（生理学专业论文）小鼠视网膜onoff通路中神经节细胞的功能特性及其调节机制的研究.pdf

1 6 1 1 特性 1 3 1 5 1 8 2 4 结论2 6 论文二a p b 敏感和不敏感的视杆o f f - 通路对闪光刺激频率跟随特性的限控机制 苗订言一2 7 日u 舌“。z ， 材料与方法2 9 实验结果3 3 讨论3 9 结论1 00 boob 4 1 论文三明视觉条件下抑制n o s 活性对视网膜神经节细胞光敏性的影响及其机 制探讨 前。言4 2 刖吾4 z 材料与方法4 3 实验结果4 9 讨论5 9 结论6 2 四、本研究创新性的自我评价6 3 五、参考文献6 4 六、附录 综述6 9 在学期间科研成绩9 0 致谢9 1 个人简介9 2 小鼠视网膜o n - o f f - 通路中神经节细胞的 功能特性及其调节机制的研究 目的 视网膜接收视觉信号，并将其中所包含的视觉信息编码成不同序列的神经冲 动传向大脑。不同的信号传递通路参与处理不同的视觉信息。视锥通路参与编码 光强度相对较高的明视觉信息，视杆通路参与编码光强度相对较低的暗视觉信息。 在不同强度光适应条件下，光的增强和减弱信号分别通过不同的视锥、视杆信号 传递通路进行处理。传递光增强信号的通路称为o n 通路，传递光减弱信号的通 路称为o 昏通路。 在暗视觉条件下，光的增强信号是由两条d l 2 氨基4 磷丁酸( d l 2 a m i n o 4 p h o s p h o n o b u t y r i ca c i d ，a f b ) 敏感的视觉通路进行传递的：视杆细胞一视杆双 极细胞一ai i 型无长突细胞一紧密连接一o n 视锥双极细胞一o n 神经节细胞。视 杆细胞一紧密连接一视锥细胞一o n 视锥双极细胞一o n 神经节细胞。a p b 可阻断 这两条通路的信号传导。光的减弱信号是由三条不同的a p b 敏感和不敏感的视杆 o f f - 通路进行处理的：视杆细胞一视杆双极细胞一ai i 型无长突细胞一甘氨酸能 突触- - - o f f 视锥双极细胞一o f r 神经节细胞。视杆细胞一紧密连接一视锥细胞一 o f f 视锥双极细胞一o f j f 神经节细胞。视杆细胞一直接与o f f 视锥双极细胞相联 系o f f , 经节细胞。为a p b 敏感的视杆o f f - 通路，和为a p b 不敏感的视 杆o f f - 通路。在明视觉条件下，处理光增强信号的通路为：视锥细胞一o n 视锥双 极细胞一o n 神经节细胞；处理光减弱信号的通路为：视锥细胞一。圩视锥双极细 胞一o f r 神经节细胞。 研究发现，暗视觉条件下，a p b 敏感的视杆o f f - 通路的光反应阈值低于a p b 不敏感的视杆o f f - 通路；对人类视网膜的研究发现，存在传递慢的、低强度光信 号和传递快的、高强度光信号的两条视杆通路；一氧化氮( n i t r i co x i d e ，n o ) 可 选择性地阻断雪貂视网膜a p b 敏感的视杆o f f - 通路的o f f 光反应；暗视觉条件下， 神经元型一氧化氮合酶( n e u r o n a ln i t r i co x i d es y n t h a s e ，n n o s ) 缺乏可降低视网膜 神经节细胞( r e t i n a lg a n g l i o nc e l l ，r g c ) 的光敏性。由此可见，不同的o n - o f f - 通路分别具有不同的功能特性和调节机制。 众所周知，视网膜中，各视觉通路最终都会聚在各自的神经节细胞上，故神 经节细胞的反应反映了视网膜中视觉信号处理的最终结果。因此，为了进一步明 确这些视觉通路不同的光反应特性、光刺激反应关系、n o 对神经节细胞光敏性 的影响及不同通路功能特性的调节机制，本研究采用全细胞电流钳及电压钳技术 对神经节细胞进行了记录。 方法 1 、c 5 7 b l 6 小鼠视网膜铺片。 2 、通过带有绿色( p 4 3 ，5 4 5 n m 光线) 磷光体的阴极射线管发出方波光斑刺 激，照射视网膜以诱发r g c 光反应。 3 、暗视觉条件下，电流钳记录a p b 敏感和不敏感的视杆o f f - 通路中r g c 的 光反应，并对反应的最高放电频率和潜伏时进行测定。 4 、暗、明视觉条件下，电流钳记录不同o n 和o f f - 通路中r g c 对不同频率 闪光刺激的光反应，分析其对闪光刺激的频率跟随能力。 5 、暗视觉条件下，应用n o 供体，s 亚硝基n 乙酰青霉胺( s - n i t r o s o n a c e t y l p e n i c i l l a m i n e ，s n a p ) ，观察其对a p b 敏感和不敏感的视杆o f f - 通路中r g c 光反应的影响。 6 、明视觉条件下，记录r g c 的自发和光诱发的兴奋性和抑制性突触后电压 和电流，观察一氧化氮合酶( n i t r i co x i d es y n t h a s e ，n o s ) 的抑制剂，硝基【广 精氨酸甲酯( n o d - n i t r o l a r g i n i n em e t h y le s t e r ，l - n a m e ) 对r g c 光敏性的影响并 探讨其机制。 7 、应用激光共聚焦显微镜，对标记的r g c 进行分层扫描，拍照并进行三维 重建以判断r g c 的分型。 结果 1 、暗视觉条件下，a p b 敏感的视杆o f f - 通路中r g c 的o f f 光反应的潜伏时 显著长于a p b 不敏感视杆o f f - 通路，而两条通路中r g c 的o f f 光反应的最高放 2 电频率无显著差异。 2 、暗视觉条件下，a p b 敏感视杆o f f - 通路中r g c 的o f f 光反应所能跟随的 最高闪光刺激频率显著低于a p b 不敏感视杆o f f - 通路。