（植物病理学专业论文）黄瓜藤抗菌化合物的初步研究.pdf

中国农业夫学硕i 学f ，论文中文摘璎 中文摘要 黄瓜( c u c u m i ss a t i v u sl ) 是葫芦科( c u c u r b i t a c e a e ) 黄瓜属植物，我国各地_ i 孚遍栽培，且 许多地区均有温室或塑料人棚栽培，现j 泛种植丁- 温带和热带地区，为我国各地夏季主要菜蔬之 一。黄瓜藤可供药用，能消炎、祛痰、镇痉。据本草纲目记载，黄瓜藤具有扩张血管，降低 血压的药效，但是黄瓜藤抗菌活性成分的研究尚未见报道。本文采用抗菌活性追踪的分离方法， 对黄瓜藤的化学成分进行了初步的研究，结果如下： l 、对黄瓜藤的甲醇提取物，氯仿萃取部分，正丁醇萃取部分和水层部分进行了抗菌活性测 定发现氯仿萃取部分和正丁醇萃取部分的抗菌活性强于其他部分，推测黄瓜藤抗菌活性成分主 要为极性中等或较大的化合物，存在于氯仿萃取部分和正丁醇萃取部分。 2 、通过硅胶柱层析，s e p h a d e xl h 2 0 柱层析，结晶与重结晶等技术，从黄瓜藤的活性部位 氯仿萃取部分分离纯化得到了1 2 个化合物，运用h - n m r 、。 c - n m r 、m s 等波谱技术，鉴定了 其中9 个化台物，分别为* 菠甾醇( a - s p i n a s t e r 0 1 ) ( 1 ) 、m 菠瑙醇一3 o 卢n 葡萄糖苷( a - s p i n a s t - e m l3 旬卢d - g l u c o p y r a n o s i d e ) ( 2 ) ，卢谷甾醇( p s i t o s t e r 0 1 ) ( 3 ) 、豆甾7 烯3 o 争d 葡萄糖苷 ( s t i g m a s t - 7 - e n 3 - o 争d - g l u c o w r a n o s i d e ) ( 4 ) ，2 2 一亚甲基- 9 ，1 9 环羊毛甾烷- 涉醇( 2 2 - m e t h y l e n e - 9 , 1 9 - c y c l o l a n o s t a n 3 鼬1 ) ( 5 ) 、( 2 s 3 8 , 4 r , l o e ) - 2 ( 2 ，3 二羟基二十四烷酰氨基) 1 0 - 十八烯一l ，3 ， 4 三醇【( 2 5 , 3 s , 4 r , i o e ) - 2 - ( 2 , 3 - d i h y d r o x y t e t r a c o s a n o y l a m i n o ) - 1 0 - o c t a d e c e n e 1 , 3 ，4 - t r i o l 】( 6 ) 、( 蕊 3 s , 4 r , i o e ) - 2 - 【( 2 尺) - 2 - 羟基二十四烷酰氮基卜l o - 十八烯一1 ，3 ，4 - 三醇【( 2 s , z s , 4 r d o e ) - 2 - 【( 2 固- 2 一h y d r o x y t e t r a c o s a n o y l a m i n o 1 0 - o c t a d c w , e n e l ，3 ，蜥i o l 】( 7 ) 、( 2 s , 3 s , 4 r , i o e ) 1 - ( p d - 葡萄糖苷) - 2 【( 2 r ) - 2 一羟基二十四炕酰氮基】_ l o 十八烯- l ，3 ，4 - 二醇【( 2 s , 3 s , 4 r d o e ) - i 妒- d g l u c o w r a n o s y l ) - 2 一【( 2 r ) - 2 一h y d r o x y t e t r a e o s a n o y l a m i n o l o - o c t a d e c e n e l ，3 ，4 一t r i o l 】( 8 ) 、大豆脑苷( s o y a - c e r e b r o s i d ei ) ( 9 ) 。其中化合物l - 4 为甾体类化合物，5 为三萜类化合物，6 - 9 为鞘脂类化合物。除了化 合物3 之外，其他的化合物均为首次从该植物中分离得到。 3 、抗菌活性测定结果表明化合物2 、3 、7 、8 和9 在浓度为1 0 0p g m l 时对番茄灰霉的菌丝抑 制率高于同等浓度下的多菌灵的抑制率；化台物3 ，7 和8 对瓜果腐霉的抑制率分别为5 6 2 2 、 4 6 6 1 和1 0 0 0 0 。化合物7 、8 1 1 9 都有较强的抗细卣活性，化合物7 对溶血葡萄球菌的抑制中浓 度( i c ) 为1 6 9 p g m l ，化合物8 对需茄疮痂病菌的l c 为1 7 4 p g m l 。 以上研究表明，黄瓜藤抗菌活性成分主要为极性中等和极性较人的化合物，鞘脂类化合物表 现出较强的抗菌活性，可能是黄瓜藤中主要抗菌活性成分之一。本研究首次对黄瓜藤的抗菌活性 成分进行研究，研究结果同时也为葫芦科植物的化学分类学提供一定的依据。 关键词：葫芦科；黄瓜藤：鞘脂；抗菌化合物；植物病原菌；抗菌活性测定 中田农廿人。