课件：兽医流行病学 刘文博 第十一章 血清流行病学.ppt

第十一章 血清流行病学,用血清学（免疫学）的方法进行流行病学调查分析，以阐明疾病在群体中的分布和原因，检验疾病防制措施的效果。,血清可测量物质及疾病相关指标： 矿物质、微量元素、酶和激素、特异抗体,第一节 概 述,二、用途 1、阐明疾病的分布规律 特异抗体可以提供畜群是否暴露于传染病病原体的证据。 以隐性感染为主的疾病，除了进行发病分布研究外，同时检测相应抗体或抗原进行分析研究。,2、寻找与病因相关的因素 追溯诊断：收集发病早期和康复期双份血清，抗体效价升高4倍以上。 在肝癌病人血清中HBsAg和抗HBe的检 出率明显高于对照组。 血脂、胆固醇与冠心病的关系。 高水平免疫球蛋白与慢性病的关系。,3、评价防制措施的效果 评价生物制品接种效果。 4、疾病监测和疫情预报 了解动物群体对某病易感和免疫水平的动态变化。群体中易感动物比例越大，流行强度越大。,三、方法 （一）调查方法 1、短期调查 确定是否存在疾病。 2、长期调查 监测抗体水平和疾病流行的动态变化。,（二）检测方法 凝集试验(HA)、血球凝集抑制试验(HI)、葡萄球菌A蛋白(SPA)协同凝集试验、间接血球凝集试验(IHA)、琼脂扩散沉淀试验(AGP)、补体结合试验(CF)、免疫荧光试验(IF)、酶联免疫吸附试验 (ELISA)、放射免疫试验(RIA),（三）分析方法 筛检（screening）试验： 快速简便、早期发现可能有病动物。 筛检出的可疑或阳性病畜均需进一步确诊。,第二节 血清抗体的测定 一、抗体量的表示法 滴度产生试验反应的血清最高稀释度 （阳性、阴性、阳转） 滴度的对数转换（适合于正态分布检验） 对数平均滴度 几何平均滴度,二、抗体测定 单系列稀释测定 每一稀释度测一次，抗体滴度是区间滴度 多系列稀释测定 每个稀释度测定几次，50%终点测定 抗体滴度：50%试验组成员产生特定后果的血清稀释度，用半数有效量(ED50)表示,血清抗体50%终点测定,Spearman- Krber法,log10ED50=L - d (p- 0.5) L=显示全部阳性结果的最高稀释度对数 d=稀释系数的对数 p=从显示全部阳性结果的最高稀释度开始的各稀释度试验阳性比例总和 L= - 0.6 d=log102=0.3 p=1.00+0.80+0.80+0.40+0.20 =3.20 ED50 =1/25.1 即0.1ml血清含有25.1个ED50，则1ml血清含有251个ED50。,标准误（e.s.e） e.s.e(log10ED50)= n为每一组中的试验重复数。 log10 e.s.e =0.3 =0.13 因此，滴度可以表示为每0.1ml含101.40.13ED50，或每毫升含102.40.13ED50。,三、畜群中血清抗体水平的估计和比较 1、检测抗体的存在 对畜群作抽样调查 2、抗体水平的比较 不同畜群的比较 根据抗体存在与否比较两个畜群，可用卡方检验 比较两群体中抗体的频率分布，可用参数检验 同一畜群不同估计值的比较,第三节 血清学试验的解释 一、精密性 不同的流行菌株、毒株存在抗原差异。 随着单克隆抗体的出现，检测病原体细微抗原差异的能力已大大提高，有助于感染起源和流行范围的确定。,二、准确性 阳性结果 真阳性 确定遭受该病病原体的感染 交叉反应，同一群病原体或相 关病原体之间的交叉反应 假阳性 双重感染，而其中只有一种是临 床发病的病原体 非特异性反应，非特异抑制剂、 非特异凝集素 技术误差,阴性结果 真阴性确定未遭受该病病原体的感染 标本采集时间不当 试验选用不当 假阴性 抗生素诱导的抗体产生受到抑制 不完全或封闭抗体存在 自然或诱发的免疫耐受 技术误差,三、敏感性和特异性 敏感性：实际感染而按诊断标准被判定为感染的百分率。 特异性：实际未感染而按诊断标准被判定为未感染的百分率。,敏感性和特异性的关系,特异性,假阳性,假阴性,敏感性,阴性动物分布 1-p,阳性动物分布 p,检测抗原和抗体的试验的相对敏感性,平行（并联）试验 当漏掉一个病例后果严重或再进行筛检比较困难时，要尽量减少漏诊率。,几个指标中有一个阳性即诊断为阳性。灵敏度提高，但特异度降低。,例如 流产奶牛布鲁氏菌病检查 阴道拭子细菌培养、血清的虎红平板试验和乳汁环状试验，任一试验阳性就认为感染。 在发生疫情要求迅速作出判定时，常常采用平行试验。,系列（串联）试验 当误诊会造成严重后果时，几个指标均为阳性才能诊断。 提高了特异度，可以减少误诊率，但却增加了漏诊率。,疾病根除计划 常采用系列试验从群体中淘汰阳性动物。 最初筛检试验是有病的动物，再经进一步试验加以证实，从而排除假阳性。,四、预测值 PT=真阳性+假阳性=P敏感性+（1-P）（1-特异性） 假定P=0.01，敏感性=0.99，特异性=0.99 则：PT =0.010.99+(1-0.01)(1-0.99)=0.02 实际患病率是0.01，而估计的患病率是0.02。,如果知道试验的敏感性和特异性，则可以通过下式得到真正患病率P的正确估计值： P=,阳性预测值试验阳性动物实际也是阳性的概率 阴性预测值试验阴性动物实际也是阴性的概率 阳性预测值=a/a+b= 阴性预测值=d/c+d=,阳性预测值低试验阳性，但难以作出有病诊断；阴性预测值低试验阴性，但难以排除无病 。 一种筛检方法应用于不同患病率的畜群，阳性（或阴性）结果所表示的意义不同。 判断筛检方法的诊断价值，需要参考畜群的患病率。,预测值的意义,不同患病率水平牛群阳性结果预测值 （布鲁氏菌病试管凝集试验敏感性62%，特异性99.5%）,敏感性和特异性的可接受水平依控制或消灭疾病规划所处的阶段而定。 消灭疾病规划接近结束时，如检测仅依赖于血清学试验，则需要更敏感和更特异的试验。 在实践中，系列（串联）检测、对感染农场实施隔离和无病区域的保持等其他方法也应同时使用。,五、可重复性 一般说抗体滴度几何性4倍变化反映有真正变化，而两倍变化不被认为是显著变化。 第四节、血清库,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考，实际情况实际分析,主要经营：课件设计，文档制作，网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！ 致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求,感