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2 0 1 0 No 1 O 4 4 S e r i a l N o 2 2 3 Ch i n a Br e wi n g R e s e a r c h Re po 微波条件下蕉藕粉酸水解制备葡萄糖的研究 张建平 , 赵 莹 , 梁力曼 , 王子华 , 李晓丽 , 赵永光 ( 1 河北科技师范学院 理化学院, 河北 昌黎 0 6 6 6 0 0 ; 2 河北科技师范学院 园艺科技学院, 河北 秦皇岛 0 6 6 6 0 0 ) 摘要: 采用微波辐射与盐酸催化相结合对蕉藕粉进行水解制备葡萄糖, 探讨了微波功率、 辐射时间、 反应温度 、 酸浓度和无机盐等 条件对蕉藕粉水解的影响。结果表明,蕉藕粉在微波功率8 0 0 W,温度9 5 C ,盐酸浓度 为0 1 mo L L 的条件下, 7 m i n 葡萄糖 的收率为 9 5 O 1 ; 添 N B a C I 时葡萄糖的收率为1 0 0 0 4 。 关键词 : 蕉藕粉: 微波; 酸水解; 葡萄糖 中图分类号: Q5 3 2 文献标识码 : A 文章编号: 0 2 5 4 5 0 7 1 ( 2 0 1 O ) 1 0 0 0 4 4 0 3 P r e p a r a ti o no f g l u c o s ef r o m Ca n n a e d u s s t a r c hb ya c i dh y d r o l y s i s u n d e r mi c r o wa v ei r r a d i a t i o n Z HANG J i a n p i n g , Z HAO Yin g , LI ANG Li ma n , W ANG Z i h u a , L I Xi a o l i , ZH A O Yo n g g u a n g f 1 C o H e g e o f P h y s i c s a n dC h e m i s t r y , He b e i No r ma l U n i v e r s R yo f S c i e n c e & T e c h n o l o g y , Q i n h u a n g d a o 0 6 6 6 0 0 , C h i n a ; 2 C o l l e g e o f Ho r t i c u l t u r e S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y , He b e i No rm a l U n i v e r s i O r o f S c i e n c e T e c hno l o g y , Q i n hna n g d a o 0 6 6 6 0 0 , C h i n a ) Ab s t r a c t : Th e p r e p a r a t i o n o f g l u c o s e f r o m C a n n a e d u l i s s t a r c h b y HCI c a taly z e d h y d r o l y s i s u n d e r mi c r o wa v e i r r a d i a t i o n wa s s t u d i e d T h e e f f e c t s o f mi c r o wa ve i r r a d i a t i on p o we r ,i rra di a t i o n t ime ,r e a c t i o n t e mpe r a tur e ,a c i d c o n c e n t r a t i o n a n d i no r g a n i c s a l t s o n t h e h yd r o l ys i s o f Ca n na e d u l i s s t a r c h we r e i n ve s t i g a t e d The r e s u l t s i n d i c a t e d t ha t t h e g l u c os e y i e l d wa s 95 01 whe n t he mi