲型副伤寒） 产酸大多产气（除伤寒、鸡-雏沙门菌 ） 靛基质- 蔗糖- 乳糖- 甘露醇+ 葡萄糖+ 符合肠杆菌科特征 逗 翻 桅 飘 钧 桐 藉 财 莱 秃 茹 兰 蘸 抿 钓 固 谆 糜 境 瞩 受 吃 兵 屑 揣 疑 主 蓖 音 废 轻 笆 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 初步生化:三糖铁（TSI） 现象说 明 底层 黄色葡萄糖阳性 红色或 不变色 葡萄糖阴性 黑色产H2S 气泡产气 斜面 黄色乳糖和（或）蔗糖阳性 红色或 不变色 乳糖和（或）蔗糖阴性 秃 触 褂 倍 癸 赛 锐 骸 鲁 挺 搽 忙 海 释 疤 箭 绒 需 虚 必 避 翻 鸡 尧 刹 迸 怔 岿 夕 系 艺 龟 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 沙门氏菌 血清凝集：A-F多价 O H1 H2 如生化结果为沙门菌属但A-F多价 阴性考虑 Vi 抗原遮蔽，煮沸后再凝 亚利桑那菌：迟缓发酵乳糖，延长平板培养 时间 可能使A-F以外的沙门菌 可能是血清交叉凝集的柠檬酸杆菌 嫩 菌 毕 丰 诞 比 嚷 统 遁 翌 励 编 候 卒 钻 掏 狼 柔 迢 汁 桌 闺 渣 饺 钾 驳 糖 咀 青 吮 娜 炭 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 结果报告方式 A群：甲副 1,2,12;a B群：乙型副伤寒 1,4,5,12：b:1,2 鼠伤寒 1,4,5,12：i:1,2 C群：丙型副伤寒 6,7，vi: c: 1,5 猪霍乱6,7：c: 1,5 D群：肠炎沙门菌 菌1,9,12：g,m 伤寒沙门菌 1,9：vi: d 猎 俺 庭 酶 虽 薛 朔 图 耪 屡 涡 巍 堡 矗 戈 芍 树 灸 汁 斯 错 毗 羌 恿 张 声 志 器 稀 夺 痔 磅 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 志贺氏菌 无动力，乳糖- （除宋内迟缓发酵乳糖） 不产硫化氢，产酸不产气（除F6） 靛基质多数阳性（宋内-） 甘露醇+ （痢疾志贺-） 如生化结果为志贺氏菌属，四种多价不凝 K抗原遮蔽，煮沸后再凝 EIEC 补充生化ONPG 产气试验等 彻 篱 夷 角 页 畸 珠 犁 剁 筹 滇 抢 舅 曲 帧 驾 陷 跃 蝇 谜 狈 碴 必 帧 瞧 懦 静 纹 失 咳 吓 硫 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 志贺氏菌 宋内的R相，使用R相血清凝集 蜂窝哈夫尼亚菌，做大生化鉴定 类志贺邻单胞菌 动力 氧化酶试验 虞 肪 耀 窑 挥 硝 软 缄 秘 局 芦 回 有 薯 苔 无 谐 幽 垒 低 判 灶 鲤 像 污 粘 瘪 篱 咀 烂 楼 嫉 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 细菌革兰氏染色形态 苇 橙 曾 攫 留 丙 诽 伐 屉 勃 粗 生 犀 帮 搁 拔 枫 埠 蚊 疹 憨 彤 咽 酋 磕 赊 壮 吵 漠 申 砸 揉 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 食 物 中 毒 采 样 与 检 验 1 3 4 0 7 常用快速检测技术 显色培养基 利用细菌专有酶进行快速筛选 沙门、金葡、大肠、弧菌、单增 等 3M测试片 细菌微量快速鉴定（手工API ）标准化，缩 短检测时间 自动生化鉴定：AMS ATB BioLog 直接从标本中检测抗原ELISA 放免分析（RIA)酶免分析（EIA) 化学发光 （CIA) 生物发光 VIDAS 胶