生物培养技术复习题

生物培养技术复习题1.如何对酵母菌的死细胞和活细胞进行区别答：用美蓝对酵母菌的活细胞进行染色时，具有还原能力的酵母菌活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色2.抗生素效价测定的原理 答：抗生素效价常用的微生物学方法测定，它是利用抗生素对特定的微生物具有抗菌活性的原理来测定3.酵母菌液泡系的活体观察现象答：细胞无色，液泡呈红色4.管碟法的依据答：根据抗生素在琼脂平板培养基中的扩散渗透作用，比较标准品和实验品两者对比验菌的抑菌圈大小来测定供试品的效价5.一般培养基的灭菌采用什么方法，此灭菌方法温度为，需要灭菌多久答：高压蒸汽灭菌法，121,20到30分钟6.细菌的培养应用那类培养基，放线菌和真菌呢答：牛肉蛋白胨培养基，高氏一号培养基，马铃薯培养基7.在使用高压蒸汽灭菌锅时，装料加盖后，可以直接加热吗，为什么，答：不可以，要排气8.在达到灭菌时间后，关闭电源，停止加热，直接打开放气阀，这一操作对吗，正确的操作是答：不对，需要压力降压接近0是，打开放气阀9.常用的分离纯化方法有哪几类答：稀释涂布平板法，稀释混合平板法，平板划线法10.经过革兰氏染色，被染成淡红色和蓝紫色的分别是什么性菌答：阳性 阴性11.用显微镜观察细菌时，下降镜头时，正确的方法是答：从侧面观察镜头，切忌用眼睛对着目镜12.按国家饮用水卫生标准规定，1毫升自来水中杂菌不得超过多少个，大肠菌群不得超过多少个答：100 313.多管发酵法包括哪三个部分答：初发酵试验，平板分离，复发酵试验14.放线菌分类鉴别依据答：能否产生菌丝体及有菌丝体产生的各种形态特征15.插片的注意事项答：盖玻片以45度角插入培养基，插入深约为二分之一或三分之一16.如何鉴别放线菌和霉菌答：放线菌背面有同心圆形纹路，霉菌菌落大型，肉眼可见许多毛状物，棕色青色，可见黑色分生孢子群17.放线菌菌丝体及孢子丝状态答：放线菌是由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细胞菌丝体，菌丝体分为两部分即潜入培养基中的营养菌丝和生长在培养基表面的气生菌丝，孢子丝有圆形椭圆形或杆形18.放线菌的鉴别采用什么方法答：稀释平板法与涂布法19.放线菌的菌落一般特征是什么答：一般为圆形，菌落质地紧密表面绒状且干燥20.放线菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌，用的培养基是什么答：阳性，高氏一号培养基21.在制备放线菌稀释液时，如果稀释度不够会出现什么问题答：如果稀释度不够，放线菌抑制或者菌落太小，而其他细菌的菌落太多，不容易找到22.再挑取菌落观察时，应挑取什么样的菌落答：挑取分离出来多的单个菌落23.为什么要用革兰氏染液对放线菌进行复杂答：放线菌是有分枝状菌丝体的细菌，革兰氏染色为阳性，染色后放线菌与环境形成对比，能清楚地观察到放线菌的形态特征24.水中大肠菌群检测试验需要哪三种培养基答：乳糖蛋白胨培养液，三倍浓乳糖蛋白胨培养液，伊红美兰培养基25.水中大肠菌群的检测方法主要有哪两种，多管发酵法包括哪三个部分答：多管发酵法和滤膜法，多管发酵法包括初发酵试验，平板分离，复发酵试验26.吲哚实验用什么培养基，甲基红实验用什么培养基答：蛋白胨水培养基，葡萄糖水蛋白胨水培养基27.