c r o wa v e i r r a d i a t i o n po we r wa s 8 00 W ,r e a c t i on t e mp e r a tur e wa s 9 5 , HCI c o n t e n t wa s 0 1 mo l L a n d i r r a d i a t i o n t i me wa s 7 mi n , T h e g l u c o s e y i e l d wa s 1 0 0 41 wh e n B a C1 2 wa s a d d e d d u r i n g h y d r o l y s i s Ke y wo r d s : Ca nn a e d u l i s s t a r c h; mi c r owa ve ; a c i d h y drol y s i s ; g l uc os e 蕉藕 ( C a n n a e d u l i s Ke r ) 又名芭蕉 芋 , 属美 人蕉科 , 多 年生草本植物 , 适宜在高温多雨地带生长 , 不择土壤f 1 。蕉 收稿 日期: 2 0 1 0 0 6 1 9 基金项目: 河北省科技攻关项 目( 0 6 2 2 0 1 0 3 D 一 5 ) 作者简介: 张建平 ( 1 9 7 9 一 ) , 男, 讲师 , 研究方向为应用化学: 赵永光 , 教授 , 通讯作者。 浓度为0 0 0 g mE m O 0 4 g mL 时, 盐度 对菌 种 的 生长影 响 不 大 : 当Na C l 浓度 0 0 4 g m L 时 , 菌种 数量 随盐 度 的增加 而 减少, 抑制菌种生长。 薯 Na C I 浓度 ( g mL ) 图4 菌株对N a CI的耐受性结果 Figu r e 4 T oler an c e o f t h e s t r ai n s t o NaCI 3讨论 筛选获得到的菌株N4 、 R r 、 R w均能够高效利用木糖 作为其糖源 , 其 中 可 以利 用黑 麦草 水解 液发 酵 生产 乙 醇, 并且具有明显酒精味及能够使滴加1 K 2 C r 2 0 , 溶液的 发酵液 由橙黄色变为黄绿色; 通过耐受性试验, 菌株 在 p H 1 直 为3 3 5 2 、 木糖浓度为0 0 2 g m L 、 Na C 1 浓度为0 O O g m L - 0 0 4 g mL 时生长旺盛 , 判定其 为具有 良好抗 性菌株 ; 通过 乙醇耐受性试验 , 菌株 在 乙醇浓度 为0 v o l - - 4 v o l 时可 以适量生长, 大于该浓度则明显抑制其生长。这些特征显 示 , 筛选 所 得菌株 具有 发酵 黑麦 草纤 维生产 乙醇 的能 力 , 但其耐受性范围较小 , 产 乙醇效率较低 , 有待 于进一步 研究诱变与驯化, 具有 良好 的应用前景 。 参考文献: 1 】 Z A L DI VA R J , NI E L S E N J , O L S S O N L F u e l e t h a n o l p r o d u c t i o n fr o m l i g n o c e l l u l o s e :A c h a l l e n g e f or me t a b o l i c e n g i n e e r i n g a n d p r o c e s s i n t e g r a t i o n J A p p l Mi c r o b i o l B i o t , 2 0 0 1 , 5 6 ( 1 2 ) : 1 7 3 4 2 S WAI N M R , K AR S , S AHO O A K, e t a 1 E t h a n o l f e r me n t a t i o n o f ma h u l a ( Mo d h u c a l a t i f o l i a L ) f l o we r s u s in g fr e e a n d i mmo b i l i z e d y e a s t S a c c h a r o my c e s c e r e v i s i a e J Mi c r o b i o l Re s , 2 0 0 7 , 1 6 2 ( 2 ) : 9 3 9 