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文档简介

临床免疫学检验技术,感染性疾病及其免疫检测,目录,第一节概述第二节细菌感染性疾病第三节真菌感染性疾病第四节病毒感染性疾病第五节TORCH感染第六节寄生虫感染第七节其他病原体感染,第一节概述,重点提示,感染和感染性疾病机体对病原体入侵的响应模式感染性疾病的免疫学标志物及其应用先天性感染、TORCH综合征和性传播疾病,感染和感染性疾病,感染是病原体和人体之间相互作用、相互斗争,导致机体发生病理改变的过程。感染性疾病是指病原体破坏机体正常机能后产生的各种感染症状。,机体对病原体入侵的响应模式,分为固有免疫和适应性免疫。根据机体的反应不同,免疫应答分为保护性免疫应答和变态反应。根据参与成分和功能不同,免疫应答分为体液免疫和细胞免疫。,感染性疾病的免疫学标志物及其应用,包括特异性标志物和非特异性标志物。特异性标志物主要是抗原、抗体和特异性免疫细胞。非特异性标志物指感染性疾病在内的多种疾病均可引起其升高的标志物。特异性抗原是直接诊断指标;IgM抗体常作为感染早期的间接诊断指标;IgG抗体是流行病学调查的指标,也是机体主要的保护性抗体。,先天性感染、TORCH综合征和性传播疾病,先天性感染:胎儿在母体内受到的感染,又称宫内感染。TORCH综合征:TOX、CMV、RV、HSV等病原体引起宫内感染时,可导致流产、死胎、畸形、发育异常,或出现智力低下、视听障碍等严重后果。性传播疾病:可以通过亲密接触传播的传染病。,第二节细菌感染性疾病,重点提示,非特异性标志物:降钙素原、C-反应蛋白、白细胞介素6链球菌感染:ASO沙门菌感染:肥达试验结核分枝杆菌感染:抗TB抗体和结核感染T细胞幽门螺旋杆菌感染:抗Hp抗体、Hp尿素酶,一、非特异性标志物,降钙素原:全身性细菌、真菌和寄生虫感染时,PCT异常增高,且与感染的严重程度及预后相关,常用ELISA和CLIA检测。C-反应蛋白:细菌感染时CRP10mg/L。可作为细菌感染与病毒感染的鉴别诊断指标。白细胞介素-6:IL-6目前主要用于感染性疾病的辅助诊断,常用ELISA和CLIA检测细胞外IL-6,用FCM检测细胞内IL-6。,链球菌感染,ASO增高见于A族链球菌感染。常用速率散射免疫比浊、ELISA等方法检测,其中速率散射免疫比浊试剂可在全自动生化分析仪上使用。,沙门菌感染,肥达试验伤寒沙门菌抗O凝集效价1:80、抗H1:160、副伤寒沙门菌抗H1:80才有诊断意义。,结核分枝杆菌感染,常用检验项目有抗TB抗体和结核感染T细胞。抗TB抗体常用ELISA和ICGT检测,结核感染T细胞使用T-SPOTTB检测。抗TB抗体多呈弱阳性反应。T-SPOTTB检测结核激活的特异性T细胞分泌的IFN-,可避免接种BCG的影响。二者均不能区分既往感染和现症感染。,幽门螺旋杆菌感染,常用检验项目有抗Hp抗体和Hp尿素酶。抗体常用ELISA、IBT和ICGT检测。抗原常用ELISA和ICGT检测。未进行Hp根治的人群,抗体阳性反应考虑Hp感染;进行过Hp根治的人群,抗体阳性反应需要鉴别既往感染与复发感染。Hp抗原检测阳性反应结合临床症状可诊断Hp感染。,第三节真菌感染性疾病,重点提示,常用检验项目有G试验和GM试验,常用ELISA和CLIA检测。G试验在念珠菌、曲霉菌、肺孢子菌、镰刀菌、地霉菌、组织胞浆菌、毛孢子菌等感染中均可升高。透析、链球菌败血症、输入蛋白或使用香菇多糖和磺胺类药物可导致假阳性反应。GM试验在隐球菌属、曲霉菌属、青霉/拟青霉等感染中均可升高。哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林-克拉维酸、食物中的GM抗原、肠道中定值的曲霉释放GM进入血液循环可导致假阳性反应。