甲基红实验如何判断实验结果答：在实验中加入甲基红3到4滴，如果变红色为阴性，黄色为阳性28.培养基配好后应立即灭菌，那么如何检查灭菌后的培养基是否无菌答：将已经灭好君德试管放到25到28度的恒温环境中，培养三天后拿出来检查有无杂菌滋生的痕迹，如果有出现斑点等情况，证明灭菌不彻底29.培养基制备好后，采用的灭菌方法灭菌的时间答：采用高压蒸汽灭菌法灭菌15分钟30.如何鉴别霉菌答：观察群体形态，包括大小颜色菌落表面的纹状及边缘，观察个体形态，包括菌丝的特征，子实体的形态31.霉菌的菌落特征答：霉菌干燥，外观大而疏松，透明度较低，菌丝相互交织且菌落与培养基牢固结合，颜色丰富多样，细胞生长速度快，且有发霉气味32.实验中吲哚实验的反应原理是什么答：某些细菌有色氨酸酯，能分解蛋白胨中的色氨酸形成吲哚，吲哚能对二甲基氨甲醛作用生成玫瑰吲哚而成红色33.试验中二乙酰实验的反应原理是什么答：某些细菌能发生如下转换：葡萄糖丙酮酸脱羧乙酰甲基甲醇2,3丁烯二醇，在有碱存在时氧化成二乙酰，后者和胨中的弧基化合物起作用产生粉红色的化合物34.IMVIC实验的大肠菌群与产气杆菌是革兰氏阴性还是阳性答：A 大肠 B产气I + _M + _V _ +C _ +35.何为大肠菌群答：是指一大群与大肠杆菌相似的好氧及兼氧的革兰氏阴性无牙孢杆菌36.多发酵法原理答：根据大肠菌群细菌能发酵乳糖产酸产气以及具备革兰氏染色无阴性，无牙胞，成杆状等特性37.为什么有的大肠菌群菌落为带金属光泽的深红色答：大肠菌群发酵乳糖后产生的酸和乙醛发生符合反应，形成深红色复合物，是大肠菌群菌落变为带金属光泽的深红色38.培养基的制备一般步骤答：称量药品，加热溶解，调节ph值，过滤，分装，加棉塞，包扎灭菌，摆斜面，无菌检查39.高压蒸汽灭菌步骤答：加水装料，排气升压，保压降压，灭菌物品取出，无菌检查40.培养机制备需要注意什么答：称药品时药匙不要混用，调ph值要小心避免回调，使用高压灭菌锅时，务必等压力降到0后打开灭菌锅，灭菌要严格按照灭菌流程操作，过程中必须有人看守41.在高倍镜或油镜下如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝答：基内菌丝在下层并且色浅还较细，气生菌丝在上层颜色较深并较粗42.放线菌形态结构及繁殖方式答：形态结构：放线菌为单细胞大多数由分支发达的菌丝组成，根据放线菌菌丝的向他和功能分为营养菌丝气生菌丝和孢子丝三种繁殖方式：主要通过形成无性孢子的方式进行繁殖，也可利用菌丝片段进行繁殖，放线菌生长到一定阶段，一部分菌丝形成孢子丝，孢子丝成熟变分化成许多孢子这称为分生孢子43.如何区分根霉，青霉，曲霉答：根霉有假根像植物的根部，青霉和曲霉的分生孢子不一样，青霉是辐射状的，曲霉是伞状的44.进行水中大肠菌群检测通过什么现象判断有大肠菌群存在答：经涂片，染色，镜检如革兰氏阴性无牙孢杆菌则挑取该菌的另一部分重新接种于普通的乳糖蛋白胨发酵管中，每管可接种来自同一出发酵管中的同类型菌落1到3个，37度下培养24小时，若产酸产气者，则存在45.IMVIC的意义是什么I 吲哚实验M 甲基红实验V 伏普实验C 柠檬酸实验46.在涂布法分离微生物的过程中，细菌放线菌霉菌酵母菌分别要那种培养基平板进行培养答：细菌为牛肉膏蛋白胨培养基，放线菌为高氏一号培养基，霉菌放线菌为马铃薯培养基47.