8 3 L Y ND L R, C US HMAN J H, NI C H OL S R J F u e l e t h ano l fr o m c e l lu l o s i c b i o ma s s J S c i e n c e , 1 9 9 1 , 2 5 1 ( 1 ) : l 3 1 8 - 1 3 2 3 【 4 C L AS S E N P A M, VA N L I E R J B, L OP E Z - C ONT RE R AS A M, e t a 1 U t i l i s a t i o n o f b i o ma s s f o r t h e s u p p l y o f e n e r g y c a r r i e r s J Ap p l Mi e r o b i o l B i o t , 1 9 9 9 , 5 2 ( 6 ) : 7 4 1 7 5 0 5 】田 沈 , 徐鑫, 孟繁燕 , 等 木质 纤维素 乙醇发酵研究进展 J 农业 工程学报 , 2 0 0 6 , 2 2( 1 ) : 2 2 1 2 2 4 6 赵斌, 向绍红 微生物学实验【 M 北京: 科学出版社 , 2 0 0 2 7 】 黄秀梨 微 生物学实验指导 M】 北京 : 高等 教育出版社 , 旖 普林格 出 版社, 1 9 9 9 : 9 - l 1 【 8 】 薛波 , 韩娜 , 侯敏, 等 7株葡萄野生酵母菌的特征研究【 J _ 中国 酿造, 2 0 0 9 ( 1 O ) : 1 9 2 1 【 9 刘畅 , 王涛 , 石 翠芳 耐高温酵母菌 的筛选及特 性研究 J 】 酿酒, 2 0 0 7 ,3 2( 2 ): 5 2 5 4 研究报告 中 国 酿造 2 0 1 0 年第1 0 期 总第 2 2 3期 4 5 藕中淀粉含量很高, 淀粉是葡萄糖的高聚体, 葡萄糖是人 体能量的主要来源 , 而且还有多种工业用途 。 目前, 制备葡萄糖主 要采用淀粉水解 的方法4 。近年 来, 由于微波加热 具有速 度快 、 效 率高、 均匀性好 、 加热热 惯性 小 、 易 于控 制 等特 点 , 与传 统 的水 解方法 相 比有 明 显的优势 , 微 波 能量 的快速 吸 收使 淀粉 水解 的 时间大为 缩 短。 因此 , 微波化学引起 了众 多研究者 的关注 。 本试验 将微波辐射技术应用到蕉藕粉水解制葡萄糖反应体系 中, 取得 了较好 的效果 。 1材料与方法 1 1材料 蕉藕采 自河北科技 师范学院农场 。 将其 根茎清洗 、 切 片 、 1 0 5 烘干 、 粉 碎 , 过 6 0 目筛于广 口瓶 备用 ( 淀粉含 量 4 6 1 0 ) 。 1 2试剂与仪 器 试剂: 氯化钠、 氢氧化钠、 氯化钾、 氯化钙、 氯化镁、 氯 化铁等均 为分析纯 。 仪器: WX 4 0 0 0 微波快速消解仪 ( 上海屹尧微波化学 技 术有限公司) , H H 一 2数显恒温 水浴 锅 ( 江 苏省金坛市 荣 华仪器制造有限公司) , DZ T W调温 电热套 ( 北京 市永光 明 医疗仪器 厂) , G Z X 9 2 4 0 MB E 数显鼓风 干燥箱 ( 上海市 博 讯实业有限公司医疗 设备厂) 等 。 1 - 3试验方法 1 3 1微波条件下蕉藕粉酸水解糖化法 将3 0 0 0 mL 一 定浓度 的稀 盐酸 溶液加 入 带盖聚 四氟 乙烯瓶中, 摇匀后再加入4 0 0 g 蕉藕粉, 振荡使其充分分散 均匀, 拧紧瓶盖 , 置于微波消解 系统 中进行糖化 , 反应完毕 后, 冷却 、 抽滤 , 得水解溶液 , 收集备用 。采用斐林试剂法 测定不同温度、 功率、 压力、 糖化时间条件下的葡萄糖收率。 l - 3 2传统加热条件下蕉藕粉酸水解糖化法 将3 0 o 0 mL 一定浓度 的稀盐酸溶液加入2 5 0 mL 的具塞 三角瓶 中, 摇匀后加入4 0 0 g 蕉藕粉 , 充 分振荡使其分散均 匀 , 水浴中加热进行酸水解糖化, 反应 完毕后, 冷 却、 抽滤 , 得到水解溶液, 收集备用。水解液用0 1 mo L L Na O H溶液 调p H值为7 0 , 采用斐 林试剂法 测定不 同糖 化 时间条 件下 的葡萄糖收率。 