半劬卜学仃论正a b q t r a c t a b s t r a c t c u c u m i ss a t i v u sl ，w h i c hb e l o n g st oc u c u r b i t a c e a e ，i sn o ww i d e l yp l a n t e di nt h et e m p e r a t ea n d t r o p i c a lz o n e s ，i n c l u d i n ga l lo v e rt h ed i s t r i c t si nc h i n a i ti so n eo ft h em o s ti m p o r t a n tv e g e t a b l e si n s u m m e r ，a n dt h es t e mh a v eb e e nf o u n dt os h o wa n t i i n f l a m m a t i o na c t i v i t y a c c o r d i n gt ot h eb o o k b e n c a n g a n gm u e d i t e db ys h i z h e nl io fm i n gd a n a s t yo fa n c i e n tc h i n a 7 , c u c u m b e rs t e mc a l le x p a n d b l o o dv e s s e la n dr e d u c eb l o o dp r e s s u r e h o w e v e r , v e r yl i t t l ei sk n o w na b o u ti t sa n t i m i c r o b i a l c o n s t i t u e n t sf r o mt h es t e m b yb i o a s s a y - g u i d e ds e p a r a t i o n ，t h er e s u l t so f t h es t u d yo nt h ea n t i m i c r o b i a l c o m p o u n d sf r o mc s a t i v u ss t e m sw e r er e p o r t e di nt h i st h e s i s 1 w i t ha n t i m i c r o b i a la c t i v i t yb i o a s s a y , b o t hc h l o r o f o r ma n dn - b u t a n o lf r a c t i o n so b t a i n e df r o mt h e m e t h a n o le x t r a c to f cs a t i v u ss t e m sw e r es c r e e n e df o rt l e i rs t r o n g e ra n t i m i c r o b i a la c t i v i t i e st h a no t h e r f r a c t i o n s t h er e s u l t sr e v e a l e dt h a tm a i na n t i m i c r o b i a lc o m p o n e n t so f cs a t k ws t e m sc o u l db e m i d d l e o rb i gp o l a rc o m p o u n d s 2 b yb i o a s s a y - g u i d e ds e p a r a t i o n ，t w e l v ec o m p o u n d sw e r ei s o l a t e da n dp u r i f i e db yc o l u m n c h r o m a t o g r a p h yo ns i l i c ag e la n ds e p h a d e xl h - 2 0f r o mt h ec h l o r o f o r mf r a c t i o n b a s e do nt h es p e c t r u m a n a l y s i so ft h e i r h - n m i l ”c - n m ra n dm sd a m s ，s t r u c t u r e so fn i n ec o m p o u n d sw e r ei d e n t i f i e d ， r e s p o e t i v e l y a - s p i n a s t e r o l ( 1 ) ，a 6 p i n a s t e m l3 - o - # - d - 舀u c o p y r a n o s i d e ( 2 ) f l - s i t o s t e r o l ( 3 ) s t i