DB33T 601-2006 蜂产品中氟胺氰菊酯残留量测定方法.doc

DB/T 浙江省质量技术监督局发布2006-03-08实施2006-02-07发布蜂产品中氟胺氰菊酯残留量测定方法Method for determination of fluvalinate residues in bee productsDB33/T 6012006DB33浙江省地方标准ICS 67.050X 04备案号：1DB33/T 6012006前 言本标准由浙江省质量技术监督局提出并归口。本标准起草单位：农业部农产品质量监督检验测试中心（杭州）、浙江省标准化研究院。本标准主要起草人：朱亚红、王小骊、胡秀卿、吴珉、董秀金、李宁。I蜂产品中氟胺氰菊酯残留量测定1 范围本标准规定了蜂产品（蜂蜜、蜂王浆、蜂花粉）中氟胺氰菊酯残留量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于蜂产品中氟胺氰菊酯的残留量测定。本方法检出限为0.01 mg/kg。2 原理蜂产品中氟胺氰菊酯经丙酮与石油醚混合溶剂提取，提取液经氯化钠水溶液盐析，中性氧化铝层析净化，高效液相色谱仪紫外检测器分析，根据保留时间定性，外标法定量。3 试剂与材料除非另有说明，在分析中均为分析纯试剂和GB/T 6682中规定的至少二级的水。3.1 丙酮。3.2 二氯甲烷。3.3氯化钠水溶液：称取10g氯化钠加入1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。3.4无水硫酸钠：350 灼烧2 h，冷却后置干燥器备用（0-4密封保存三个月）。3.5 石油醚：沸程 60-90。3.6 甲醇。3.7 甲醇：色谱级。3.8中性氧化铝：80目-100目 150烤3小时，置于干燥器中备用。使用前加入5%水脱活12h。3.9 氢氧化钠。3.10氟胺氰菊酯标准溶液(国家标准物质)：100 mg/L。 3.11使用时用甲醇稀释成线性范围浓度：0.05 mg/L -1.00mg/L。3.12 玻璃层析柱：1cm15cm。4 仪器4.1旋转蒸发器。4.2高速匀浆机：40000 r/min。4.3高效液相色谱仪：带紫外检测器。5 样品制备蜂蜜、蜂王浆取样后直接放入具塞塑料瓶，蜂花粉捣碎机磨碎后放入封口塑料袋，试样放入冰箱（0-4）贮藏备用。6 分析步骤6.1 提取称取试样10.0g，放入250mL平底三角烧瓶。加5mL蒸馏水和80mL丙酮(3.1)石油醚(3.5)（1：1）混合液在高速匀浆机上提取，时间2min-3min,平底三角烧瓶中静止分层，上清液倒入250mL分液漏斗，底层再加入5mL蒸馏水和以上混合液50mL，继续在高速匀浆机上提取1min，平底三角瓶静止分层，上清液合并入分液漏斗。加入10氯化钠水溶液50mL进行液液分配。水相倒入另一分液漏斗，再用30mL、30 mL石油醚(3.5)反萃取两次，合并石油醚液，石油醚液过无水硫酸钠，在40下浓缩至1mL-2mL，再用氮气吹干，待净化。6.2 净化取玻璃层析柱（3.12），上下两端加2cm无水硫酸钠，中间加4g中性氧化铝（加5水脱活）。用30mL石油醚预淋，弃去。上述浓缩样品用50mL石油醚乙酸乙酯（95：5）分多次溶解后移入层析柱淋洗，收集淋洗液，在40下浓缩至1mL-2mL，再用氮气吹干，用甲醇(3.6)溶解，倒入10.0mL刻度细管至刻度，待进样。6.3 液相色谱条件6.3.1色谱柱:C18 ODS, 4.0mm250mm，5m。6.3.2流动相:甲醇水（90:10），流速：1.0mL/min。6.3.3吸收波长:254nm。6.3.4 柱温:室温。6.3.6 色谱测定分别吸取20L标准溶液和试样溶液，注入液相色谱仪，以保留时间定性，根据试样蜂高或蜂面积，确定氟胺氰菊酯的标准工作液浓度，使响应值在仪器的检测线性范围内，进行外标法定量。6.4 空白试验除不加试样外, 均按上述步骤进行。7 结果计算试样中氟胺氰菊酯含量用质量分数w 计，单位以毫克每千克(mg/kg)表示，按公式（1）计算。A1V1V3rw （1） A2V2V4m式中：w蔬菜、水果中氟胺氰菊酯（质量分数计）含量（mg/kg）；r标准溶液中氟胺氰菊酯质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）；A1试样中组分的峰面积或峰高，积分单位；A2标准样中组分的峰面积或峰高，积分单位；V1试样中提取的总体积，单位为毫升（m L）；V2净化用提取液的总体积，单位为毫升（m L）；V3浓缩后甲醇定容体积，单位为毫升（m L）；V4进样体积，单位为微升（L）；m试样的质量，单位为克（g）。计算结果保