1 I 3 - 3不同无机盐对蕉藕粉酸糖化的影响 配 制 0 2 m o L L N a C I 、 K C 1 、 Mg C 1 2 、 C a C 1 2 、 B a C 1 2 、 A1 C1 3 和F e C 1 3 溶液, 分别移取5 0 0 m LO H 入3 0 0 mL 0 1 5 mo L L H C 1 中, 摇匀后 I A 4 0 0 g 蕉藕粉, 充分振荡, 进行微波加热酸 糖化。反应完毕后, 冷却、 抽滤, 得到水解溶液, 收集备用。 采用 斐林试剂法测定不 同糖化 时间条件下 的葡萄糖收率 。 1 3 4葡萄糖收率的计算 葡萄糖收率 水解得葡萄糖的量x 0 9 量 式中: 0 9 为淀粉转化成葡萄糖系数。 X1 0 0 2结果与讨论 2 1传统加热和微 波辐射 下蕉藕粉 酸水解糖化 比较 2 1 1传统加热蕉藕粉酸水解糖化法 称取4 0 0 g 蕉藕粉5 份, 分别加 入3 0 0 0 m L 0 1 mo l L H C I 溶液中, 振荡使其分散均匀, 置1 0 0 水浴中分别加热1 h 、 2 h 、 3 h 、 4 h 、 5 h , 取 出后 冷却 , 抽 滤 , 然后 移 取 1 0 O O m L 水 解 液用0 1 mo l L N a OH 调p H值为7 0 , 加水定容至l O O mL , 测其 葡萄糖 收率, 结果见表 1 。 表1 加热时间对水浴条件下蕉藕粉水解的影响 Ta ble 1E ffe c t o f he a t in g t ime O R t he h y d r o l y s is o f Ca n na e d uli s s t ar c h un d er wat e r ba t h 由表 1 可知, 在 1 0 0 水浴加热条件下对蕉藕粉进行酸 水解, 随着水解时间的延长, 葡萄糖的生成量先逐渐增加 后下降, 当水解时间为3 h 时, 葡萄糖收率达到最大值, 再延 长水解时间, 葡萄糖收率反而下降。因为传统水浴加热主 要靠传 导和对流方式进行传热 。热源先把热传给容器 , 容 器 再将 热传 向料液, 在料液内经热传 导和对流达到热能的 温度平衡。 所以水浴加热缓慢 , 而且热能分布不均 匀。 水解 生 成 的葡萄 糖 受酸 的催化 作用 发 生 复合 反应 和分 解 反 应, 复合反应使葡萄糖分子间经1 , 6 糖苷键结合成异麦芽 糖、 龙胆二糖、 潘糖和其他低聚糖, 分解反应使葡萄糖分解 为其他非糖副产物 。 2 1 2 微波辐射蕉藕粉酸水解糖化法 称 取 4 0 0 g 蕉 藕 粉 5 份 , 分 别 加 入 3 0 0 0 mL 0 1 mo l L H C I 溶 液 中 , 振 荡 使 其 分 散 均 匀 , 置 微 波 消 解 仪 中 , 于 2 4 5 0 MH z 、 8 0 0 W、 9 5 、 2 a t m条件 下分 别加热 3 mi n 、 4 mi n 、 5 mi n 、 6 mi n 、 7 mi n 、 8 mi n , 取 出后冷却, 抽滤, 然后移取 1 0 mL 水 解液用 0 1 mo l L Na O H溶液 调p H 值 为 7 0 , 加水定容至 1 0 0 mL , 测葡萄糖收率, 结果见表2 。 表2 微波辐射时间对蕉藕粉水解的影响 Ta ble 2 Effe c t o f micr o wa v e i r r a diat ion t i me 0 1 3 t h e h y dr o l y s is o f Ca nn a e du l is s t a r c h 时间 mi n 3 4 5 6 7 8 葡萄糖收率 3 1 8 3 4 5 9 7 5 5 7 1 7 6 8 2 9 5 0 l 7 8 2 1 由表2 可知, 随着反应时间的延长, 葡萄糖收率先上升 后下降。加热至7 mi n 时, 葡萄糖收率达到最大值。试验数 据表 明 , 同样用0 1 mo l L H C 1 水解4 0 0 g 蕉藕 粉 , 微波 条件 下反应5 mi n 就能达到传统加热3 h 时的产糖率。7 mi n 时, 葡 萄糖的收率增至9 5 0 1 , 蕉藕淀粉几乎全部水解, 远远高 于传 统加热 的最 高收率 。 由微波法与传统加热法对比可知, 微波辐射时间是传 2 0 1 0 N0 。 