g m a s t - 7 - e n - 3 一o d - g l u c o p y r a n o s i d e ( 4 ) ，2 2 - m e t h y l e n e 一9 ，1 9 - c y c l o l a n o s t a n - 3 踟l ( 5 ) ，( 2 8 , 3 s , 4 k i o e ) - 2 ( 2 ，3 - d i h y d r o x y t e t r a c o s a n o y l a m i n o ) - 1 0 - o e t a d e c e n e - i ，3 , 4 一t r i o l( 6 ) ， ( 2 s , 3 s , 4 r l o e ) - 2 【( 2 固一 2 - h y d r o x y t e t r a c o s e n o y l a m i n o - 1 0 - o c t a d e c e n e - i ，3 ，4 - t f i o l ( 7 ) ，( 2 s 3 s , 4 9 w 匠3 - 1 ( 争d - g l u c o p y r a n o s y l ) - 2 - ( 2 固- 2 - h y d r o x y t e t r a c o s a n o y l a m i n o - 1 0 - o e t a d e c e n e 1 ，3 , 4 一t r i o l ( 3 ) s o y a - e e r e b r o s i d ei ( 9 ) o f t h e m ， c o m p o u n d s1 t o4a r es t e r o i d s , c o m p o u n d5b e l o n g st ot r i t e r p e n o i d s ，c o m p o u n d s6t o9a r e s p h i n g o l i p i d s b yl i t e r a t u r es t u d y ，e x c e p tf o rc o m p o u n d3 ，t h eo t h e r sw e r ei s o l a t e df r o mt h i sp l a n tf o r t h ef i r s tt i m e 3 t h ec o m p o u n d sw e r es c r e e n e df o rt h e i ra n t i m i c o r b i a la c t i v i t i e s t h er e s u l t si n d i c a t e dt h a t m y c e l i a lg r o w t hi n h i b i t o r yr a t e so f c o m p o u n d s2 、3 ，7 、8a n d9w e r eh i g h e rt h a nc a r b e n d a z i ma tt h e 1 0 0p g m lc o n c e n t r a t i o ni nm e d i u ma g a i n s tb o t r y t i sc i n e m a , a n dt h ei n h i b i t o r yr a t e so f c o m p o u n d s3 、 7a n d8o np y t h i u ma p h a n i d e r m a t u mw e r e5 6 2 2 、4 6 6 1 a n d1 0 0 0 0 ，r e s p e c t i v e l y a n t i b a c t e r i a l a c t i v i t i e so fc o m p o u n d s7 、8a n d9w e r es t r o n g e r , t h e5 0 i n h i b i t o r yc o n c e n t r a t i o nv a l u e s ( i c s o ) o f c o m p o u n d7a g a i n s ts t a p h y l o c o c c u sh a e m o l y t i c u sw a s1 6 9p g m l a n di c s 0o f c o m p o u n d8a g a i n s t x a n t h o m o n a sv e s i c a t o r i aw a s17 4p g m l t h e s er e s u l t si n d i c a t e dt h a tt h ea n t i m i c r o b i a lc o m p o n e n t so fcs a t i v u ss t e m sc o u l db em i d d l eo r b i gp o l a rc o m p o u n d s t h es p h i n g o l i p i ds h o