,第四节病毒感染性疾病,重点提示,病毒和病毒感染肝炎病毒感染呼吸道病毒感染轮状病毒感染EB病毒感染人类免疫缺陷病毒感染,病毒和病毒感染,病毒侵入机体后可引起病毒清除或病毒感染,取决于侵入病毒的毒力和数量以及机体的易感性和免疫状态。病毒侵入机体并在体细胞内增殖的过程称为病毒感染。,肝炎病毒感染-分型与传播途径,典型的肝炎病毒有五种亚型,分别是HAV、HBV、HCV、HDV和HEV。传播途径分别是:HAV和HEV通过污染的食物和水,HBV和HCV通过血液、性途径和母婴途径等,HDV在HBV感染人群中传播。,肝炎病毒感染-HAV感染,常用检验项目是抗-HAVIgM。抗HAVIgM是近期感染的标志。抗HAVIgG具有保护性,是流行病学调查的指标。,肝炎病毒感染-HBV感染(1),HBV的抗原抗体系统包括HBsAg与抗-HBs、HBeAg与抗-HBe、HBcAg与抗-HBc、PreS1Ag与抗-PreS1、PreS2Ag与抗-PreS2。,肝炎病毒感染-HBV感染(2),HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc五项俗称乙肝五项或乙肝两对半。HBsAg、抗-HBs和HBeAg常用双抗夹心法检测,抗-HBe和抗-HBc常用竞争抑制法检测,抗-HBcIgM常用捕获法检测。,肝炎病毒感染-HBV感染(3),临床意义(HBsAg)HBV感染后首先出现HBsAg,是早期诊断的指标。窗口期或S基因突变可出现HBsAg阴性反应。定量分析HBsAg用于动态评价患者病情和抗病毒治疗效果有非常重要的价值。HBsAg转阴并出现抗-HBs是HBV感染治疗的最终目标。,肝炎病毒感染-HBV感染(4),临床意义(抗-HBs)抗-HBs是HBV保护性抗体的一种,血清浓度大于10mIU/ml才有保护作用。阳性反应见于HBV感染恢复期、既往感染或乙肝疫苗接种后。,肝炎病毒感染-HBV感染(5),临床意义(HBeAg)HBeAg一般仅见于HBsAg阳性者,阳性反应表示HBV传染性较强,患者处于高感染低应答期。,肝炎病毒感染-HBV感染(6),临床意义(抗-HBe)抗-HBe可长期存在,无保护作用。HBeAg消失伴抗-HBe出现称为HBeAg的血清转换。,肝炎病毒感染-HBV感染(7),临床意义(抗-HBc)抗-HBcIgM是HBV急性感染的早期指标和病毒复制标志。抗-HBcIgG是既往感染的标志,现症感染也可出现。,肝炎病毒感染-HCV感染,常用检验项目有抗-HCV和HCV核心抗原,常用ELISA和CLIA检测。临床意义:抗-HCV不是保护性抗体,仅作为HCV感染的标志物之一,不能区分现症感染与既往感染。HCV核心抗原检测是HCV感染的直接证据,理论上可以用于HCV现症感染的判断。,肝炎病毒感染-HEV感染,HEV均为急性感染。常用检验项目有抗HEVIgG和抗HEVIgM,检测方法主要是ELISA。一般认为抗HEVIgM是早期感染的指标。,呼吸道病毒感染(1),常见病毒:流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒和冠状病毒。高危病毒:高致病性禽流感病毒(H5N1)、SARS冠状病毒。,呼吸道病毒感染(2),人流感病毒:特异性抗原在感染早期即可呈阳性反应,具有诊断价值。禽流感病毒:H5N1被称为高致病性禽流感,IgM抗体检测用于近期感染的辅助诊断。,呼吸道病毒感染(3),副流感病毒感染:IgG抗体无保护作用。抗原用于早期诊断,IgM抗体用于近期感染的辅助诊断。呼吸道合胞病毒感染:RSV抗原用于早期诊断,IgM抗体用于近期感染的辅助诊断。,呼吸道病毒感染(4),SARS冠状病毒引起SARS,急性期传染性强,潜伏期传染性低,康复后无传染性。急性期到恢复期出现IgM抗体或者IgG抗体效价增长4倍以上,提示有近期感染。