视杆o n 通路的神经节细 胞所能跟随的最高闪光刺激频率显著高于a p b 敏感的视杆o f f - 通路。由暗视觉转 到明视觉条件下，a p b 敏感和不敏感的视杆o f f - 通路中r g c 的o f f 光反应所能跟 随的闪光刺激频率均显著升高。 3 、暗视觉条件下，n o 选择性地阻断小鼠视网膜上a p b 敏感的视杆o f f - 通路 的光反应。 4 、明视觉条件下，l - n a m e 降低o n o f f - 通路中r g c 的光敏性。 5 、明视觉条件下，l - n a m e 降低了o n o f f - 通路中r g c 的自发和光诱发的 抑制性突触后电流( i n h i b i t o r yp o s t s y n a p t i cc u r r e n t ，i p s c ) 的幅度。应用士的宁 ( s t r y c h i n i n e ，s t r ) 和印防己毒素( p i c r o t o x i n ，p t x ) 消除抑制性突触输入后， l n a m e 可显著降低r g c 的自发和光诱发的兴奋性突触后电流( e x c i t a t o r y p o s t s y n a p t i cc u r r e n t ，e p s c ) 的幅度，减少自发性e p s c ( s p o n t a n e o u se p s c ，s e p s c ) 的发生频率。 6 、在明视觉条件下，应用羟基胺( h y d r o x y l a m i n e ，h a ) 漂白视锥细胞后， l - n a m e 对r g c 的s e p s c 的幅度和发生频率无显著影响。在应用a p b 减少谷氨 酸释放到r g c 后，l - n a m e 对r g c 的s e p s c 的幅度和发生频率无显著影响。 讨论 我们的实验结果显示，小鼠视网膜上不同的o n o 昏通路确实存在不同的功 能特性和调节机制。暗视觉条件下，a p b 敏感视杆o f f - 通路中r g c 的o f f 光反应 的潜伏时显著长于a p b 不敏感视杆o f f - 通路。可能的原因有二：a p b 敏感和 不敏感的视杆o f f - 通路的视网膜环路不同，a p b 敏感比不敏感的视杆o 昏通路中 的突触数目多。( 9 a p b 敏感的视杆o f f - 通路信号传递效率较低。另外，实验还发 现a p b 不敏感的视杆o f f - 通路中r g c 的光反应能稳定跟随较高频率的闪光刺激。 也有研究发现，a p b 敏感的视杆o f f - 通路光刺激阈值低于a p b 不敏感的视杆o f f - 通路。因此，我们认为，a p b 敏感的视杆o f f - 通路处理低频率、低强度的光减弱 信号，并向大脑传递信号的速度较慢；而a p b 不敏感的视杆o f f - 通路介导频率和 强度相对较高的光减弱信号，且将信号传向大脑速度较快。以往研究显示，n o 可选择性地阻断雪貂视网膜a p b 敏感的视杆o 昏通路的o f f 反应。我们的实验发 现在小鼠的视网膜上也存在这一现象。这一结果表明，a p b 敏感和不敏感的视杆 o f f - 通路不仅分别传递不同的视觉信息，而且也存在着不同的调节机制。从小鼠 和雪貂视网膜的研究结果来看，n o 对a p b 敏感视杆o f f - 通路的特异性调节可能 是适用于不同种系动物的一个普遍现象。 通过暗、明视觉条件的转换，我们可以推断出限控不同通路闪光刺激频率跟 随特性的部位。暗视觉条件下，位于a p b 敏感的视杆o f f - 通路的神经节细胞，在 转换到明视觉条件后，能跟随的闪光刺激频率显著升高，而暗视觉条件下，位于 视杆o n 通路的神经节细胞所能跟随的最高闪光频率显著高于a p b 敏感的视杆 o f f - 通路，这些结果证明，在该通路中，视杆细胞，视杆双极细胞，a i i 型无长突 细胞和o f f 视锥双极细胞，o f f , 经节细胞能跟随高频率的闪光刺激。因此，我们 推测，位于ai i 型无长突细胞与o f f 视锥双极细胞之问的甘氨酸能突触很可能限 控了a p b 敏感的视杆o f f - 通路的频率跟随能力。光照时( 即给光时) ，ai i 型无长 突细胞释放甘氨酸抑制o f r 视锥双极细胞，因而，o f f 视锥双极细胞到o f f l , 经节 细胞的突触输入减少。撤光时，a 型无长突细胞停止向o f f 视锥双极细胞释放甘 氨酸，后者对o f f 视锥双极细胞的抑制作用被解除了，从而允许o f r 视锥双极细 胞向o f r 神经节细胞释放谷氨酸以诱发o f f 光反应。解除甘氨酸对o f f 视锥双极细 胞的抑制作用可触发a p b 敏感的视杆o f f - 通路的o f f 光反应。当闪光刺激频率较 高时，每一次给光和撤光的时间均缩短，影响了甘氨酸对o f f 视锥双极细胞的抑 制作用的产生和接触，因而限制了高频率的闪光刺激信号通过a p b 敏感的视杆 o f f - 通路。应用类似的方法，我们检测了a p b 不敏感的视杆o f f - 通路的闪光刺激 频率跟随特性。结果表明，在a p b 不敏感的视杆o f f - 通路中的o f f 视锥双极细胞 和o f f 神经节细胞本身能够跟随高频率的闪光刺激。因此，我们推断，a p b 不敏 感的视杆o f f - 通路的频率跟随能力的限控机制存在于视杆或视锥细胞中。有研究 表明，视锥细胞比视杆细胞反应速率更快。视觉通路中，频率跟随能力最低的部 分将会成为限制高频率光信号通过的主要成分。因此，我们认为，在a p b 不敏感 的视杆o f f - 通路中，视杆细胞可能为限控该通路频率跟随特性的主要机制所在。 