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基金项目: 贵 州 省 科 学 技 术 基 金 项 目 ( 编 号: 黔 科 合 丁 字 ) ; 贵阳市重大科技支撑项目( 编号: 筑科农合同学第 ) ; 贵州大学研究生创新基金项目( 编号: 理工 ) 作者简介: 毛玉涛( ) , 女, 贵州大学在读硕士研究生。 : 通讯作者: 王明力 收稿日期: 第 卷第期 年 月 , 吸附剂对豆浆中嘌呤物质的吸附 毛玉涛 , , 王明力 , , 张 洪 , , 和 岳 (贵州大学化学与化工学院, 贵州 贵阳 ;贵州省发酵工程与生物制药重点实验室, 贵州 贵阳 ; 贵州大学喀斯特山地果树研究所, 贵州 贵阳 ) ( , , , , ; , , , ; , , , ) 摘要: 采用不同的吸附剂分别对豆浆中的嘌呤物质进行去 除, 通过单因素和正交试验优化工艺条件, 结果表明, 在活性 炭浓度为 , 值为 , 恒温静置 的条 件下, 豆浆中嘌呤的吸附率达到最大, 为 。该方法 的提出, 填补了中国国内豆浆中嘌呤物质去除的技术空白。 关键词: 豆浆; 嘌呤; 吸附剂; 吸附率 : , , , , : ; ; ; 豆浆中含有丰富的植物蛋白, 磷脂, 维生素 、, 烟酸 和铁、 钙等矿物质 , 长期以来备受国人青睐, 被誉为 世 纪“ 餐桌明星” ,在欧美享有“ 植物奶” 的美誉 。尽管豆浆 和豆制品属于高营养低价位的食物, 但患有消化性溃疡和痛 风病的患者 却因大豆中嘌呤含量较高( 左 右) 而不宜长期食用 , 因为嘌呤有促进胃液分泌的作用, 且在人体内最终代谢为尿酸, 若嘌呤代谢紊乱使得过多尿酸 沉积在体内就会引起痛风及其并发症。因此去除豆浆中的 嘌呤类物质, 使其适合特殊人群食用, 具有重要的研究意义。 嘌呤是一类带碱性有两个相邻碳氮环的含氮有机大分 子物质, 含有极性基团, 可被某些吸附剂作用 。食品工业 中常见的吸附剂有硅藻土、 活性炭、 沸石、 壳聚糖和分子筛 等。前人 曾分别成功应用活性炭和壳聚糖吸附饲料和 啤酒中的嘌呤类物质, 取得了较为显著的成果。但是对于豆 浆中嘌呤物质脱除的研究却未见报道。本试验比较了不同 的吸附剂对嘌呤物质的吸附性能, 筛选出效果最佳的吸附 剂, 并深入研究其对豆浆中嘌呤类物质的吸附效果。 材料与方法 材料与仪器 黄豆: 产地安徽蚌埠; 腺嘌呤标样、 鸟嘌呤标样、 黄嘌呤标样、 次黄嘌呤标样: 色谱纯, 鼎国生化试剂有限公司; 食品级硅胶、 硅藻土、 尼龙 ( 聚己二酰己二胺) 、 ( 交联聚维酮) 、 活性炭、 壳聚糖、 分子筛及人造沸石: 天津市 科密欧化学试剂开发中心; 甲酸、 三氟乙酸、 氢氧化钾、 磷酸: 分析纯, 天津市光复精 细化工研究所; 甲醇、 异丙醇: 色谱纯, 天津市登科化学试剂有限公司; 高效液 相 色 谱 仪: , 美 国 公司; 超声波清洗 器: , 上海冠特超声仪器有限 公司; 豆浆机: , 九阳豆浆机有限公司; 恒温磁力搅拌器: , 江苏省金坛市恒丰仪器厂; 电子精密天平: , 奥豪斯仪器有限公司; 精密酸度计: , 上海大普仪器有限公司; 数显恒温水浴锅: , 金坛市正基仪器有限公司; 离心机: 型, 上海安亭科学仪器厂。 试验方法 吸附剂的筛选 分别精确称量 腺嘌呤、 鸟嘌 呤、 黄嘌呤和次黄嘌呤标准品溶于溶于 的盐酸溶液中, 取上述各溶液 , 加入 吸附剂, 振荡均匀, 静置一定时间, 过滤, 比较不同吸附剂对种嘌呤 物质的吸附效果。选出效果最佳的吸附剂对豆浆进行嘌呤 吸附的研究。 豆浆中嘌呤物质的脱除工艺 取 研磨好的豆 浆于 烧瓶中, 加入一定量的吸附剂, 搅拌均匀, 在一 定的 下吸附一段时间, 冷却后离心( ) , 过滤, 待分析。 分别考察吸附剂添加量、 吸附时间、 吸附温度及反应 值对豆浆嘌呤物质吸附率的影响, 并通过正交试验优化工艺 条件。 分析方法 利用高效液相色谱 , 对豆浆中嘌呤的 含量进行测定。