嗜酸细胞性食管炎9例临床病理分析.doc

嗜酸细胞性食管炎9例临床病理分析 作者：孙苏安，采丽，刘海燕，田兆方，李巧群【摘要】 目的 探讨嗜酸细胞性食管炎的临床病理学特点。方法 采用免疫组化SP法染色结合甲苯胺蓝染色及硫染色显示肥大细胞内颗粒,观察9例嗜酸细胞性食管炎中肥大细胞及嗜酸性粒细胞的分布。结果 在黏膜各层及肉芽组织中,均见到未释放型和释放型2种肥大细胞。肥大细胞聚集区也是嗜酸性粒细胞相对集中区。结论 嗜酸细胞性食管炎的发生与变态反应有关，可能是肥大细胞释放的各种介质造成黏膜损伤、肉芽组织及溃疡形成,手术切除是较好的治疗方法。 【关键词】 嗜酸细胞性食管炎;肥大细胞;嗜酸性粒细胞;临床病理学Abstract: Objective To investigate the distribution of mast cells and clinicopathological features in patients with eosinophilic esophagitis. Methods 9 cases with eosinophilic esophagitis were analyzed for the distribution of mast cells and eosinophils. Immunohistochemistry with S-P method was used to study the expression of trypsin protein, and toluidine blue staining and sulfur staining were used to show granules within mast cells. Results Both the nonlytic release and the lytic release of mast cells were visible at all levels in the mucosa and granulation tissue, and mast cell accumulation zone was where the eosinophil relatively clusters. Conclusion The occurrence of eosinophilic esophagitis is related to allergy, and a variety of media released from mast cells result in mucosal injury and the formation of granulation tissue and ulceration. Surgical resection is a preferable treatment.Key words: eosinophilic esophagitis; mast cell; eosinophilic granulocyte; clinical pathology嗜酸细胞性食管炎是一种少见且原因不明的疾病,与嗜酸细胞性胃炎相类似,黏膜各层见嗜酸性粒细胞浸润。本病诊断困难,易误诊为食管癌。近年来随着胃镜活检的普遍开展,我们遇到的这种病例逐渐增多。有研究表明，肥大细胞在消化道其他部位嗜酸性炎症中起一定作用。关于肥大细胞在嗜酸细胞性食管炎中的分布及意义，目前尚鲜见报道。我们对9例嗜酸细胞性食管炎手术标本,用甲苯胺蓝染色显示肥大细胞、硫染色显示肥大细胞异染颗粒，结合免疫组化检查及病理特点来探讨嗜酸细胞性食管炎的发病原因及其与肥大细胞的关系。1 资料和方法1.1 资料来源及处理 收集我院19982008年资料完整的9例嗜酸细胞性食管炎患者的手术标本 (不包含寄生虫、真菌感染者)，经10%甲醛溶液固定，然后在病变处取材，每例标本取材48块，平均6块，石蜡包埋，连续切片。1.2 试剂和染色方法 所有切片均行苏木精-伊红染色。单克隆鼠抗人肥大细胞类胰酶抗体(AA1)、免疫组化SP染色试剂盒、DAB显色试剂盒均购自福州迈新生物技术有限公司。甲苯胺蓝和硫试剂购自上海化学试剂公司。免疫组化SP染色, 阴性对照采用 PBS缓冲液作一抗，其余步骤严格按 SP染色试剂盒说明书进行免疫组化染色，肥大细胞胞质为棕黄色或棕褐色1。同时对组织进行甲苯胺蓝染色、硫染色以显示肥大细胞及其异染颗粒。2 结 果2.1 大体观察 嗜酸细胞性食管炎病变的特征在本组9例材料中均呈溃疡型改变，溃疡大小不等,大者6.8 cm 3.5 cm,小者2.5 cm 1.3 cm。5例溃疡达深肌层,4例溃疡达黏膜下层与浅肌层。溃疡边缘不规则隆起，底部较宽，质地软硬不一，呈明显堤坝状，溃疡周边黏膜皱折不完整，颇似食管癌。切面呈灰白色，有光泽，有不同程度的水肿，部分标本尚可见各层组织结构。食管旁淋巴结均有不同程度的肿大,其中1例贲门旁淋巴结肿大。淋巴结切面可见淋巴滤泡增生,有散在嗜酸性粒细胞浸润。2.2 光镜下的病理组织学特点 从连续的肥大细胞胰酶染色的组织切片上发现,肥大细胞聚集区(图1)也是嗜酸性粒细胞相对集中区(图2)。在黏膜下层、肌层均可见大量的嗜酸性粒细胞呈弥漫性浸润。大量浸润的嗜酸性粒细胞侵入肌纤维束之间(图3)，把肌纤维束分割成大小不等的岛状,肌层和溃疡边缘的黏膜下层可见散在或密集淋巴滤泡形成。溃疡底部及溃疡壁见肉芽组织。