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文档简介
。石蜡切片1. 仪器石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻片等。2. 试剂FAA固定液(70%酒精90ml、冰醋酸5ml、福尔马林5ml)、10%番红水溶液、0.5%固绿(用95%的酒精配制)、酒精(100%、95%、80%、70%、50%)、二甲苯、蒸馏水、甘油、中性树胶等。3.取材幼嫩的油菜植株叶片和茎4.方法与步骤(参照)1固定:FAA固定液固定48小时以上。2脱水:50%酒精70%酒精83%酒精95%酒精100%酒精100%酒精。每级2h。100%酒精中1.5h。其中70%酒精处可长期保存。3透明:1/2二甲苯+1/2无水乙醇 (2h) 纯二甲苯(1.5h) 纯二甲苯(1.5h)4浸蜡:将处理的材料置于1/2石蜡(固体粉末状)+1/2二甲苯中,40烘箱敞口过夜。5包埋:先提升恒温箱的温度至60,换纯蜡3次,每次1-2h,用硬的电光纸、牛皮纸叠纸盒,置于45-60的烫板上,倒入材料,摆放好材料,把标签(正面向外置于底部),补足石蜡,倒好后轻轻的置于冷水盆中,注意底面要接触盆中凉水,待石蜡全部凝固后可取出晾干,也可在凉水盆中放置过夜。6切片对包埋的材料进行修块、粘块、整修后,保证材料四周都有石蜡包围。但不可太多。切面的上、下边平行。用加热的解剖刀蘸取少许石蜡碎屑,并迅速将石蜡块四周的碎屑烫平,使石蜡块牢固地粘在台木上。检查切片机,安装切片刀、调整好刀的角度,调整石蜡块与刀口之间的角度与位置后开始切片。7粘片将粘贴剂置簿玻片上,再取切片浮置粘片剂上,然后置烘片台上,使切片展开烫平,材料不现皱纹为度。最后将切片依次排好,用滤纸吸去多余水分,同时以记号笔在玻片上编号,放入温箱中烘干,温度3040中过夜。8脱蜡 脱蜡用二甲苯,把烤好的载玻片放于盛二甲苯的染缸中:纯二甲苯(10-20min)纯二甲苯(5-10min)9染色将纯二甲苯脱蜡完全的材料,1/2 二甲苯十1/2纯酒精100%酒精95酒精85酒精70酒精50酒精1%番红染色(4h以上) 50酒精70酒精85酒精95酒精0.5%固绿(1min)95酒精100%酒精100酒精(未注明时间各级均为3min) 10胶封 滴加加拿大树胶封藏。11.镜检,拍照欢迎您的
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