4 n o 选择性地阻断a p b 敏感的视杆o f f - 通路， 本研究结果发现，在阻断了抑制性突触电流后， 的和光诱发的e p s c 幅度，降低了s e p s c 的发 生频率。这些结果进一步支持了n o 具有刺激兴奋性神经递质释放的作用这一观 点。因此，我们推测l n a m e 可通过降低视网膜中内源性n o 含量，从而减少对 r g c 的兴奋性突触输入，降低其对光的敏感性。在本部分研究中，我们还对 l n a m e 通过抑制n o s 的活性，减少r g c 兴奋性突触电流的可能机制进行了探 讨。结果显示，在光漂白视锥细胞后，无论是否应用s t r 和p t x ，l - n a m e 均不 能降低s e p s c 的发生频率，因此提示，在明视觉条件下，l - n a m e 可能作用于视 锥细胞以减少突触前谷氨酸递质的释放，从而减少r g c 的s e p s c ，降低其光敏性。 明视觉条件下，l n a m e 降低r g c s 的敏感性的作用可能也涉及其它的机制，有 待进一步研究。 结论 1 、a p b 敏感的视杆o f f - 通路处理低频率、低强度的光减弱信号，并向大脑传 递信号的速度较慢；而a p b 不敏感的视杆o f f - 通路介导频率和强度相对较高的光 减弱信号，且将信号传向大脑速度较快。 2 、n o 选择性调节小鼠视网膜a p b 敏感的视杆o f f - 通路。 3 、位于a i i 型无长突细胞与o f r 视锥双极细胞之间的甘氨酸能突触很可能限 控了a p b 敏感的视杆o f f - 通路的频率跟随特性。 4 、视杆细胞限制了a p b 不敏感的视杆o f f - 通路的闪光刺激频率跟随特性。 5 、明适应条件下，l n a m e 可能通过抑制视锥细胞中n o s 的活性，降低n o 水平，使其谷氨酸释放减少，r g c 的兴奋性突触电流减弱，从而降低其光敏性。 关键词 视网膜神经节细胞；暗视觉；n o ；明视觉；a p b tn o s ；l n a m e ；兴奋 性突触电流 英文论著摘要 s t u d yo nt h eu n i q u e f u n c t i o n a lp r o p e r t i e sa n d m e c h a n i s m so fr e t i n a lg a n g l i o nc e l l si nt h e m o u s er e t i n a lo n - - o f f - p a t h w a y s o b j e c t i v e t h er e t i n as e n s e sv i s u a ls i g n a l s ，c o d e sv i s u a li n f o r m a t i o ni n t od i f f e r e n ts p i k e t r a i n s ，a n dt h e ns e n d st h e mi n t ot h eb r a i n d i s t i n c ts i g n a l i n gp a t h w a y sw i t h i n t h er e t i n a a r ei n v o l v e di nc o d i n gd i f f e r e n tv i s u a li n f o r m a t i o n t h ec o n ep a t h w a y sm e d i a t ec o d i n g o fv i s u a li n f o r m a t i o nf o rp h o t o p i cv i s i o na tr e l a t i v e l yh i g hl i g h ti n t e n s i t i e s b yc o n t r a s t ， t h er o dp a t h w a y su n d e r l i et h ec o d i n gf o rs c o t o p i cv i s i o na tr e l a t i v e l yl o wl i g h t i n t e n s i t i e s l i g h ti n c r e m e n t sa n dd e c r e m e n t sa r ep r o c e s s e dw i t h i nd i f f e r e n tc o n ea n d r o ds i g n a l i n gp a t h w a y s t h ep a t h w a y sf o rs i g n a l i n gl i g h ti n c r e m e n t sa r e c a l l e do n _ p a t h w a y s ，t h ep a t h w a y sf o rs i g n a l i n gl i g h td e c r e m e n t sa r e r e f e r r e dt oa so f f - p a t h w a y s 。 