未成熟网织红临床应用.ppt

未成熟网织红细胞指数 的临床应用,温州医学院附属第一医院,一、概 念,未成熟网织红细胞指数： （immature reticulocyte fraction，IRF） 是指幼稚的或未成熟的网织红细胞 （即含高RNA的网织红细胞） 与总的网织红细胞的比值。,二、检 测 原 理,未成熟网织红细胞的 噻唑橙、碱性槐黄荧光染料 荧光强度 新亚甲蓝、嗪750 光散射 未成熟网织红细胞显示出极亮的荧光强度 或/和较强的光散射特征。,三、检测IRF的仪器概况,1.Sysmex XE2100血细胞分析仪 R3000网织红细胞分析仪,碱性槐黄荧光染料 前向角散射光 侧向荧光 将Ret分为 低荧光强度Ret -LFR 中荧光强度Ret -MFR 高荧光强度Ret -HFR IRF HFR+MFR,激光束,强度,2. ABXPENTRA120网织红细胞分析仪,噻唑橙荧光染料 RNA 微孔 细胞阻抗信号 体积 激光束 垂直荧光 结构 将Ret分为 低RNA含量-Ret L 中RNA含量-Ret M 高RNA含量-Ret H IRF Ret M+Ret H,3.拜尔 DVIA120血细胞分析仪,染料嗪 750 RNA 低角光散射 大小 高角光散射 血红蛋白浓度 光吸收信号 RNA含量,固体激光二极管,4.雅培 CELL-DYN3700血细胞分析仪,新亚甲蓝 RNA 0光散射 排除血小板 10光散射 测定RBC和Ret 90光散射 测定Ret IRF 90光散射强度,氦氖激光,5.库尔特血细胞分析仪,新亚甲蓝染料 电阻法 细胞体积 高频传导技术 细胞内部信息 激光散射光 细胞表面及颗粒特征 高光散射区域数/总区域,技术,四、IRF 的 临 床 应 用,（一）骨髓移植的监测作用 认为IRF与绝对中性粒细胞计数(ANC)的变化趋势极为一致,并对恢复骨髓活性的反应超过了ANC。 （临床或亚临床感染时能够引起ANC受抑） IRF较移植前增加20%提示骨髓红系植活。 与Ret比较提前了一半时间。,(二)、贫血诊治的观察价值,1. EPO对肾性贫血治疗过程中的应用 发现Ret和IRF在2后明显增高, 而其它红细胞参数在早期尚未检出其疗效反应。 2.在肾移植过程中的应用 当IRF在移植后升高25%以上时,较网织红细胞绝对数平均早上升7, 认为IRF是肾移植后红系生成最敏感的早期标志物。,3. IRF和Ret在一般性贫血中的应用,临床诊断 Ret IRF AA 低 低 HA 高 高 叶酸或VitB12缺乏 低/正常 高 地中海贫血 正常/高 正常/高 铁缺乏 低/正常 高 慢性疾病 低/正常 正常 骨髓再生 低 高/正常 增生减低性贫血 低 低 失血/缺氧 正常/高 高,五、对IRF在肾移植过程中 的变化及意义的探讨,(一）目的 探讨肾移植手术后未成熟网织红细胞指数（IRF）的变化规律及临床意义。,（二）标 本 的 来 源,正常对照组 50例我院健康体检者 各种患者组 32例肾移植患者 （手术前、手术后3天、7天、 14天、21天、28天和56天 不同时间段的标本）,（三）标 本 的 采 集,1. 采血1mL+ 15l 15%EDTA-K2 充分混匀，并在2小时内测定完毕。 2. 采血2mL于空白试管中，分离血清。,（四）测 定 方 法,1、EDTA-K2抗凝血 在GEN-S血细胞分析仪上 测定IRF、Ret%、RBC、Hgb ，采用配套试剂。 2、血清标本于日立7600生化分析仪上 测定Cr和BUN,（五）统 计 学 处 理,均数标准差(s) 组内比较采用配对t检验 两组间比较采用两样本均数t检验 变量间的变化采用相关分析法,（六） 结 果,表 肾移植手术前、后不同时间段IRF、Ret%、RBC、Hgb、Cr和BUN变化及与对照组的比较(xs) 组别 例数 IRF Ret% RBC Hgb Cr BUN (1012/L) (g/L) （mmol/L） （mmol/L） 对照组 50 0.2590.066 0.0120.004 4.630.42 141.411.3 90.06.8 5.961.55 手术前 32 0.2280.079 0.0160.009 3.020.75 88.821.2 640.9259.6 19.937.45 术后3天 32 0.2750.060 0.0150.007 3.170.58 93.117.9 243.6123.9 12.914.63 术后7天 32 0.3450.0960.0130.008 3.180.52 91.815.5 273.0285.3 13.626.80 术后14天 32 0.3080.1180.0160.009 3.070.48 88.814.6 194.0149.4 13.668.11 术后21天 32 0.3040.1320.0230.0112.930.55 86.117.4 181.6158.5 12.467.91 术后28天 32 0.2590.050 0.0250.0073.040.56 89.717.4 151.3124.4 10.775.01 术后56天 32 0.3110.0790.0210.0093.640.61112.618.2108.123.9 8.812.10 注：与对照组比较P0.05 , P0.01；与手术前比较P0.05 , P0.01。,IRF在移植后第3天就出现升高，第7天达到高峰 Ret%在移植后第21天才高于移植前 RBC和Hgb在第56天时显著高于移植前 IRF的变化与Cr、BUN的量存有一定的负相关性,表中显示,IRF是一个对于有足够骨髓储存的病人 1-3天内轻微的红血球改变就能提供明显的证据 IRF的升高是预期肾移植成功 重要的早期敏感的指标 IRF是衡量肾移植成功和肾功能 得到改善的一个很好的指标。,（七）结 论,六、未成熟网织红细胞在实验性苯中毒中的变化,（一）目的,探讨慢性苯中毒时未成熟网织红细胞指数（IRF）的变化规律。,1、实验方法,实验动物：小鼠 分为对照组和实验组两组资料,对照组（A）,玉米油2ml/kg,实验组（B）,苯+玉米油2ml/kg,每周3次，按注射次数不同分为 15次、18次、21次、24次,（二）方法,2、标本采集及要求,眶动脉血0.5ml,6ul.15%EDTA-K2,3、测定指标及方法,WBC RBC HB PLT RET% IRF MRV,血细胞分析仪,4、统计分析,各组数据以均数标准差表示,实验组与相应对照组测定指标 比较采用两样本均数t检验,变量间的变化采用相关分析法,（三）结果,WBC和IRF下降的幅度最明显且时间也最早,WBC,IRF,Ret%,Plt,RBC,Hgb,MRV,1、苯中毒临床特点： 造血系统异常是慢性苯中毒的主要特征之一， 早期中毒以白细胞波动，持续降低为主， 以后有血小板减少，最后出现红细胞减少。 2、本研究显示 小鼠模型符合慢性苯中毒的变化规律。