1 0 4 6 S e r i a l N o 2 2 3 Ch i n a Br e wi n g R e s e a r c h Re p o r t 统 加热 的7 1 8 0 , 但 葡萄糖的收率提高 了近2 倍 。方面这 是由于微波有较强的穿透能力, 使温度迅速提升, 而且微 波能够使物料产生“ 过热现象” , 增加分子活性; 另一方面, 微波能加剧极性分子的运动, 使反应物分子的碰撞频率 大 大增加 , 从而使 整个 水解 反应 得 以在 极短 的 时间 内迅 速 完成 。 2 - 2微 波辐射功率的影响 称取4 0 0 g 蕉 藕粉5 份 , 分 别加入3 0 0 mL 0 I m o V L H C 1 溶液中, 振荡使其分散均匀 , 置微波消解仪 中, 于2 4 5 0 MH z 、 2 a r m、 9 5 条件下 , 分别在6 0 0 W、 7 0 0 W、 8 0 0 W、 9 0 0 W、 1 0 0 0 W 加 热5 mi n , 取出后冷却、 抽滤 , 然 后移 取1 0 0 0 mL 水解液用 0 1 mo l L N a O H 调 p H 值 为7 0 , 加水定容至 1 0 0 mL , 测其葡 萄糖收率, 结果见表3 。 表3 微波辐射功率对蕉藕粉水解的影响 Ta ble 3 Effe c t o f mic r o wa v e i r r a dia t ion p o we r on t h e h y dr oly s i s o f Can n a e du l is s t a r c h 由表3 可知, 随微波功率的增大, 葡萄糖收率先增加后 减少 。其 原因可 能是微波辐射功率较低 时, 对低聚糖的水 解作用也较弱, 葡萄糖的收率会随着微波功率的增大而增 大; 而微波功率过高时, 则容易使中间产物低聚糖直接降 解生成副产物, 同时还加速了葡萄糖的分解, 所以葡萄糖 的收率也 随之降低 。 2 - 3微波条件下不同酸浓度对葡萄糖收率的影响 称取4 0 g 蕉藕粉5 份, 分别加入3 0 0 n 1 L 浓度为0 0 5 mo l L 、 0 1 O m o l L 、 0 1 5 mo l L 、 0 2 0 mo l L 、 0 2 5 mo l L 的H C I 溶液 中 , 振荡使其分散均匀, 置微波消解仪 中于2 4 5 0 MH z 、 8 0 0 W、 9 5 o C 、 2 a r m条件 下加热5 mi n , 取 出后冷 却、 抽滤 , 然 后移取 l O mL 水解液用0 1 mo l L N a O H调p H值为7 0 , 加 水定容至 l O O mL , 测葡萄糖收率, 结果见表4 。 表4 微波条件下酸浓度对蕉藕粉水解的影响 Ta ble 4 Effe c t of ac id c o n c en t r a t i o n o n t h e h y dr o l y s is of Can n a e du li s s t ar c h un d er mi c r owav e ir rad i a t i o n HC I 浓度 ( mo l L ) O 0 5 0 1 0 0 1 5 0 2 O 5 86 6 O 2 5 4 5 6 8 葡萄糖收率 1 8 5 3 5 5 4 7 8 0 5 O 由表4 可知, 在微波辐射条件 下盐酸浓度对 反应 葡萄 糖 收率 的影响很大 。盐酸浓度较低 时, 随浓度增加 , 反应 速度 加快 , 葡 萄糖 收率提 高: 当浓度 超过0 1 5 mo l L 时 , 葡 萄糖收率又开始下降。这是因为淀粉水解是酸催化反应, 酸浓度越大反应速度越快 。但当盐酸浓度达 到一定值后 , 葡萄糖收率反而下降, 这是由于随着反应的进行, 水解生 成 的葡萄 糖又 受 酸的 催化 作用 发 生 复合 反应 和 分解 反 应 , 使收率下降。因此盐酸最佳浓度为0 1 5 mo F L 。 2 4微波条件下无机盐对蕉藕淀粉酸水解糖化的影响 表5 微波条件下无机盐对蕉藕酸水解的影响 Ta ble 5 Effe c t of i n or g an i c s alt s on t h e h y droly s i s o f Can n a e du l is s t ar ch un d er mic r o wa v e i r r a d i a t ion 微波能在溶液介质中转换的机理主要有偶极子极化 和离 子传 导 , 介质 中大量 离子的存在可增 加传导率、 加 强 能量损耗 , 产生过热现象 , 从而加快反应的速度 。