（动物学专业论文）扁玉螺繁殖和早期发育的研究.pdf

摘要 本文以中国北方沿海的扁玉螺( n e v e r i t ad i d y 磁a ) 为研究对象，对扁玉螺的生殖腺 发育、繁殖习性、胚胎和幼虫的早期发育以及外界环境因子对其浮游幼虫生长存活的影 响等进行了观察研究，以期为进一步对玉螺属动物的基础研究提供资料。 主要研究结果如下： ( 1 )自2 0 0 7 年1 月至2 0 0 8 年6 月期间，采用组织切片和h e 染色法，对烟台沿海扁 玉螺的生殖腺发育过程进行了观察。根据性腺发育的组织学特征，将扁玉螺生殖 腺发育过程分为增殖期、生长期、成熟期、排放期和休止期5 个时期；扁玉螺在 烟台沿海每年一个生殖周期，繁殖季节为5 月上旬至8 月中旬，繁殖盛期为6 月 上旬至7 月下旬，繁殖盛期水温为1 9 - 2 3 6 ，雌、雄性生殖腺发育不同步，有 雄性早熟现象。 ( 2 ) 研究了扁玉螺的产卵习性，调查了烟台海区扁玉螺卵块最早出现在5 月上中旬， 以高潮区卵块数量较多，卵块上口平均直径为3 5 1 c m ，下口平均直径为3 6 8 c m ， 平均高度为2 3 2 c m ，平均重量为8 3 4 9 ，每个卵块的怀卵量差异较大，数量最多 的可达3 9 0 0 0 0 余粒，最少的约为8 0 0 0 0 余粒。 ( 3 ) 在实验室条件下人工孵化扁玉螺的卵块，观察了扁玉螺的胚胎发育和幼虫发育过 程，其早期发育属间接发生型，其胚胎发育包括卵裂期、囊胚期、原肠胚、膜内 担轮幼虫、膜内面盘幼虫；幼虫发育包括面盘幼虫、后期面盘幼虫和匍匐幼虫； 匍匐幼虫经变态后发育为稚螺。 ( 4 ) 研究了在室内条件下水温、盐度、饵料和p h 等因子对扁玉螺浮游幼虫生长和存 活的影响。结果表明，在水温1 9 , 、, 2 6 、盐度2 9 , - - 一3 5 、p h7 5 - 8 5 时幼虫生长 较好，角毛藻和小球藻是扁玉螺浮游幼虫的适宜饵料。 关键词：扁玉螺：生殖腺；繁殖习性；早期发育；环境因子 a b s tr a c t 1 1 1 ee m b r y o n i cd e v e l o p m e n to ft h e as l u gn e v e f i t a d i d y m a w a so b s e r v e da n dd e s c r i b e da t d i f f e r e n tt e m p e r a t u r e ，b r a c k i s hw a t e rs a l i n i t ya n dp hg r o u p sa n dt h em a i nf a c t o r sa f f e c t i n gt h ev e l i g e rl a r v a r e l e a s e dw e r ea l s oe x a m i n e di na r t i f i c i a lc o n d i t i o n s i no r d e rt op r o v i d ee x p e r i m e n t a lb a s i sf o rm a n t l ef r o m n e v e r i ad i d y m aw e r ec u l t u r e di nt h er e s e a r c h t h em a i nr e s u l t ss h o w e d ： l ：t h eg o n a dd e v e l o p m e n to ft h en e v e r i t ad i d y m af r o my a n t a is e aa r e aw a so b s e r v e db yu s i n gt h e t i s s u es l i c ea n dh e c o l o r a t i o nt e c h n i q u e a c c o r d i n gt ot h eh i s t o l o g i c a lc h a r a c t e r , t h eg o n a dd e v e l o p m e n t o fn e v e r i t ad i d y m am a yb ed i v i d e di n t ot h ef o l l o w i n gf i v es t a g e s ：p r o l i f e r a t i n gs t a g e ，g r o w i n gs t a g e ， m a t u r i n gs t a g e ，s p a w n i n gs t a g ea n dr e c o v e r i n gs t a g e t h er e p r o d u c t i v ec y c l eo fn e v e r