w e ds t r o n g e ra n t i m i c r o b i a la c t i v i t i e s ，c o u l db eo n eo ft h e m a i n l ya n t i m i c r o b i a lc o m p o u n d si nt h es t e m s t u d i e so na n t i m i c r o b i a lc o m p o u n d sf r o mc s a t i v u s s t e m sw o u l db e n e f i tf o ru n d e r s t a n d i n ga n t i m i c r o b i a la c t i v i t i e so fs t e r n sa sw e l la sf o rt h es t u d yo f c u c u r b i t a c e a ec h e m o t a x o n o m y ， k e yw o r d s ：c u c u r b i t a e e a e ；c u c u m 括s a t i v u sl s p h i n g o l i p i d ；a n t i m i c r o b i a lc o m p o u n d ；p a t h o g e n i c f u n g ia n db a c t e r i a ；a n t i m i c r o b i a la c t i v i t ys c r e e n i n g 中国农业大学硕t 学化论文蚓索- j i 图索引 i 茎i1 i 葫芦科中二萜类化合物的结构 图1 2 葫芦科中黄酮类化合物的结构 4 图l f 3 葫芦科中甾体类化合物的结构6 图1 4 葫芦科中术脂索类化合物的结构 图i - 5 葫芦科中酚酸类化合物的结构 图1 6 葫芦科中鞘醇化合物的结构 圈i - 8 黄瓜中化合物的结构 1 6 图2 - i 接种菌量( c f u i m l ) 与光吸收值d d 5 ，o 。之间的关系2 2 图2 - 2 加药时间对抑制率的影响 图2 - 3m t r 浓度与f o r m a z a n c 生成量的关系2 3 图3 1 黄瓜藤提取扬或不同极性葶取部分的制备流程图 图3 - 2 黄瓜藤甲醇提取物及不同极性溶剂萃取部分对枯草芽孢轩菌生长的抑制作_ l | i 3 2 图3 - 3 黄瓜藤甲醇提取物及不同极性溶剂萃取部分对黄瓜角斑病菌生长的抑制作用3 2 图3 4 黄瓜藤甲醇提取物及不同极性溶剂葶取部分对溶血葡萄球菌生长的抑制作用3 3 图3 - 5 黄瓜藤甲酵提取物及不同极性溶剂萃取物对小麦赤霉病菌生长的抑制作用3 5 图3 - 6 黄瓜藤甲醇提取物及不同极性溶剂萃取物对瓜果腐霉生长的抑制作用：3 5 图3 7 黄瓜藤甲醇提取物及不同极性溶剂萃取物对番茄萎蔫病菌生长的抑制作用3 6 图4 1 氯仿萃取部分化合物分离纯化流程图 图4 - 2 * 菠甾酵( 1 ) 的结构式 图4 - 3 菠甾醇- 3 旬j 争d - 葡萄糖苷( 2 ) 的结构式 图4 4 卢谷甾醇( 3 ) 的结构式 图4 - 5 豆甾7 一烯一3 o 庐d - 葡萄糖苷( 4 ) 的结构式 4 3 4 4 4 7 4 7 4 9 图4 6 2 2 - 亚甲基一9 ，1 9 环羊毛甾烷r 移醇( 5 ) 的结构式5 1 图t 7 ( 2 s , 3 s , 4 r , i o e ) - 2 ( 2 ，3 二羟基二十四烷酰氨基】1 0 十八烯- l 3 ，4 三醇( 6 ) 5 2 图舢8 ( 2 5 , 3 8 , 4 r , l o e ) - 2 【( 2 r ) 2 一羟基二十四烷酰氨基1 - l o 十八烯1 ，3 ，4 一三醇( 7 ) 5 3 图4 9 ( 2 s , 3 s , 4 r i o e ) l 一( 争d 一葡萄糖苷) - 2 一【( 2 月) 一2 一羟基二二十四烷酰氨基】一l o - 十八 烯1 ，3 ，4 - 三醇( 8 ) ，5 5 图4 1 0 人豆脑苷( 9 ) 的结构式5 6 图4 1 1 单体化合物对乔茄灰霉生长的抑制作h 5 9 图4 1 2 单体化合物对杨树溃疡病菌生长的抑制作用5 9 图4 一1 3 单体化合物对小麦赤霉病菌生跃的抑制作用 图4 - 1 4 化合物7 对溶血葡萄球菌的毒力方程6 2 图4 - 1 5 化合物8 对番茄疮痂病i 纂的毒力方程6 3 图5 1 黄瓜藤甲醇提取物与不同极性萃取物对植物病原真菌生长的影响。