试验选 用N a C I 、 KC 1 、 Mg C 1 2 、 C a C1 2 、 B a C I 2 、 A 1 C1 3 、 F e C 1 3 无机盐考 察对蕉藕淀粉酸水解的影响, 结果发现不 同种类无机盐对 加速 反应速 率的作用程度 也不相 同。其他 反应 条件相 同 时 ( 0 1 5 mo l L 盐 酸 3 0 mL、 4 0 0 g 蕉 藕 粉 、 2 4 5 0 MHz 、 2 a t m、 8 0 0 W、 9 5 、 微波辐 照 时问5 m i n ) , 加 入5 0 0 m L 无机 盐 , 反 应总体积3 5 mL 的进行反应 , 试验结 果见表5 。微波辐射条 件 下 , Na C 1 、 KC I 、 Mg C I 2 、 C a C I 2 、 B a C I 2 、 F e C 1 3 能促进 蕉藕 粉 的酸水解 ( 反应速度快、 葡萄糖收率高) , 空白组在水解反 应7 mi n 时葡萄糖 收率达 到最 高, 为8 5 8 1 , F e C I 在3 mi n l 就使 葡萄糖 收率达 到9 5 9 3 , 其 他的都 在4 m i n 时葡 萄糖 收率达到最高。其中B a C I 的添加效果最好, 葡萄糖的收 率为 1 0 0 0 4。 3结论 在微波辐射功率为8 0 0 W, 温度为9 5 , 盐酸浓度为 0 1 mo l L 的条 件下 , 反 应7 mi n 时水 解液 中葡 萄 糖收 率达 到最大值9 5 0 1 。 当添) J I B a C I 时效 果最好 , 反应4 mi n 葡萄 糖收率为 1 0 0 0 4 。微 波辐射方式和传 统加热工艺相 比, 具有反应速度快、 副反应少、 葡萄糖收率高优点。 参考文献: 【 1 黄立 新, 周 俊侠 , 张 力 田 芭 蕉芋 淀粉 的研 究【 J 】 食品 与发酵工业 , 1 9 9 4( 3 ): 21 2 5 【 2 】 周 正邦 贵州 芭 蕉 芋发 展现 状 及潜 力 分 析【 J 】 _ 贵州农业科 学, 2 0 0 9 ( 2 ): 1 3 6 1 3 7 【 3 】 朱作华 , 吴天祥 芭蕉芋的性质及其淀 粉的工业应用研 究【 J 生物 加 工过程 , 2 0 0 5 , 3 ( 4 ) : 6 6 7 0 4 张力田 发展淀粉制糖工业 J 食品与发酵工业, 1 9 9 2 ( 1 ) : 6 3 - 6 8 【 5 】 陆 模 文 , 胡 文 祥 , 恽 榴 红 有 机微 波 化 学研 究 进 展 J 有机 化学 , 1 9 9 5, l 5: 5 61 5 66 f 6 朱坚 , 许立群 微波 消解 技术在元素分 析中的应用 【 J 石油化工 高 研究报告 中 国 酿造 2 0 1 0 年第1 0 期 总第2 2 3期 47 放线茵3 2 7 # 的发酵培养基筛选及培养条件优化 王小琴1 , 龚斌1 , 朱薇玲 , 缪礼鸿 2 ( 1 武汉工业学院 生物与制药工程学院, 湖北 武汉 4 3 0 0 2 3 ; 2 武汉工业学院 省级生物学实验教学示范中心, 湖北 武汉 4 3 0 0 2 3 ) 摘要: 为使放线菌3 2 7 嘬 大限度地生产拈抗物质 , 在摇瓶试验中采用单因素和正交试验对其发酵培养基进行优化。同时考察了培 养温度、 初始p H值、 发酵液装量对放线菌3 2 7 生产拮抗物质的影响 。得到 了最佳培养基配方为: 大豆粉0 5 , 硫酸铵 1 5 , 葡萄糖 2 5 , 氯化钠 0 6 , 碳酸钙0 6 。 最佳发酵条件为培养温度3 0 , 初始p H 值7 0 , 发酵液装量为2 5 0 r n L 摇瓶装1 5 m L 。培养时间3 d 时, 发 酵液中拮抗物质达到最高水平, 对青霉的抑菌圈直径达( 2 2 4 + 0 4 ) n 瑚 。 