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文档简介

实验二、食品中维生素C测定,一、实验目的掌握滴定法和比色法测定维生素C的原理；熟悉操作方法。（一）还原维生素C测定（二氯酚靛酚滴定法）实验原理二氯靛酚染料在酸性溶液中呈红色，被维生素C还原后红色消失。一定量的样品提取液还原标准染料的量与样品中维生素C的量成正比。,2.实验器材组织捣碎机。5.0ml微量滴定管。100ml容量瓶。50ml具塞量筒。3.实验试剂1%、2%草酸溶液。白陶土。标定好的二氯靛酚溶液。,4.操作步骤样品处理：洗净剪碎，称取100g，放入捣碎机；按11加入2%草酸制成匀浆。称取匀浆液10g，用50ml具塞量筒以1%草酸定容。取约20ml上清倒入100ml锥形瓶，加白陶土一勺。同时用1%草酸20ml加陶土一勺，作为空白。取上清液过滤，取滤液5ml，以标定的二氯酚靛酚滴定至溶液呈淡红色，纪录用量。还原型Vc的计算：,还原型Vc（mg/100g）=100（V1-V0）T/WV0滴定空白耗用染料的量（ml）。V1滴定样品耗用染料的量（ml）。W样品质量（g）。T单位体积（ml）的染料相当于维生素C的量（mg）。思考题：还原型抗坏血酸还原染料后，本身变成什么物质？为什么整个操作过程要迅速，样品要浸泡在2%草酸溶液中？滴定时以15秒粉红色不褪为终点，不足或多于15秒会如何？,（二）总抗坏血酸测定（二硝基苯肼法）实验原理用酸处理过的活性炭把还原型Vc全部氧化成二酮古洛糖酸，它与二硝基苯肼作用生成红色的脎，脎的生成量与Vc总量成正比。2.实验器材组织捣碎机。恒温水浴锅。721分光光度计。,100ml容量瓶。刻度吸管。100ml锥形瓶。3.实验试剂85%硫酸溶液（水）。2%2,4-二硝基苯肼（硫酸）。2%、1%草酸溶液。10%硫尿溶液（乙醇）。活性炭（用盐酸处理）。标准维生素C应用液（100g/ml）。,4.操作步骤样品提取：称取匀浆4g加1%草酸稀释后倒入100ml容量瓶，并以1%草酸冲洗烧杯并入容量瓶稀释至刻度，过滤。氧化：样品取滤液约25ml置100ml锥形瓶中，加活性炭0.5g振摇30s后过滤，取滤液10ml，加1%草酸10ml混匀。.标样制备:取标准VC应用液约25ml于100ml锥形瓶中，加活性炭0.5g振摇60s后过滤,取滤液10ml于100ml容量瓶中，加1%草酸定容.脎的生成：,脎的生成,脎的溶解：各管置冰浴中缓慢加入85%硫酸2.5ml,边加边振摇。取出试管，室温下放置30分钟于490nm波长下比色，以A管调零，测各管的光密度。绘制标准曲线：以光密度为纵坐标，维生素C为横坐标绘制标准曲线。计算：样品总维生素C含量(mg/100g)=
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