,轮状病毒感染,经粪-口途径传播,引起婴幼儿和成人急性胃肠炎和腹泻。抗原检测用于早期诊断和疫情监测。IgM抗体用于早期辅助诊断。,EB病毒感染,EBV抗原有EA、VCA、MA、NA和LMP。初次感染后,体内首先出现抗VCA抗体和抗MA抗体,其后出现抗EA抗体,恢复期出现抗NA抗体。IgA抗体与鼻咽癌关系密切,IgM抗体、短期存在的IgG抗体和异嗜性抗体用于感染传染性单核细胞增多症的辅助诊断。,人类免疫缺陷病毒感染(1),HIV主要经性接触、血液和母婴传播,分为HIV-1和HIV-2两个型,临床以HIV-1型最常见。抗体检测是HIV感染诊断的金标准,RNA和抗原检测可以发现窗口期感染者,CD4+和CD8+T淋巴细胞检测可用于感染者免疫状况评价。,人类免疫缺陷病毒感染(2),常用检验项目有抗-HIV、抗-HIV抗体确认试验、HIV抗原抗体联合检测和HIVp24抗原。抗体初筛常用ELISA和CLIA,抗体确认常用IBT。,人类免疫缺陷病毒感染(3),初筛试验初筛试验阳性反应,用原有试剂和另外一种不同原理(或厂家)的试剂,或另外两种不同原理或不同厂家的试剂进行复检试验。两种试剂均呈阴性反应,则报告抗-HIV阴性();如均呈阳性反应,或一阴一阳,需送艾滋病确证实验室进行确证试验。,人类免疫缺陷病毒感染(4),确认试验确认试验使用HIV-1/2混合型试剂进行检测,阴性反应,报告抗-HIV阴性()。阳性反应,报告抗-HIV阳性();不是阴性反应,又不满足阳性判断标准,报告抗-HIV不确定(),建议4周后随访检测,仍然不能确定者,继续随访到8周。,第五节TORCH感染,重点提示,弓形虫感染风疹病毒感染巨细胞病毒感染单纯疱疹病毒感染,弓形虫和风疹病毒感染,TOX感染:可引起先天性TOX病。新生儿IgM阳性反应提示宫内感染。双份血清IgG效价增高4倍以上或IgG低亲和力,提示近期感染。RV感染:可导致先天性RV综合征。孕龄期母亲筛查从未感染过RV的个体,注射疫苗,使其获得免疫力,建议在怀孕前检测。抗RVIgM作为近期感染的指标,新生儿IgM阳性反应提示宫内RV感染。抗RVIgG单独阳性反应提示既往感染,与抗RVIgM同时阳性反应,提示有近期感染。,巨细胞病毒和单纯疱疹病毒感染,CMV感染:若妊娠3个月内发生宫内感染,可引起流产、死胎、早产、小头、智力低下等。新生儿IgM阳性反应提示宫内CMV感染。双份血清IgG效价增高4倍以上或IgG低亲和力,可辅助诊断近期活动性感染。HSV感染:有HSV-1和HSV-2两个亚型,宫内感染可引起流产、早产、死胎或畸形。新生儿IgM阳性反应提示宫内HSV感染。急性期和恢复期双份血清IgG效价增高4倍以上,提示有HSV近期感染。,第六节寄生虫感染,重点提示,疟原虫感染:外周血中疟原虫抗原和特异性抗体检测可辅助诊断疟原虫感染,常用ELISA检测。血吸虫感染:外周血抗原和抗体检测可辅助诊断血吸虫感染,常用ELISA和COPT检测。丝虫感染:抗原和抗体检测用于辅助诊断。猪囊尾蚴感染:免疫学检测对病原学和影像学不能确诊的可疑患者有重要意义。,第七节其他病原体感染,重点提示,梅毒螺旋体感染支原体感染衣原体感染立克次体感染,梅毒螺旋体感染(1),TP感染后机体产生特异性抗体和非特异性抗体两类。前者检测抗TP抗体,常用ELISA、CLIA和PA检测。后者检测反应素,常用RPR和TRUST检测。,梅毒螺旋体感染(2),临床意义,支原体、衣原体和立克次体感染,支原体感染:检测抗原可用于早期诊断。急性期和恢复期双份血清抗体效价增高4倍以上,提示有支原体近期感染。衣原体感染:直接抗原可用于早期诊断。急性期和恢复期双份血清抗体效价增高4倍以上,提示有衣原体近期感染。立克

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