i t ad d y m ai so n c ea y e a ri nt h ey a n t a is e aa r e a t h es p a w n i n gs e a s o ns t a r t sf r o mt h ee a r l yo fm a yt ot h em i d d l eo f a u g u s t , t h e i r s p a w n i n gp e a l 【i sf r o mt h ee a r l yo f j u n et ot h ee n do fj u l y t h er e s e a r c hr e s u l t sp r o v e dt h el a w so fg o n a d d e v e l o p m e n t , s u p p l e m e n t e dd a t ao fr e p r o d u c t i v eb i o l o g yo fn e v e r i t ad i d y m a , a n dh a da c t i v es i g n i f i c a n c e f o re x p l o i t a t i o na n du t i l i z a t i o no f n e v e f i t ad i d y m a 2 ：t h er e p r o d u c t i v eh a b i ta n dr e p r o d u c t i v ec a p a c i t yw e r es t u d i e di nt h i sp a p e r i t sr e p r o d u c t i v ep e r i o d i sf r o me a r l ya p i r l t h eu p p e ro p e n i n gm e a nd i a m e t e ri s3 6 8 e m ，t h ee n do p e n i n gm e a nd i a m e t e ri s 3 51 c m ， h i 曲i s2 3 2 c m ，t h ea v e r a g ee g gb l o c kw e i g h ti s8 3 4 9 ，t h ei n d i v i d u a lr e p r o d u c t i v ec a p a c i t yi s 8 417 4 3 912 4 5o na v e r a g e 3 ：e g gm a s s e so f n e v e r i t ad i d y m a 狮a r t i f i c i a l l yh a t c h e da tw a t e rt e m p e r a t u r e2 5 4 - - 2 6 。c a n db r a c k i s h w a t e rs a l i n i t y3 2 b a s e do nt h em o r p h o l o g i c a lc h a n g e ，e a r l yd e v e l o p m e n tc a nb ed i v i d e di n t o2s t a g e s ： e m b r y o n i cd e v e l o p m e n t ( i n c l u d i n gc l e a v a g e ，b l a s t u l aa n dg a s t r u l a ，e g g - t r o c h o p h o r aa n de g g - v e l i g e r ) a n d l a r v a ld e v e l o p m e n t ( i n c l u d i n gi n c u b a t i o n s t a g e ，b i gv e l i g e ra n dc r e e p i n gl a r v a e ) 4 ：e x p e r i m e n t sw e r ec a r d e do u ti nam a r i n ec u l t u r ef i e l do fs h a nd o n gp r o v i n c ef r o ma p r 2 0 0 6t o a p r 2 0 0 7 u n d e rt h ec o n d i t i o n so fc o n t r o l ! e ds e a w a t e rt e m p e r a t u r e ，s a l i n i t y ，f o d d e ra n dp h ，t h ei n f l u e n c e s o f t e m p e r a t u r ea n ds a l i n i t yo nt h