四大类微生物菌落特征答：细菌 一般呈现较湿润较光滑较透明角粘稠，小而突起放线菌 干燥不透明，呈致密绒状霉菌 常成绒毛状，絮状或蜘蛛网状，有时还成不同颜色菌落大酵母菌 比细菌菌落大而突起表面光滑，湿润粘稠多为白色48.从土壤中分离微生物的过程需要注意哪些答：1样品取来是要及时进行分离否则会影响分离效果2样品稀释时每稀释一次换一支试管是计数准确3放线菌培养时间要适当延长4划线分离操作时，动作要轻避免划破培养基表面5无菌操作49.双碟制备的过程答：在超净工作台上，用灭菌大口吸管吸取已融化的培养基20毫升注入双碟内，作为培养基的底层，凝固后更换干燥的陶瓦盖覆盖，放置20到30分钟，备用。取出实验用的菌悬液，用灭菌吸管吸取悬液加入已融化并保温在水浴的培养基内，摇匀作为菌层用，用灭菌大口5毫升吸管吸取菌层培养基5毫升，均匀摊布在底层培养基上，在水平台上凝固，用陶瓦盖覆盖放置20到30 分钟50.斜面接种的正确操作步骤答：左手拿菌种管和斜面管，使斜面向上并尽量放平，用右手先将棉赛拧松动，在拿接种环，用右手的小指无名指和手掌拔下棉赛并加紧，同时将管口在火焰上燃烧一圈，接种环灼烧灭菌后插入管内，冷却调菌，立即转入斜面管底部，沿斜面化曲线或直线，注意划线要轻，不可把培养基划破51.测定抗生素效价的典型方法，基本原理是什么答：管蝶法是目前抗生素效价测定的国际通用方法，它的基本原理是在含有高度敏感性实验菌的琼脂平板上放小钢管，管内放入标准品和验品德溶液，经16到18小时恒温培养，当抗生素在菌层培养基扩散时，会形成抗生素浓度由高到低的自然梯度52.伊红美兰培养基为什么冷却到50度左右到平板答：因为培养基太热会产生过多的凝集水53.为什么乳糖蛋白胨培养基在灭菌后会发生颜色变化答：在加热灭菌过程中，培养基的乳糖有少量分解培养基的ph值发生变化从而颜色发生变化54.酵母菌实验鉴别器具有什么答：显微镜，恒温箱，超净工作台，载玻片，盖玻片，接种环，酒精灯，擦镜纸，滤纸，火柴55.如何对酵母菌液泡系进行活体观察答：于洁净载玻片中加一滴中性红色染液，取少许上述酵母菌悬液与之混合后染色5分钟，加盖玻片在显微镜下观察无色，液泡红色56.放置牛津杯时应注意什么答：注意管和管之间不能靠太近 ，否则会引起相邻的两个抑菌圈之间抗生素扩散区的浓度增大，相互影响形成卵圆形或椭圆形抑菌圈，管与双碟边缘也不能靠太近，液面浸湿作用边缘的琼脂培养基为非平面会影响抑菌圈的形状57请先细说明为什么革兰氏染色方法将细菌分为阴性阳性两种答：由于两类菌细胞壁结构和成分不同决定的，阴性菌的细胞壁中好有较多易被乙醇溶解的类脂质，且肽聚糖层较薄交连度低，所以用乙醇脱色是溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌被脱色再经石炭酸复红染液就成红色，阳性菌细胞壁肽聚糖层厚且交联度高，几乎不含类脂质，经乙醇处理后反而肽聚糖层孔径减小，通透性降低，因此仍保持蓝紫色58.请详细说明革兰氏染色中染色具体步骤答:1初染 与制片上滴加结晶紫染1分钟，用水洗去剩余染料2媒染 滴加卢氏碘液1分钟后水洗3脱色 滴加95%乙醇脱色，摇动玻片直至紫色不再被乙醇脱退为止4 复染 滴加石炭酸复红染液复染1分钟水洗5用滤纸吸干，油镜镜检59请说明一下大肠杆菌，金