6 7 图5 - 2 化合物7 - 9 对植物病原真菌的抑制作用 图5 - 3 化合物7 - 9 对植物病原细菌的抑制作用 v 中同农廿尺学鲫卜芊伊论艾表索r j v l 表索弓 表1 - l 具有抗曲活性的葫芦科科f f f 物9 表2 一lh j 丁抗细菌活性测定的细菌菌株1 9 表2 2 硫酸链霉素的抑菌活性2 1 表2 3 监桉醇和小檗碱对细菌的抑制活性2 5 表3 2 黄瓜藤甲醇提取物及不同极性溶剂萃取部分对细菌生长的影响3 1 表3 3 黄瓜藤甲醇提取物及不同极性溶剂萃取物对植物病原真菌生长的影响3 4 表4 - 1 用于化合物抗菌活性测定的微生物3 8 表4 - 2 化台物l 的1 h n m r 和”c o n m r 数据4 5 表4 - 3 化合物2 的1 h n m r 和”c - n m r 数据4 6 表4 4 化合物4 的h - n m r 和”c - n m r 数据。4 8 表4 - 5 化合物5 的h - n m r 和”c - n m r 数据5 0 表4 6 化合物6 的1 h - n m r 和”c - n m r 数据5 l 表4 - 7 化合物7 的1 h - n m r 和1 3 c - n m r 数据 表4 - 8 化合物8 的1 h - n m r 和1 3 c - n m r 数据二5 4 表4 - 9 化合物9 的1 h - n m r 和1 3 c - n m r 数据5 6 表4 1 0 单体化合物对植物病原真菌生长的抑制作用。5 8 表4 - 11 化合杨对稻瘟菌孢子萌发的抑制奉。 表4 1 2 单体化合物对细菌的最低抑制浓度( m i c ) 6 1 表4 1 3 单体化合物对细曲的毒力同门方程和抑制中浓度0 c 5 0 ) 6 1 表4 - 1 4 化合物7 对溶血葡萄球菌的抑制作用。6 2 表4 1 5 化合物8 对番茄疮痂病菌的抑制作用一6 3 中罔农业人学衲l 学忙论文 a b b r e v i a t i o n a b b r e v i a t i o n c a r b o n 1 3n u c l e a r m a g n e t i cr e s o n a n c es p e c t r a c o l o n yf o r m i n gu n i t d o u b l e t d i s t o r t i o n l e s se n h a n c e m e n tb yp o l a r i z a t i o nw a n s f e r d m e t h y ls u l f o x i d c e l e c t r o ni m p a c ti o n i z a t i o nm a s ss p e c t r o m e t r y e l e c t r o s p r a yi o n i z a t i o nm a s ss p e c t r o m e t r y f a s ta t o mb o m b a r d m e n tm a 镕s p e c t r o m e t r y p r o t o nn u c l e a rm a g n e t i cr e s o n a n c es p e c t l a h u m a n i m m u n o d e f i c i e n c yv i r u s h j g hp e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y 5 0 i n h i b i t o r yc o n c e n t r a t i o n i n f r a r e ds 牟蛾m c o u p l i n gc o n s t a n t m u l t i p l e t m e l t i n gp o i n t m i n i m u mi n h i b i t o r yc o n c e n t r a t i o n m a s ss p e c t r u m 3 - ( 4 ，5 - d i m e t h y l t h i a z o l 一2 叫1 ) _ 2 ，5 - d i p e n y lt e r a z o l i u m b r o m i d e o a t 4 0 m a t oa g a rm e d i u m p o t a t od e x t r o s ea g a r q u a r t e t r a t eo f f l o w s i n g l e t r i p l e t 1 1 1 i nl a y e rc h r o m a t o g r a p h y u i t r a v i o l e t c h e r o i c a ls h i f t 碳1 3 核磁共振谱 菌落形成单位 双峰 无畸变极化转移增益法 二甲基亚砜 电子轰击电离质谱 电喷雾电离质谱 快速原子轰击质谱 核磁共振氢谱 艾滋病病毒 高效液相色谱 抑制中浓度 红外光谱 偶合常数 多重峰 熔点 最低抑制浓度 质谱 噻唑蓝 燕麦西红柿琼脂培养基 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 四重峰 比移值 单峰 三重峰 薄层色谱 紫外 化学位移 v l l 删。一一一一喂，。啡眦懈舯 吣叭。町。眦w。 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。