水质微生物检测基础课件.ppt

微生物基础知识培训,宁波安联检测有限公司,微生物的定义,微生物（microorganism,microbe）:存在于自然界中的一群体型细小、结构简单、肉眼看不见，必须借助于特殊仪器放大后才能观察到的微小生物按其结构、化学组成及生活习性可分为:原核类:仅有原始核质，无核仁或核膜，细胞器很不完善。如细菌、放线菌、支原体、立克次氏体、衣原体、螺旋体真核类:细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体，细胞器完整。如真菌（酵母菌和霉菌）、原生动物、藻类非细胞类:体积微小，能通过除菌过滤器。如病毒和朊病毒等按其致病性可分为:病原性微生物非病原性微生物,微生物的特点,个体小,面积大：小于0.1mm。肉眼不可见。分布广,种类多（10万多种）：自然界中到处都有，如水、空气、土壤等,土壤中的数量最多。代谢强，转化快：发酵乳糖的细菌在1小时内可分解其自重100010000倍的乳糖；产朊假丝酵母合成蛋白质的能力比食用公牛强10万倍生长旺，繁殖快：微生物有惊人的繁殖速度，大多数微生物几十分钟内就可以繁殖一代适应性强，易变异（耐药性产生的原因）,葡萄球菌,酵母菌（芽痕）,棒状杆菌,大肠杆菌,弧状菌,链球菌,菌落单位,菌落单位-CFU由单个菌细胞或几个同种菌细胞在培养基上长成肉眼可见的菌落，每个菌落就是1CFU,微生物的分布,土壤：是微生物生活的最适环境水：仅次于土壤的微生物分布、定居的第二场所空气：空气中的微生物主要来源于带有微生物菌体及孢子的灰尘，这类微生物大多数是腐生性的，还来源于人和动物，它们大多数是通过呼吸道排出的，其中也包含有病原微生物，悬浮在大气中。,微生物的类群和形态结构,一、细菌细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛。细菌的形态与结构（1）球菌多数球菌直径在1微米左右，外观呈球形或近似球形。由于繁殖时分裂平面不同可形成不同的排列方式，分为双球菌、链球菌、葡萄球菌等。（2）杆菌形态多数呈直杆状，也有的菌体稍弯，多数呈分散存在，也有的呈链状排列，分为棒状杆菌、链状杆菌、球杆菌等。（3）螺形菌菌体弯曲，呈弧形或螺旋形。如幽门螺杆菌。细菌虽小，仍具有一定的细胞结构和功能。细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等各种细菌都有，是细菌的基本结构。,球菌(coccus),脑膜炎奈瑟菌,杆菌(bacillus),不同杆菌的大小、长短、粗细很不一致。,细菌的繁殖,细菌生长速度很快，一般约20min分裂一次。若按此速度计算，细菌群体将庞大到难以想象的程度。但事实上由于细菌繁殖中营养物质的逐渐消耗，有害代谢产物的逐渐积累，细菌不可能始终保持高速度的无限繁殖。经过一段时间后，细菌繁殖速度逐渐减慢，死亡菌数增多，活菌增长率随之下降并趋于停滞。,热原与内毒素,许多细菌、病毒和真菌（如酵母菌）都能产生热原。热原是微量即可引起恒温动物体温异常升高的物质的总称。主要物质为细菌内毒素、胞壁酰二肽及其他抗原抗体复合物、半抗体原物质和某些药物（类固醇）等。1、细菌内毒素一般指革兰阴性细菌细胞壁的结构成分，主要是脂多糖。2、细菌内毒素生物学活性可分为两类：一是致病作用，一是保护性反应。3、其他理化特性耐热性：120加热4h，可破坏98%。180加热2h或250加热30min，才可彻底破坏。滤过性：其体积小，约在15nm之间，故能通过滤器进入滤液中。具有水溶性及不挥发性。能被强酸、强碱和氧化剂破坏,消毒与灭菌,下列术语常用于表示物理或化学方法对微生物的杀灭程度消毒：杀死物体上病源微生物的方法,并不一定能杀死细菌的芽胞。消毒所用的试剂称为消毒剂。灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高，包括杀灭细菌芽孢在内的全部病原微生物和非病原微生物。抑菌：抑制体内或体外细菌的生长繁殖。常用的抑菌剂为各种抗生素，可抑制细菌的繁殖。防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般不死亡。同一种化学药品在高浓度时为消毒剂，低浓度时常为防腐剂。无菌：不存在活的细菌。防止细菌进入人体或其他物品的操作技术，为无菌操作。,消毒与灭菌,辐射灭菌法1、紫外线：波长200-300nm的紫外线具有杀菌作用。穿透物质的能力很差，一般要求紫外灯距离照射物不超过1.0米为宜2、电离辐射高速电子、X射线、射线3、微波波长1mm1m,热力灭菌法：使蛋白质、酶及核酸永久性破环，细胞膜溶解，导致细胞发生不可逆转的死亡。1、干热灭菌法采用灼烧或干热空气灭菌，使用方便，适用于玻璃器皿和瓷器等耐高温的固体物的灭菌。2、湿热灭菌法利用热蒸汽杀死微生物。高压蒸汽灭菌：利用高温高压蒸汽进行灭菌的方法，蒸汽的穿透力较热空气强可以杀死一切微生物，包括细菌的芽孢，真菌的孢子或休眠体等耐高温的个体。最可靠最适用最广泛的灭菌方法。,水质微生物采样,自来水：现将自来水龙头用火焰烧灼3min，灭菌；再打开水龙头防水5min（常用的水龙头可以防水23min）；采样水置于无菌锥形瓶中，采样总量占锥形瓶的80%左右，以便摇匀。水源水：选取可疑及有代表性的水域，一般距离水面1015cm采样；河道水采样时，将瓶口朝向、水流方向，在指定位置打开瓶盖。采样结束后，样品冷藏运输，尽快检测。,样品处理、实验准备、实验步骤及报告详见作业指导书,染色,革兰氏染色法,革兰染色法是丹麦内科医生ChristainGram于1884年创立的一种细菌复染色方法，已有130多年的历史，仍在广泛使用。,通透性学说、等电学说、化学学说,鉴别细菌：把细菌分成G+和G-两大类。选择抗菌药物：例如G+球菌对青霉素敏感,G-杆菌耐药。了解细菌的致病机理：G+菌大多产生外毒素,G-菌产生内毒素。革兰染色的步骤涂片干燥固定染色紫碘酒红，分分半半,意义,灭菌接种环,细菌合适,细菌较多,接种环取盐水3ul2滴,水滴间距小于2cm。,取菌苔少许（1mm小菌落半个）与盐水混匀，涂成大于1cm2均匀涂膜。,涂毕环移至