t w oa p bs e n s i t i v er o dp a t h w a y sc o n v e yt h el i g h ti n c r e m e n ts i g n a li ns c o t o p i c v i s i o n ：q r o d s - - - r o db i p o l a rc e l l s - - - a l la m a c r i n ec e l l s g a pj u n c t i o n s o nc o n e b i p o l a rc e l l s o ng a n g l i o nc e l l s r o d s g a pj u n c t i o n s c o n e s o n c o n eb i p o l a r c e l l s o ng a n g l i o nc e l l s a p bb l o c k st h e s et w op a t h w a y s t h r e ed i s t i n c ta p bs e n s i t i v e a n da p bi n s e n s i t i v er o do f f - p a t h w a y sp r o c e s st h el i g h td e c r e m e n ts i g n a l si nt h e d a r k a d a p t e dr e t i n a ：( ) r o d s r o db i p o l a r c e l l s a l la m a c r i n ec e l l s g l y c i n e r g i c s y n a p s e s - - o f fc o n eb i p o l a rc e u s - - - o f fg a n g l i o nc e l l s r o d s g 印j u n c t i o n s c o n e s - - - o f fc o n eb i p o l a rc e l l s o f fg a n g l i o nc e l l s r o d s - - - d i r e c t l yc o n t a c t i n go f fc o n e b i p o l a rc e l l s - - o f fg a n g l i o nc e l l s i nt h e s et h r e er o do f f - p a t h w a y s ，i s a p bs e n s i t i v e ， w h i l e a n d a r ea p bi n s e n s i t i v e u n d e rp h o t o p i cc o n d i t i o n s ，s i g n a l i n gl i g h ti n c r e m e r i t sp a t h w a y ：c o n e s - - o nc o n eb i p o l a rc e l l s o ng a n g l i o nc e l l s ，s i g n a l i n gl i g h t d e c r e m e n t sp a t h w a y ：c o n e s - - o f fc o n eb i p o l a rc d l s - - - o f fg a n g l i o nc e l l s i th a sb e e nf o u n dt h a tt h el i g h tt h r e s h o l do fa p bs e n s i t i v er o do f f - p a t h w a y si s l o w e rt h a nt h a to fa p bi n s e n s i t i v e r o d o f f - p a t h w a y s i n t e r e s t i n g l y , h u m a n p s y c h o p h y s i c a l s t u d i e s s u g g e s tt w or o dp a t h w a y s ：o n et h r a n s f e r r i n g s l o wa n d l o w t h r e s h o l ds i g n a l s ，a n da n o t h e rc o n v e y i n gf a s t e ra n dh i g h t h r e s h o l ds i g n a l s n o 6 a sw ea l lk n o w , r o da n dc o n ep a t h w a y sc o n v e r g eo n t oi n d i v i d u a lr g c t o i n v e s t i g a t et h er e s p o n s ep r o p e r t i e s ，t h es t i m u l u s r e s p o n s e ，t h ee f f e c t s o fn oo n s e n s i t i v i t yo fr g ct ol i g h ta n dt h em e c h a n i s m s ，w h o l e - c e l lp a t c h - c l a m pr e c o r d i n g s w e r em a d ef r o mr g c s m e t h o d s 1 c 5 7 b l 6m o u s er e t i n a lp r e p a r a t i o n 2 l i g h t - e v o k e dr e s p o n s e sw e r eo b t a i n e db yd e l i v e r i n gs p o t so fl i g h tt ot h er e t i n a f r o ma c o m p u t e rm o n i t o r , w i t hag r e e np h o s p h o g 3 u n d e rs c o t o p i cc o n d i t i o n ，c u r r e n t - c l a m pr e c o r d sl i g