尽我所知，除了文中特聂j j j h 以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书 而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示了谢意。 研究生签名：唐静 雨暂 时间：2 0 0 7 年6 月1 0 日 关于论文使用授权的说明 本人完全了解中国农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留 送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复 制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、 传播学位论文的全部或部分内容。 ( 保密的学位论文在解密后应遵守此协议) 研究生签名：唐静 导师签名：周立刚 蓠讶 闭参叫 时间：2 0 0 7 年6 月l o 同 时问：2 0 0 7 年6 月1 0 日 中国农业大学顾十学忙论丈第l 帝前苦 第1 章前言 1 1 葫芦科植物化学成分及其生物学活性研究进展 葫芦科( c u c u r b i t a c e a e ) 隶属葫芦目( c u c u r b i t a l e s ) ，由于其较突出的经济h j 途，而被学者所 注目。本科全世界约1 1 3 属8 0 0 余种，大多数分布于热带和亚热带，少数种类散布到温带。我国 有3 2 属1 5 4 种，3 5 变种，主要分布于西南部和南部，少数散布到北部( 中国植物志编辑委员会， 1 9 8 6 ) 该科植物中有一些种类之瓜果不仅可供观赏，作果蔬，而且有良好药用价值，如冬瓜 ( b e n i n c a s a h i s p i d a ( t h u n b ) c o g n ) 之果实有利水，消炎、清热解毒之功效；西瓜( c i t r u l l u s l a n a t u a ( t h u n b ) m a t s u m ) 之瓜瓤有清热解暑、除烦止渴、利尿之功效；南瓜( c u c u r b i t a m o s c h a t a ( d u c h 能l a m ) d u c h e x p o i r e t ) 根和果实有利湿热、通乳汁之功能，藤和种子有消炎止痛、解毒杀虫之 功效；苦瓜( m o m o r d i c a c h a r a n t i a l i n a ) 有清暑清热、明日、解毒之功；丝瓜( l “f a c y l i n d r i c a l ( l i n n ) r o e m ) 有清热、化痰、凉血、解毒之功效；葫芦( l a g e n a r i am c e r a r i a ( m o l i n a ) s t a n d l ) 之果实 幼嫩时可食用，成熟时外壳木质化，中空，可作各种容器，水瓢和玩具，亦可供药用，有利尿、 消肿、散结之功效；雪胆属( h e r a m e y ac o g n ) 之块茎可提取雪胆素或作药材；罗汉果( s i r a i t i a g r o s v e n o r i i ( s w i n g l e ) c j e f f e r y “l u e t z y z h a n g ) 有清热凉血，润肺止咳、润肠通便之功效；栝 楼( t r i c h o s a n t h e sk i r i l o w i im a x i m ) 之根( 天花粉) 有生津、止渴、降火，润燥、排脓、消肿之 功效，其果实( 栝楼) 有润肺、化痰、散结、滑肠之功效，栝楼皮及种子有利气宽肠之功效；油 渣果( 又称油瓜) ( h o d g s o n i a m a c r o c a r p a c o g n ) 果实直径可达2 0g m ，种子富含油脂可食，药 用有凉血止血、解毒消肿之功能；绞股蓝【g y n o s t e m m a p e n t a p h y l l u m ( t h u n b ) m a k i n o ) 全草富含 绞股蓝皂苷、糖类等，有消炎解毒、止咳祛痰之功效。尚有盒子草、土贝母、赤艇儿、茅瓜等属 植物均可药用( 邱明华等，2 0 0 5 ) 。 葫芦科植物的大多数属含有葫芦烷型四环三萜，是该科主要特征，其中葫芦素b 、e 的分布 十分广泛；一些属中富含达玛烷型四环三萜；一些属中含有齐墩果烷型五环三萜类成分，还有一 些属中发现有黄酮及其营类化合物，个别属中含有术脂素和酚酸类化合物。葫芦科植物大多有抗 菌、消炎的作用，但是单体化合物抗菌活性的研究报道甚少，主要集中在药理和毒理的活性研究 上 1 1 1 化学成分 1 1 1 1 三萜类化合物 葫芦科植物中的三萜类化台物主要包括葫芦烷型和达玛烷型四环三萜，但从目前研究的资料 看，同时存在于同一属的情况比较少，还包括齐墩果烷型五环三萜类化合物。 