色谱分离条件: 反相柱( , ) 色谱柱, 以 磷酸二氢钾缓冲 液( ) 作为流动相, 流速 , 柱温 , 进样 量 , 检测波长 ( )为 , 。 取 样品于 烧瓶中, 加入 三氟乙酸 与甲酸的混合液, 在 油浴锅中水解, 然 后冰浴冷却, 并用 溶液中和, 直至 调至 , 再用 调 至, 定容至 , 用 滤膜过 滤, 在 波 长 处 测 定, 根 据 标 准 曲 线 求 出 嘌 呤 的 含 量 。 根据 食品中蛋白质测定方法 , 利 用半微量凯氏定氮法分别对吸附处理前后的豆浆进行蛋白 质含量的测定, 并与 植物蛋白饮料 豆 奶( 豆浆) 和豆奶饮料 标准进行对照。 嘌 呤 吸附率 的计算 据 报 道 大 豆 中 含 腺 嘌 呤 , 鸟嘌呤 , 黄嘌呤 , 次 黄嘌呤 。由此可见大豆中的嘌呤物质主要以 腺嘌呤和鸟嘌呤为主, 黄嘌呤和次黄嘌呤的含量微乎极微, 因此本 试 验 主 要 考 察 处 理 前 后 腺 嘌 呤 和 鸟 嘌 呤 的 含 量 变化。 吸附处理前后腺嘌呤和鸟嘌呤含量总和的变化量称为 嘌呤吸附率。根据样品中腺嘌呤和鸟嘌呤的峰面积, 从标准 曲线上查出其浓度, 豆浆中嘌呤物质的吸附率按式() 计算: ( ) 式中: 豆浆中嘌呤物质的吸附率,; 处理前豆浆中嘌呤的浓度, ; 处理后豆浆中嘌呤的浓度, 。 结果与讨论 不同吸附剂对种嘌呤的吸附结果 种吸附剂对种嘌呤的吸附效果见表。 表 不同吸附剂对种嘌呤的吸附效果 吸附剂腺嘌呤鸟嘌呤黄嘌呤次黄嘌呤 硅胶 硅藻土 尼龙 分子筛 沸石 壳聚糖 活性炭 由表可知,种吸附剂对种嘌呤都具有一定的吸附 效果, 活性炭的吸附效果尤其显著, 特别是对黄嘌呤和次黄 嘌呤的吸附效果更加明显, 吸附效果次于活性炭的是壳聚 糖。其它种吸附剂对种嘌呤物质的吸附效果都不理想。 故选择活性炭作为豆浆嘌呤物质的吸附剂, 进行深入研究。 活性炭添加量对豆浆嘌呤吸附率的影响 活性炭的添加量对豆浆中嘌呤吸附率的影响见图。 图 活性炭的添加量对豆浆中嘌呤脱除率的影响 由图可知, 随着活性炭加入量的不断增大, 嘌呤的去 除率逐渐增大, 当活性炭浓度达到 时, 去除效果达 到最大。 反应温度对豆浆嘌呤吸附率的影响 反应温度对豆浆中嘌呤吸附率的影响见图。 由图可知, 随着温度的不断升高, 豆浆中嘌呤的去除 率呈现先增加后减少的状态, 在 时达到最高, 继续升高 基础研究 年第期 图 反应温度对豆浆中嘌呤吸附率的影响 温度, 吸附率反而下降。这是由于活性炭吸附为物理吸附, 吸附过程 是 放 热 过 程, 温 度 过 高 反 而 不 利 于 吸 附, 因 此, 时吸附效果最好。 反应 对豆浆嘌呤吸附率的影响 反应 对豆浆中嘌呤吸附率的影响见图。 图 反应 对豆浆中嘌呤吸附率的影响 由图可知, 随着 的逐渐增大, 嘌呤的吸附率先增 大后减小, 在 为时达到最大, 但趋势并不是很明显, 考 虑到豆浆本身的 为 左右, 与最大值间差距不大, 因 此在深入活性炭对豆浆嘌呤进行去除的探索中, 可维持反应 值在豆浆本身 值( ) 左右来进行研究。 反应时间豆浆嘌呤吸附率的影响 反应时间对豆浆中嘌呤吸附率的影响见图。 由图可知, 随着反应时间的增加, 嘌呤吸附率呈现先 上升后下降的趋势, 在 时达到最大。 正交试验结果 选择活性炭作为豆浆嘌呤物质的吸附剂, 分别考察活性 炭的添加量、 反应温度、 值和反应时间个因素对豆浆中 嘌呤物质吸附率的影响。根据单因素试验结果, 确定各因素 对应水平见表。 根据表确定的各个因素, 进行正交试验, 得到结果见 表 。 图 反应时间对豆浆中嘌呤吸附率的影响 表 因素水平表 水 平 活性炭添加量 ( ) 温度 值 反应时间 表 正交试验结果与分析 序号 吸附率 由表可知, 影响豆浆中嘌呤去除率的因素主次为 , 最佳配比为, 但由单因素试验可知, 当 活性炭的添加量大于 时, 嘌呤吸附率的增加趋势已 不明显, 且考虑到活性炭浓度越高, 其对豆浆的品质影响也 越大, 所以确定最佳添加量为 , 值为 , 恒 温静置 。