h tr e s p o n s e so fr g c si n a p bs e n s i t i v ea n di n s e n s i t i v er o do f f - p a t h w a y s ，a n dm e a s u r et h ep e a kf i r i n gr a t ea n d l a t e n c yo ft h o s el i g h tr e s p o n s e s 4 c u r r e n t - c l a m pr e c o r d i n g sw e r em a d e t oi n v e s t i g a t et h ef e q u e n c yf o l l o w i n g p r o p e r t i e so fr g c st of l a s hl i g h tu n d e rb o t hs c o t o p i ca n dp h o t o p i cc o n d i t i o n s 5 u n d e rs c o t o p i cc o n d i t i o n s ，n i t r i co x i d ed o n o ls n a pi sa p p l i c a t e dt ot e s tt h e e f f e c t so nt h el i g h t r e s p o n s e so fr g c si nt h ea p bs e n s i t i v ea n di n s e n s i t i v er o d o f f - p a t h w a y s 6 s p o m a n e o u sa n dl i g h t - e v o k e de x c i t a t o r ya n di n h i b i t o r ys y n a p t i cc u r r e n ta n d v o l t a g ew e r er e c o r d e df r o mr g c st oi n v e s t i g a t et h ee f f e c t sa n dm e c h a n i s m so f l - n a m eo nt h es e n s i t i v i t i e so fr g c st ol i g h tu n d e rp h o t o p i cc o n d i t i o n s 7 i m a g e so f t h el a b l e dc e l l sw e r et a k e nb ya l lc o n f o c a lm i c r o s c o p e r e s u l t s 1 u n d e rs c o t o p i cc o n d i t i o n s ，t h el a t e n c i e so fo f fr e s p o n s e so fr g c si nt h ea p b s e n s i t i v er o do f f - p a t h w a y sa r es i g n i f i c a n t l yl o n g e rt h a nt h o s ei nt h ea p bi n s e n s i t i v e r o do f f - p a t h w a y s ，w h e r e a st h e r ei sn os i g n i f i c a n td i f f e r e n c ef o rp e a kf i r i n gr a t ei nt h o s e t w o p a t h w a y s 2 u n d e rs c o t o p i cc o n d i t i o n s ，t h ef r e q u e n c yf o l l o w i n gp r o p e r t i e so fr g c si nt h e a p bs e n s i t i v er o do f f - p a t h w a yw e r el o w e rt h a nt h o s eo fr g c si nt h ea p bi n s e n s i t i v e 7 r o do f f - p a t h w a y s r g c si nt h eo n p a t h w a y sc o u l df o l l o war e l a t i v e l yh i g hs t i m u l u s f r e q u e n c y a f t e rs w i t c h i n gt op h o t o p i cc o n d i t i o n s ，t h ef r e q u e n c yf o l l o w i n gp r o p e r t i e s o fr g c si nt h ea p bs e n s i t i v ea n di n s e n t i v er o do f f - p a t h w y a sw e r ei n c r e a s e d 3 u n d e rs c o t o p i cc o n d i t i o n s ，n os e l e c t i v e l yb l o c k sl i g h t - e v o k e dr e s p o n s e si n t h ea p bs e n s i t i v er o d o f f - p a t h w a yi nt h em o u s e r e t i n a 4 u n d e rp h o