1 1 111 葫芦素类四环三萜 葫芦素( c u e u r b i t a c i n e s ) 一般味苦也被称为葫芦苦味素，研究始于上世纪5 0 年代，b e l k i n l 中f 日农q p 人学“6 l 学伊论殳鸽1 章前苦 筲报道儿种葫芦科植物苦味素具有抗癌活性，但效价低，毒性较强，府川受士0 限制，1 0 年1 i 亓人带 的葫芦素从葫芦科植物中分离出来，有葫芦素a 、b ，c 、d 、e 、f 、g 、h 、i 、j 、k 、l 等，这 些葫芦素类四环三萜都是一类氧化拌度很高的化合物，其特点是1 8 一甲基在c 9 上，比较有代表 性的旮葫芦袭b 、e 羊f ( c u c u r b i t a c i nb e f 1 - 3 ) 它们的化学绐构特点可以从a 环上氧化样度 不同加以区分( 邱明华等，2 0 0 5 ) 。葫芦素b 、e 对j | = 细胞疏松变性、坏死及空泡变性有治疗作 用，葫芦素b 还能增加肝糖原蓄积及阻j rj 升= 细胞脂肪变性及抑制肝纤维增生作川，可用丁治疗慢 性肝炎。在罗汉果属( s i r a i t i am e n - ) 和雪胆属( h e m s l e y a c o g n ) 中发现的葫芦烷类化合物中有 大量的配糖体形式存在，但氧化程度大大减少，罗汉果中含有人量甜味葫芦素三萜苷一罗汉果苷 ( m o g r o s i d e ，4 ) ，甜味约为蔗糖的= 百倍，具有清热、止咳效果，是糖尿病患者理想甜味物质。 值得一提的是，从云南民间草药罗锅底( ha m a b i l i s ) 中分离得到的雪胆甲素( 2 5 - a c e t a t e d i h y d r o e u c u r b i t a c i nf ，5 ) 和雪胆乙素( d i h y d r o c u c u r b i t a c i nf ，6 ) ，是我国最早发现的一些葫芦 素类苦味物质，是葫芦素f 的衍生物，具有抗菌消炎的作用，毒性很低。 1 1 112 达玛烷型四环三萜 竹本常松等日本学者从绞股蓝( g y n o s t e m m ap e n t a p h y l l u m ) 中分离得到了5 0 个绞股蓝苷 ( g y p e n o s i d e ) ，其苷元是达玛烷型2 0 s 一原人参二醇( 2 0 s p r o t o p a n a x a d i o l ，7 ) 和c 1 9 氧化原人参 二醇( 8 ) ，其中有四个分别为人参皂苷( g i n s e n o s i d e ) r b l 、r b 3 、r d 和f 2 ，绞股蓝苷具有与人 参皂苷类似的生理活性，被广泛应用在保健品上( 聂瑞麟，1 9 9 4 ) 。除此之外，丝瓜属( l u f f al i n n ) 、 盒子草属( a c t i n o s t e m m ag r i f f ) 、假贝母属( b o l b o s t e m m af r a n q u e t ) 中也发现含有达玛烷型四环 三萜类化合物。 1 1 1 1 3 五环三萜 齐墩果烷型五环三萜类化合物在葫芦科的很多属植物中都有发现，是分布较广泛的化合物类 型。雪胆皂营以及中华雪胆( h e m s l e y a c h i n e n s i s ) 中发现有竹节人参皂营i v a ( c h i k u s e t s us a p o n i n l v a ，9 ) ( m o r i t a e t a l ，1 9 8 6 ) ，术鳖子皂苗，赤爬皂苷其苷元为五环三萜的齐墩果酸( 1 0 ) 和丝石 竹苷元( i i ) 。 1 i i i 4 其他 2 在柄楼( z 肪f f d w ) 的种子中发现了两个新的环阿廷烷( c y c l o a r t a n e ) 璎化合物c y e l o k i r i l o d i o l ( 1 2 ) 雨ii s o c y c l o k i r i l o d i o l ( 1 3 ) ( k i m u r ae l a l ，1 9 9 7 ) 。 中罔农业人学形! i 学仃论文=第1 章前著 h k 1 妒 如一易1 ， 图i - i 葫芦科中三萜类化合物的结构 f i g 1 - ls t r u c t u r e so f t r i p e r p e n o i d sf r o mc u e u r b i p l m a t s i i 1 2 黄酮类化合物 黄酮类化合物广泛存在于植物界，具有广泛的生理作用，如维持血管正常的渗透压，防止血 中罔农业k 学倾卜学伊i 仑史鸽l 节前言 管脆化等。还是一种良好的活性白由基清除荆，有凋格免疫平内分泌作h j ，有抗癌，抗炎苫多种 医疗保健作川，此类化合物住葫芦科中也有出现。 方乍浦等( 1 9 8 9 ) 从绞股监( g y n o s t e m m a p e n t a p h y l l u mm a k i n o ) 地上部分提取分离剑_ 二个单 体，经鉴定为芦j ( r u t i n ，1 4 ) j 手l 嘀陆茁= ( o m b u o s i d e ，1 5 ) ，均为首次从绞股监中得剑。 