eg r o w t ha n ds u r v i v a lo f n e v e r i t ad i d y m al a r v a ew e r es t u d i e dr e s p e c t i v e l y t h er e s u l t ss h o w e dt h a tt h es u i t a b l et e m p e r a t u r ew a s1 9 - 2 6 * c f o rl a r v a e ，s u i t a b l es a l i n i t yw a s2 9 3 5f o r l a r v a e t h eg r o w t hw a st h eb e s ta n dt h es u r v i v a lr a t ew a st h eh i g h e s ta ts e aw a t e rp hv a l u ef r o m7 5t o8 5 ， c h l o r e l l as a e e h a r o p h i l a a n d c h a e t o c e r o sm u e l l e r il e m m e r m a l m i sf i tf o rf o d d e r o ft h el a r v a eo f n e v e r i t ad i d y m al a r v a e k e yw o r d s ：n e v e r i t ad i d y m a ；s e xg o n a dd e v e l o p m e n t ；r e p r o d u c t i o nb e h a v i o r ；e g g - t r o c h o p h o r a ； e n v i r o n m e n t a lf a c t o r 一1 1 - 鲁东大学学位论文原创性声明和使用授权说明 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成 果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表 或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式 标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。 作者签名：文u庆 日期：2 0 p 7 年石月三日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向 国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权鲁 东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、 缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本学位论文属于 保密口，在年解密后适用本授权书。 不保密d 。 ( 请在以上相应方框内打“4 ”) 作者签名：刘庆 导师签名：麟。j y 叩 日期：肋7 年 日期：如7 年 6 旯t2 - , b 占月f 尹日 鲁东大学硕士学位论文 引言 扁玉螺n e v e r i t ad i d y 磁a ( r o d i n g ，1 7 9 8 ) 俗称“肚脐菠萝、“香螺，隶属于软体动 物门( m o l l u s c a ) ，腹足纲( 6 a s t r o p o d a ) ，前鳃亚纲( p r o s o b r a n a h i a ) ，中腹足目 ( m e s o g a s t r o p o d a ) ，玉螺科( n a t i c i d a e ) ，扁玉螺属( n e v e r i t a ) 。广泛分布于印度西 太平洋地区，如日本的北海道南部、本州、四国、九州，朝鲜和我国的渤、黄、东、南 海。扁玉螺生活于潮间带至浅海5 0 m 的细沙泥质海底，属广温性种类，我国南北沿海均有 分布。一般来说，海产贝类都具有高蛋白、低脂肪的特性，作为食用贝类，它们不但营养 价值高、口味鲜美，而且具有保健、食疗等功效。扁玉螺的个体较大，其贝壳可供观赏， 并可制作工艺品，其肉味鲜美、可供佐膳，广为沿海居民喜爱，是我国沿海的重要经济 腹足类，但由于扁玉螺是典型的肉食性贝类，喜以双壳类动物为食，长期以来一直被作 为双壳贝类养殖的敌害来防治，有关其繁殖生物学的研究尚未见报道。研究扁玉螺的繁 殖和早期发育，对水产动物资源的可持续利用、促进贝类养殖业的健康发展，有着重要 的意义。 扁玉螺具有重要的食用价值，目前主要是采捕野生资源，但是随着人们对扁玉螺需 求量的增大，自然资源量正在逐步减少，扁玉螺已成为潜在的人工养殖开发品种。