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观察DNA和RNA在细胞中的分布,2011-10-8,实验,2011-10-8,实验原理:,DNA主要分布在 内,RNA大部分存在于 中。 甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的 不同,甲基绿使 呈现绿色, 使 呈现红色。利用 染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。 盐酸,能改变 加速染色剂进入细胞,能使染色质中的 分离有利于 结合,细胞膜的通透性,DNA和蛋白质,DNA和染色剂,细胞核,细胞质,亲和力,DNA,吡罗红,RNA,甲基绿吡罗红混合,目的要求:,初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法,实验材料:,人的口腔上皮细胞; 洋葱鳞片叶内表皮细胞;,1、能否用哺乳动物成熟的红细胞? 2、能否用紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞?,方法步骤:,一、制片,目的:将细胞固定在载玻片上,注意事项:1、烘烤时要来回移动玻片,以免受热不均炸裂;2、烘烤后,等玻片冷却后再放入盛HCl的烧杯中,以免炸裂。,二、水解,1、在小烧杯中加入30ml质量分数为8%的HCl,将烘干的载玻片放入小烧杯中; 2、再将小烧杯放入盛有30温水大烧杯中保温5min。,三、冲洗,取出载玻片,用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10秒,注意事项:冲洗时一定要用缓流,防止细胞被冲走,目的:防止HCl与染色剂发生中和作用而影响观察效果,四、染色,1、将吡罗红甲基绿染色剂滴2滴于擦干的载玻片上,染色5min,2、吸去多余的染色剂,盖上盖玻片,(1)先用低倍镜观察,选择染色均匀、颜色浅的区域进行观察,(2)换用高倍镜观察,观察细胞核和细胞质的染色情况,五、观察,实验现象:绿色部分主要集中在细胞核内,红色部分主要集中在细胞质中。,实验结论:DNA主要分布在细胞核中, RNA大部分存在于细胞质中.,实验现象及结论,课 堂 巩 固,1、在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中,将口腔上皮细胞置入8的盐酸溶液中水解的主要目的是 A使细胞中的DNA水解成脱氧核苷酸 B使细胞中物质全部水解 C利用盐酸改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞 D使染色体中的DNA与蛋白质分离,有利于蛋白质与染色剂结合,2、观察DNA和RNA在细胞中的分布实验中,水解步骤需要的条件是 5的盐酸 8的盐酸 10的盐酸 20温水 30温水 40温水 保温5min 保温10min A B C D,3、利用甲基绿和吡罗红对细胞中的DNA、RNA染色时,试剂的正确使用方法是 A先加甲基绿,再加吡罗红 B先加吡罗红,再加甲基绿 C混合在一起同时使用 D将两种试剂分开单独使用,4、“观察DNA和RNA在细胞中的分布”的实验中,没有用的试剂( ) A.0.9NaCl B.8的HCl
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