在此条件下进行次验证实验, 最终得到豆 浆中嘌呤的平均去除率为 。经过( 下转第 页) 第 卷第期毛玉涛等: 吸附剂对豆浆中嘌呤物质的吸附 酸含量先缓慢增加, 达到一定水平后稳定, 处理中总酸含 量最高; 游离氨基酸含量则慢慢减少后平稳, 处理中游离 氨基酸含量最高。单宁和 含量呈现下降的趋势, 处理 中单宁含量最少, 麻口涩味最弱, 处理中的含量最高。 感官评价得分最高的为处理。综合来看, 低盐热烫处理是 较优的工艺。 ()不同方法处理的芋头叶柄泡菜中亚硝酸盐、 挥发 酸、 挥发酯、 总酸、 单宁、的含量的变化不同, 说明是否热 烫和高低盐处理能影响芋头叶柄泡菜发酵进程。本试验表 明, 热烫低盐发酵处理是一种可行的除涩方法。如何选择合 适的热烫温度和时间, 适宜的低盐度和发酵温度, 既能保证 产品的营养和风味, 又能保证产品的脆度和质量, 将是进一 步研究的方向。 参考文献 刘玉平芋脱毒快繁体系建立的初步研究 湖北: 华中农业大 学, 王 玉 虎,万 红 军,丁 文 美芋 艿 梗 蔬 菜 的 加 工 方 法:中 国, , , , , ( ) : 何金兰 芋头茎秆加工利用 热带农业工程, () : , () , ,() : : , : 大连轻工业学院 食品分析 北京: 中国轻工业出版社, : 武文, 詹秀环, 宣亚文 碘量法测定蔬菜中维生素的含量安 徽农业科学, , ( ) : 陈芸芸, 李巧云 传统泡菜发酵过程中主要成分的动态分析 漳州师范学院学报, () : , , , , ( ) : 谭兴和, 时莎莎, 谭亦成, 等 干豆角发酵过程中的成分变化 食品与机械, , () : 艾庆辉, 苗又青, 麦康森 单宁的抗营养作用与去除方法的研究 进展 中国海洋大学学报, , () : 齐海萍, 胡文忠, 姜爱丽, 等 白菜泡菜发酵过程中的主要成分变 化 食品研究与开发, , () : 钟凌云, 吴皓 天南星科植物中黏膜刺激性成分的研究现状与分 析中国中药杂志, , ( ) : 吴皓, 李伟, 韩洪涛, 等 半夏刺激性成分的研究中国中药杂 志, , ( ) : , , ( ) : ( 上接第 页) 凯氏定氮测得未经处理的豆浆蛋白质含量为 , 处理过的豆浆蛋白质含量为 , 仅 降 低 了 。 结论 通过吸附作用的机理, 采用不同的吸附剂对种嘌呤物 质进行吸附, 活性炭的吸附效果远远大于其它吸附剂。选择 活性炭作为吸附剂, 对豆浆中的嘌呤类物质进行吸附研究。 结果表明, 在活性炭添加浓度为 , 值为 , 恒温静置 时, 能有效去除豆浆中的嘌呤物质, 吸附率 达到 。经过凯氏定氮测得处理过的豆浆蛋白质含 量仅降低了 。可考虑采用该方法, 为痛风及其并发 症患者研制低嘌呤保健豆浆, 并扩大豆制品的消费市场, 创 造更大的经济效益。 参考文献 夏光辉, 刘振春, 陈丽安 菠萝味豆浆的制作工艺研究安徽农 业科学, , ( ) : 黄敏璋, 程裕东, 周颖越, 等 豆浆饮料的微波杀菌特性初步研究 , 食品科学, , ( ) : 刘少林 大豆中嘌呤含量的测定及分离研究 安徽: 安徽农业 大学, 张春珍, 郑亚丽 低嘌呤饮食对痛风性关节炎疗效的影响浙 江预防医学, , () : 卢味, 詹玉云, 邱秀娉 合理饮食对痛风病人治疗作用的观察 中外健康文摘, ,( ) : 林先军, 董建军, 单连菊, 等 吸附剂吸附啤酒中嘌呤类物质的初 步研究中国酿造, () : , : , 胡金德, 李德超, 曹又新 低嘌呤啤酒及其酿酒工艺技术啤酒 科技, ( ) : , : , , () : 李景梅, 金丽虹, 翁占坤 鸟嘌呤, 腺嘌呤, 胸腺嘧啶和胞嘧啶的 紫外吸收谱研究长春理工大学学报, , () : 凌云, 王新宴, 雍炜 高效液相色谱法检测肉类食品中种嘌呤 碱分析化学, (

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