现在 对于扁玉螺的研究，多见于对其形态、分布、组织化学、酶活性的研究，未见有对扁玉 螺繁殖及早期发育的研究，因此有必要对扁玉螺的繁殖与发育进行研究。研究扁玉螺繁 殖生物学以及早期发育，探明水温、盐度等外界环境因子对扁玉螺早期发育的影响，为 开发利用扁玉螺和进行人工养殖提供理论依据。 为了更深入地了解扁玉螺的繁殖与发育的生物学特性并利用其资源，本文以扁玉螺 为研究对象，对扁玉螺的繁殖习性、繁殖力、繁殖期、产卵量及卵块形态结构进行观察 研究，对其早期发育过程进行了连续的观察和记录，准确描述了各个时期发育的形态特 征，并研究了水温、盐度以及酸碱度等环境因子对扁玉螺早期发育的影响，以期为进一 步对玉螺属动物的研究提供基础资料。 鲁东大学硕士学位论文 第一章综述 1 1扁玉螺的生物学特性 1 1 1 扁玉螺的分类地位 扁玉螺a l e v e r i t ad i d y m a ( r o d i n g ，1 7 9 8 ) 俗称“肚脐菠萝 、“香螺，隶属于软体动 物门( m o l l u s c a ) ，腹足纲( g a s t r o p o d a ) ，前鳃亚纲( p r o s o b r a n c h i a ) ，中腹足目 ( m e s o g a s t r o p o d a ) ，玉螺科( n a t y c y d a e ) ，扁玉螺属( 1 v e v e r i t a ) 。扁玉螺是广温性种， 为我国具有养殖潜力的海水贝类之一，扁玉螺肉可食用，俗称“肚脐菠螺 ，其味鲜美， 其贝壳可供观赏，并可以制作工艺品，其肉可供佐膳，适应力强、市场价位稳定等特点， 成为贝类养殖中最重要和最有发展前景的品种之一，也是日前人们菜篮子中不可或缺的 水产品。它的育苗、养殖及加工产业将成为沿海地区新兴的特色产业，对渔业经济的发 展起着重要作用，但由于其为肉食性动物，喜食一些双壳贝类，故对海水养殖的牡蛎和蚶 类幼苗等种类有害。 1 1 2 扁玉螺的生活习性 扁玉螺生活于潮间带至水深5 0 m 的沙和泥沙质海底，通常在低潮区至1 0 m 左右的水深 栖息较多。常潜入沙内猎取其他贝类为食。烟台海区约在5 - - - 8 月产卵，受精卵和细沙粘 成围领状，此种广泛分布于印度一西太平洋海域，为我国南北沿海常见种，但北方多于南 方。此外，在日本北海道南部至九州，朝鲜半岛，菲律宾，印度尼西亚，澳大利亚以及印度 洋的南非，阿曼湾等地均有分布。 扁玉螺是较典型的肉食性贝类，对滩涂上的养殖贝类危害较大。用发达的足部在沙 底爬行，爬行过的地方留下一条宽阔而平坦的浅沟，在停止爬行的地方或形成一隆起沙 滩，或形成一凹洼，并留有一小圆孔，有时会用腹足做波浪形的游动。在几分钟内就能 钻入沙内7 8 厘米深捕食双壳贝类，当遇到食物时( 蛤类、竹蛏等双壳贝类) ，便停止 爬行，前足竖起，并以前足的底部朝向左、右和前方，估计是试探水流( x x 壳类滤食水 流) 方向，然后用后足慢慢向前靠近，并不时地用前足触摸，当触到一定位置时，即开 始伸出吻来，触动双壳类并调节自己的位置，吻又缩回，然后以后足的后部为固定点， 前足和后足的前部尽量斜向上扩伸，逐渐把双壳类包裹起来，这时吻又开始伸出触及贝 壳( 一般在双壳类壳顶附近) ，最后用吻的最前端吸附在贝壳上，分泌唾液，将贝壳溶 鲁东大学硕士学位论文 穿一个小孔，以齿舌吸取壳内的外套膜及内脏囊摄食n 1 。在海滩上经常会发现蛤壳上一 小孔，这大都是玉螺类摄食后留下的。 1 1 3 扁玉螺的经济价值 一般说来，海产贝类都具有高蛋白、低脂肪等特性，作为食用贝类，它们不但营养价 值高、口味鲜美，而且具有保健、养颜、美容、抗衰老等功效，其贝壳可供观赏，并可 以制作工艺品，其肉可供佐膳，是沿海居民喜爱的水产品之一。但该种为肉食性种类， 其足特别发达，加之发达的感觉器官有助于迅速发现食物，故该种对双壳类危害极大， 因此在贝类养殖场应列为被消灭的主要对象。为了防止该螺并利用这种生物资源，作者 开展了一系列的研究，对扁玉螺繁殖和早期胚胎发育进行研究，以期进一步为玉螺属动 物的研究提供基础资料。 1 2 扁玉螺的研究概况 由于扁玉螺具有一定的经济价值和研究价值，所以从2 0 世纪6 0 年代起，国内外研究 人员对扁玉螺进行了大量的研究，其中主要集中在扁玉螺消化酶以及过氧化氢酶和细胞 色素氧化酶等方面。 张玺等( 1 9 6 2 ) 、刘锡光等( 1 9 7 7 ) 、赵汝意等( 1 9 8 2 ) 、齐钟彦等( 1 9 8 9 ) 都对扁 玉螺的形态、分布做过观察描述。 小松茂美( 1 9 8 5 ) 嘲通过实验确定了扁玉螺属的染色体是2 n = 3 4 = 2 2 m + 8 s m + 4 s t ，；王 桂云( 1 9 9 5 ) 口1 对扁玉螺的染色体研究的结果为2 n = 3 4 = 1 6 m + 1 6 s m + 2 s t 。 