t o p i cc o n d i t i o n s ，l - n a m ed e c r e a s e dt h es e n s i t i v i t yo fr g c st o l i g h t 5 u n d e rp h o t o p i cc o n d i t i o n s ，s p o n t a n e o u sa n dl i g h t e v o k e di p s c so fr g c si n t h eo n - o f f - p a t h w a y sw e r er e d u c e db yl - n a m e l - n a m es i g n i f y c a n t l yr e d u c e dt h e a m p l i t u d ea n df r e q u e n c yo fs p o n t a n e o u sa n dl i g h t e v o k e de p s c s ，c o m p a r e dw i t hs t r a n dp t xa l o n e 6 u n d e rp h o t o p i cc o n d i t i o n s ，l n a m ed i dn o tc h a n g es e p s c so fr g c sa f t e r p h o t o b l e a c h i n gc o n e sb yh a l - n a m ed i dn o ta f f e c tt h es e p s c so fr g c sa f t e ra p b t r e a t m e n tr e d u c i n gg l u t a m a t er e l e a s eo n t or g c s d i s c u s s i o n o u rr e s e a r c hp r o v e dt h a tt h e r ea r ed i f f e r e n tf u n c t i o n a lp r o p e r t i e si nt h ed i s t i n c t o n - o f f - p a t h w a y s u n d e rs c o t o p i cc o n d i t i o n s ，t h el a t e n c i e so fo f fr e s p o n s e so fr g c s i nt h ea p bs e n s i t i v er o do f f - p a t h w a y sa r es i g n i f i c a n t l yl o n g e rt h a nt h o s ei nt h ea p b i n s e n s i t i v er o do f f - p a t h w a y s t h e r ea r et w op o s s i b l er e a s o n s ：o t h er e t i n a lc i r c u i t so f t h e s et w op a t h w a y sa r ed i f f e r e n t t h e r ea r em o r es y n a p s e si nt h ea p bs e n s i t i v er o d o f f - p a t h w a y st h a ni nt h ea p b i n s e n s i t i v er o do f f - p a t h w a y s t h ee f f i c i e n c yo fa p b s e n s i t i v er o do f f - p a t h w a y sa r es l o w e rt h a nt h a to fa p bi n s e n s i t i v er o do f f - p a t h w a y s w ea l s of o u n dt h a tt h el i g h t e v o k e dr e p o n s e so fr g c si nt h ea p bi n s e n s i t i v er o d o f f - p a t h w a y sc o u l df o l l o wm u c hh i g h e rs t i m u l u sf r e q u e n c i e st h a nt h o s ei nt h ea p b s e n s i t i v er o do f f - p a t h w a y s v 6 1 9 y if o u n dt h a ta p bs e n s i t i v er o do f f - p a t h w a y sh a s b e e ns h o w nt or e s p o n da tal o w e rt h r e s h o l d so fl i g h ti n t e n - s i t yt h a na p bi n s e n s i t i v e r o do f f - p a t h w a y s c o l l e c t i v e l y , a p bs e n s i t i v er o do f f - p a t h w a yp r o c e s s e st h el i g h t d e c r e m e n ts i g n a lw i t hl o wf r e q u e n c ya n di n t e n s i t y , a n dt r a n s f e r st h