斯建勇等( 1 9 9 4 ) 从罗汉果( s i r a i t i ag r o s v e n v r i ) 的新鲜果实中分出两个黄酮营即山奈酚 一3 - o - a - l 一鼠李糖- 7 一o l a - d - 葡萄糖基( 1 - 2 ) m l - 鼠李糖苷】( 1 6 ) 及山奈酚- 3 ，7 一a - l2 2 - 鼠李糖苷 ( 1 7 ) ，1 6 为新化合物，命名为罗汉果黄素( g r o s v e n o r i n e ) 。 在西瓜属( c i t r u l l u sc o l o c y n t h i s ) 果实和地上部分中分到6 个黄酮苷，分别为i s o v i t e x i n ( 1 8 ) 、 l s o - o r i e n t i n ( 1 9 ) 、i s o - o r i e n t i n3 - m e t h y le t h e r ( 2 0 ) ，8 t 矿h y d r o x y b e n z o y l i s o v i t e x i n ( 2 1 ) 、 6 c 矿h y d r o x y b e n z o y l v i t e x i n ( 2 2 ) 、8 c 矿h y d r o x y b e n z o y l i s o v i t e x i n4 一o - g l u c o s i d e ( 2 3 ) ，其中 化合物2 l 、2 2 、2 3 为c p h y d r o x y b e n z o y l 新的衍生物( m a a t o o qe t a ，1 9 9 7 ) 。 c a r b o n e 等( 2 0 0 4 ) 运用l c e m s ( l i q u i dc h r o m a t o g r a p h y e l e c t r o s p r a ym a s ss p e c t r o m e t r y ) 从 小雀瓜( c y c l a n t h e r a p e d a t a ) 的果实中分离得到1 1 个黄酮苷化合物，结构见图l 2 的2 4 - 3 4 。 1 i 1 3 甾体类化合物 苦瓜属( m o m o r d i c al i n n ) 的化学成分丰富，除含有葫芦素三萜、五环三萜化合物之外，还 有甾体类化合物，如常见的伊谷甾醇、胡萝h 甾醇，又从苦瓜果实中获得具有显并降血糖活性的 植物甾醇s f i g m a s t a - 7 2 2 - d i e n 3 - b e t a - o l ( 3 5 ) 和s t i g m a s t a - 7 2 2 2 5 - t r i e n 3 - b e t a o l ( 3 6 ) ( 邓向军等， 2 0 0 6 ) 。 栝楼属( t r i c h o s a n t h e sl i n n ) 植物中有不少植物甾醇类物质存在，而从zp a l m a t a 中发现了一 个羊毛甾醇的配糖体t r i c h o n i n ( 3 7 ) ( 邱明华等，2 0 0 5 ) 。 i t o h 等( 1 9 8 1 ) 从黄瓜( cs a t i v u s ) 种子中分离得到了几个4 甲基甾醇类化合物，分别为 2 4 伊e t h y l 一3 1 一n o r l a n o s t a - 8 ，2 5 ( 2 7 ) - d i e n - 3 f l - o l ( 3 8 ) 和2 4 卢e t h y l - 2 5 ( 2 7 ) - d e h y d r o l o p h e n o l ( 3 9 ) ；从 c p r o p h e t a r u m 中分离出一个比较奇怪的开裂甾醇，被称为二裂甾醇( d i s e c o - s t e r o l ，4 0 ) 。 4 1 4 r = h 1 5r - - - c h 3 r 1 6r = r h a g i c 1 7 r _ r h a 圈l - 2 葫芦科中黄酮类化合物的结构 f i gi - 2s t r u c t u r e so f f l a v o n o i d sf r o mc u c u r b i t a c e o u sp l a i n s 中田农廿夫学硕 哗付论文 第1 章前言 h a b o ho r lr 2r 3k 1 8bho m eh 1 9bh o hh 2 0bhhh 2 1bahh 2 2abhh 2 3b叠hb r r r lr 2 2 4hf n cg i c 2 5 hf u ch 2 6o hf u ch 2 7hhg l c r h a 2 8hg l ch 2 90 hg i c 3 0 o c i - 1 3g i c h 3 1hhg l c - g i c 3 2hf u c - m ah 3 3hf u c - m ah 3