肉芽组织主要由大量成纤维细胞、新生的毛细血管和大量嗜酸性粒细胞及各类炎症细胞所组成。在陈旧性病变中，尚可见明显胶原化(图4),仍能见到水肿和嗜酸性粒细胞浸润。2.3 肥大细胞的形态观察 通过免疫组化染色、甲苯胺蓝染色和硫染色等特殊染色,我们发现肥大细胞主要有2种不同形态。未释放型肥大细胞：胞体呈圆形或卵圆形，胞质丰富，胞质内可见玫瑰红异染颗粒，其大小较一致,胞膜厚,异染颗粒充满在胞质中,呈“石榴籽”样排列，处于未释放状态。释放型肥大细胞：胞体较前者为大，胞质丰富，胞质内异染颗粒大小较悬殊，胞膜不完整，有破口，异染颗粒外溢出胞膜(图5)。在9例病变标本中，不同形态的肥大细胞在病变中分布的部位不尽一致。未释放型肥大细胞主要分布在溃疡周边黏膜和黏膜下层，常23个细胞聚集在一起，也有单个细胞分散在组织中;释放型肥大细胞主要分布在肌层和溃疡底部的肉芽组织中，尤以血管周围和成纤维细胞之间为著，常78个细胞聚集在一起，也有单个细胞散在分布于组织中。上述2种肥大细胞虽然数量不平衡(图6)，但都有比较明显的部位分布，同时在整个病变中,还可以见到2种细胞散在分布于不同部位。3 讨 论3.1 嗜酸细胞性食管炎的病因 嗜酸细胞性食管炎的病因及发病机制尚未完全阐明，任何年龄均可发病。本病的临床表现取决于受累部位和组织层的深度，大部分患者有食物不耐受、过敏史或过敏家族史，说明嗜酸细胞性食管炎是多种相关因素长期综合作用的结果,变态反应为本病发病的重要环节。变态反应病变中具有特征意义的嗜酸性粒细胞吞噬免疫复合物和从肥大细胞脱出的颗粒，可能有调整和限制速发型变态反应的作用。3.2 肥大细胞在嗜酸细胞性食管炎病变组织中的分布与作用 本研究显示,在病变各层均有肥大细胞存在，肥大细胞与嗜酸性粒细胞聚集区域一致。其机制可能是：肥大细胞脱颗粒时会释放嗜酸性粒细胞趋化因子(ECAF)、白细胞三烯、白细胞介素-5 (IL-5)等，这些因子对嗜酸性粒细胞均有趋化作用。肥大细胞产生的肿瘤坏死因子(TNF-)等能促进淋巴细胞的浸润，而淋巴细胞会产生 IL-4、IL-5等细胞因子,它们都是重要的嗜酸性粒细胞趋化因子。而肥大细胞脱颗粒释放的组胺等血管活性介质可使血管通透性增加，对炎症细胞的浸润有促进作用2。肥大细胞能产生、贮存和释放许多具有不同调节活性的介质，它们可以分布在不同部位，同一个体不同部位的肥大细胞都存在着异质性。在本组标本中，我们也见到数量不等、形态不一的肥大细胞分布在溃疡病变的不同部位。这种肥大细胞的分布可能与它的功能不同有关。本病分布在黏膜或黏膜下层的肥大细胞容易接触到各种抗原物质而被激活，参与免疫过程而导致组织破坏。有意义的发现是，本组病变中，黏膜和黏膜下层主要是以未释放型肥大细胞为主。我们认为，这种现象的出现是病变静止后将继续发展的潜伏阶段，该病的发生与肥大细胞释放各种介质有关，病变的发展有赖于肥大细胞的分化和激活。在有关嗜酸细胞性胃炎的研究中，也观察到大量嗜酸性粒细胞浸润现象，这是由肥大细胞激活后所释放的嗜酸性粒细胞趋化因子所造成的3。Beil等5证实激活的肥大细胞能释放嗜酸性粒细胞趋化因子，引起组织中大量嗜酸性粒细胞浸润;而且这些被激活的嗜酸性粒细胞还可以通过自身颗粒的释放造成黏膜和其他组织结构的损害。而肉芽组织形成可能是肥大细胞激活后所释放的介质仅对黏膜上皮组织造成损伤，且各种介质对组织中的间质成分也有重要作用，特别是对成纤维细胞的影响尤为突出。在我们的材料中，观察到肉芽组织中有许多释放型肥大细胞，可形成大量的成纤维细胞和新生的毛细血管，血管内皮肿胀，部分区域尚可见成纤维细胞向胶原化发展，有的区域已经发生胶原化。肥大细胞释放的多种介质通过肥大细胞与成纤维细胞接触和肥大细胞激活颗粒释放这两个环节来完成对成纤维细胞的作用，并能够引起纤维组织增生及胶原化4-5。这说明本病的肉芽组织形成和肥大细胞的激活有密切关系，也进一步证明了肥大细胞所释放的血管活性介质、趋化性介质及蛋白聚糖等介质均可引起组织损伤和炎症反应，导致纤维组织增生而发生纤维化。综上所述，我们认为嗜酸细胞性食管炎是一种变态反应性疾病，其发生可由肥大细胞释放的多种细胞因子所引起，同时与肥大细胞的分布有一定关系,被激活的肥大细胞释放的各种活性介质可引起食管壁组织的病理损害。分布在黏膜下层的肥大细胞不但可以造成黏膜炎症反应，并可以导致黏膜溃疡，间质中肥大细胞释放的各种活性介质可引起肉芽组织增生和纤维化。嗜酸细胞性食管炎的病变过程是一种慢性免疫反应过程，属迟发性免疫反应性疾病，为良性增生性疾病,很少恶变。我们观察的病例中无一例合并食管癌,手术后无一例复发,也说明其预后良好,手术切除为较好的治疗方法。有些报道认为本病术后有复发可能6,由于我们积累的病例太少,目前尚未发现复发者。【参考文献】 1 何绍衡,汪绍伯,蔡军，等.肥大细胞介质：胃促胰酶的某些生物学特性及作用J.国外医学生理病理科学与临床分册，1994，14(3)：159-160.2 窦肇华.免疫细胞学与疾病M.北京：中国医药科技出版社，2004:692-693.3 夏学德,陆金华.胃嗜酸性肉芽肿的病因及诊断J.国外医学消化系疾病分册,1990,10(1):18-20.4 Weller PF.The immunobiology of eosinophils J.N Engl J Med, 1991，324 (16):1110-1118.5 Beil WJ, Schulz M, McEuen AR,et al. Number, fix