关键词 : 放线菌3 2 7 ; 发酵培养基; 发酵条件 ; 拮抗物质 中图分类号: Q 9 3 3 3 5 文献标识码 : A 文章编号: 0 2 5 4 5 0 7 1 ( 2 0 1 0 ) 1 0 0 0 4 7 - 0 3 Op t i mi T a t i o no f c u l t u r eme d i u m a n df e r m e n t a t i o nc o n d i t i o n sf o r t h ep r o d u c t i o n o f a n t a g o n i s t i c s u b s t a n c e s b yAc t in o my c e t e s3 2 W ANG Xi a o q i n , GONG Bi n , Z HU W e i l ing 斗 , M I AO L i h o n g Co l l e g eo f Bi o t e c h n o l o g ya n dP h a r ma c e u t i c a l E n g i n e e nn g ,Wu h a nP o l y t e c h n i c Un i v e r s i t y , a n 4 3 0 0 2 3 , C h in a ; 2 Hu b e i E x p e ri me n t a l T e a c h i n gDe mo n s t r a t i o n C e n t e r o f B i o l o g y , Wu h a nP o l y t e c h n i c U n i v e r s i Wu h a n 4 3 0 0 2 3 , C h i n a ) Abs t r a c t :The c u l t u r e me d i u m a n d f e r me n t a tio n c o nd i tio n s we r e i n v e s t i g a t e d f o r i mpr o v i n g t h e p r o d uc tio n of a n tag on i s tic s u bs t a nc e s b y Ac t i no myc e t e s 3 2 7 i n s h a k i n g fla s k s By s i ng l e f a c t 0 r an d o r t h og o n a l e x p e rime nt t he o p t ima l f e rm e n tat i o n me di um of 3 2 7 we r e ob tai n e d a s f o l l o ws : s o y b e an fl o u r 0 5 ,( NH4 ) 2 S O, 1 5 , g l u c o s e 2 5 , Na C 1 O 6 , C a C O3 0 6 T h e o p t i ma l f e rm e n t a ti o n c o n d i t i o n s we r e a s f o l l o ws : c u l t u r e t e mp e r a tur e 3 0 , i n i ti a l p H 7 0 , c u l tur e v o l u me 1 5 ml i n 2 5 0 mL s h a k i n g fl a s k Un d e r t h e s e c o n d i ti o n s ,the i n h i b i t i o n z o n e d i a me t e r o f 3 2 7 f e r me n tat i o n fil t r a t e r e a c h e d 22 4 0 4 n l i 1 o n the t e s t pl a t e s of Pe n i c i l l i u m a f t e r 3 d i n c u b a tio n Ke y wo r d s : Ac ti n o my c e t e s 3 2 7 ; c ul t u r e me d i um ;f e r me n tat i o n c o nd i t i o ns ; an t a g o ni s t i c s u b s t a nc e s

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