ei n f o r m a t i o nt ot h e b r a i n s l o w l y i nc o n t r a s t ，a p bi n s e n s i t i v er o do f f - p a t h w a y sm e d i a t et h el i g h t d e c r e m e n t s i g n a l a t r e l a t i v e l yh i g hf r e q u e n c i e sa n di n t e n s i t i e s ， a n dc o n v e yt h i s 8 i n f o 皿a t i o nt ot l l eb r a i nr a p i d l y o u rp r e v i o u sd a t a a n dt h er e s u l t si nt h i s 咖d y d e r n o n s 眦e dn os p e c i f i c a l l ym o d u l a t e st h ea p b s e n s i t i v er o do f f - p a t h w a y , w h i c h s u g g e s t st h es p e c i f i cm o d u l a t i o no fn o o nt h i sp a t h w a yi sac o m m o nm e c h 锄s m a c r o s sd i f f e r e n ta n i m a ls p e c i e s b ys w i t 幽n gr e c o r d i n g so fe a c hr g c f r o ms c o t o p i ct op h o t o p i cc o n d l t l o n s ，w e c o u l dd i s s e c tt h ef r e q u e n c yf o l l o w i n gp r o p e r i t i e s o fd i f f e r e n tc o m p o n e n t sw l t h i nt h e s e v i s 眦lp a t h w a y s t h er g c si nt h ea p bs e n s i t i v er o do f f - p a t h w a y u n d e rs c o t o p l c c o n d i t i o n sc o u l df o l l o wm u c hr a g h e rs t i m u l u sf r e q u e n c i e sa f t e rs w i t c h i n g t op h o t o p l c c o n d i t i o n s ，w h i l et h ef r e q u e n c yf o l l o w i n gp r o p e r t i e so fo n p a t h w a y s a r es l g n i f i c a n t l y h i g h e rt h a nt h ea p b s e n s i t i v er o do f f - p a t h w a y t h e s er e s u l t si n d i c a t er o d s ，db l p o l 盯 c e l l s a i i 锄a t r i n ec e l l s ，o f fc o n eb i p o l a rc e l l sa n d o f fr g c sc a l lf o l l o wh l g hs t l m u l u s 丘e q u e n c i e s c 0 1 1 e c t i v e l y , t h eg l y c i n e r g i cs y n a p s e b e t w e e na i ia m a c r i n ec e u sa n dd t t c o n eb i p o l a rc e l l sm a yl i m i tt h ef r e q u e n c yf o l l o w i n gt h r o u g ht h ea p b s e n s i t i v e d o i f - p a t h w a y s m e l lt h el i g h tt u r n so n a i ia m a c r i n ec e l l sr e l e a s eg l y c i n et oi 舳i o f f c o n eb i p o l a rc e l l s ，a n dt h u st h es y n a p t i ci n p u t sf r o mo f f c o n eb i p o l a rc e l l st oo f rr g c s a r er e d u c e d w h e nt h el i g h tt u r n so f f , t h ei n h i b i t i o nf r o mg l y c i n et o o f fc o n eb l p o l 盯 c e l l si sf 锄o v e d ，a 1 1 0 w i n go f fc o n eb i p o l a rc e l l s t or e l e a s eg l u t a m a t et oo f fg r c s ， w h i c hg e n e r a t eo f fr e s p o n s e s t h er e m o v a lo fg l y c i n