崔龙波等( 1 9 9 9 ) h 1 对扁玉螺消化系统的解剖学和组织学进行了较详细的研究，为研 究扁玉螺的消化生理及预防扁玉螺对其他贝类养殖业的危害提供了理论依据；崔龙波等 ( 1 9 9 9 ) h 1 以组织化学方法对扁玉螺消化系统进行了较为详细的研究，为研究腹足类动物 的消化生理提供了理论依据；周雪莹等( 1 9 9 9 ) 啼1 用光镜和扫描电镜观察了扁玉螺鳃的 组织学和表面结构；郑怀平等( 2 0 0 2 ) 删测定和分析了扁玉螺不同部位的蛋白质和脂肪 的含量；王资生等( 2 0 0 3 ) 西1 在实验生态条件下，研究了软体部干重以及水温对不同个体 大小扁玉螺耗氧率和排氨率的影响。 李太武等( 1 9 9 6 ) 髓3 对大连沿海常见腹足纲的扁玉螺、香螺，瓣鳃纲的栉孔扇贝、 菲律宾蛤仔、四角蛤仔等几种贝类的脂肪酸组成、含量进行了研究，并同海参、对虾、 三疣梭子蟹进行了比较，从而证明了这几种贝类的营养价值；刘迅( 1 9 9 7 ) 口1 对扁玉螺 鲁东大学硕士学位论文 不同消化器官对不同植物成份的消化能力进行了初步的研究，对消化酶活性进行了测 定；宁黔冀等( 1 9 9 9 ) 晦1 从扁玉螺肝脏中提取细胞色素氧化( c y t o c h r o m e o x i d a s e ，c c o ) ， 研究了离体( i n v i t r a ) 条件下f e 3 + ，c u 2 + ，z n 2 + 三种不同重金属离子对c c o 的影响，探讨了海 洋生物对重金属积累及其影响的生物学意义；宁黔冀等( 1 9 9 9 ) 口1 还以扁玉螺为试验材 料，研究了离体条件下，f e ，c u ，z n 等必需微量元素和非必需元素p b 对细胞色素氧化酶 ( c y t o c h r o m eo x i d a s e ，c c o ) 及过氧化氢酶 3 0 ) 。 ( 4 ) 水温对扁玉螺浮游幼体生长及存活影响的实验是在1 0 0 0 m1 的烧杯内进行。 将前一天晚上从卵块内孵出的浮游幼体，用筛绢网浓缩于各梯度盐度的自然海水中，浮 游幼体投放密度为1 3 - - - 1 6 个ml ，水温2 5 。c ，日换水1 次，每次换全量的1 2 ，换水后投 饵，饵料为角毛藻和绿藻和小球藻。每天镜检一次，测量其生长情况。 ( 5 ) 以水温2 0 时、1 9 卵块的孵化数量为基准，计算不同水温时的相对孵化率。 5 1 。2 结果 5 1 2 1 水温对胚胎孵化时间以及卵块孵化率的影响 水温对扁玉螺卵裂速度的影响是显著的。如图5 1 所示：在2 0 ，2 3 ，2 5 ，2 8 ，3 1 ，3 2 5 时，胚胎发育的速度随水温的增加而加快，水温在2 0 时发育至面盘幼虫孵化的时 间为1 0 天，而水温升到2 3 时，发育至面盘幼虫孵化的时间为8 天，水温升到2 5 时所 需的时间约为6 天，水温升到2 8 时所需的时间约为5 天，相比2 0 。c 时孵化的时间缩短了 一倍，但幼虫孵化率却相对降低了5 5 ：当水温升到3 1 和3 2 5 c 时卵块孵化的时间缩 短到4 5 天和3 天，当水温升到3 4 时，分裂球分裂至1 6 个细胞后，有一些可发育到囊 鲁东大学硕士学位论文 胚期，有的逐渐解体，但在本实验中有极少一部分可以发育至面盘幼虫。水温在2 0 - 2 5 时，有7 0 - - 8 0 的胚胎个体能发育至面盘幼虫，由此推测扁玉螺胚胎发育的适宜水 温在2 0 - - - 2 5 之间。 1 2 1 0 s8 厘 窖6 耋4 2 0 2 02 32 52 8 3 l3 2 5 水温( ) 图5 1 水温对扁玉螺卵块孵化时间的影响 f i g 5 1w a t e rt e m p e r a t u r eo ne g gh a t c h i n gt i m eb l o c ko fn e v e r i t ad i d y m a 水温对扁玉螺卵块相对孵化率的影响也是比较显著的，由图5 2 看出当水温在2 0 - 2 5 。c 时对扁玉螺卵块的相对孵化率的影响不是很显著，在水温为2 0 。c 时扁玉螺1 9 卵块的 孵化数是2 7 6 8 9 ，在水温为2 5 时1 9 卵块地孵化数是1 9 2 0 2 ，当水温逐渐升高时扁玉螺卵 块相对孵化率逐渐降低，水温为2 8 c 时1 9 卵块的孵化数为1 2 4 6 6 ，而当水温升高到3 4 时1 9 卵块的孵化数降j ! u 4 0 0 0 ，即使孵化出来的幼虫也发生变态，出现畸形，很快死亡。 由图2 我们同时也可以看出扁玉螺孵化的适宜水温为2 0 , - - - 2 5 。 温度 图5 2 水温对扁玉螺卵块相对孵化率的影响 f i g 5 - - 2 w a t e rt e m p e r a t u r eo ne g gh a t c h i n gr a t et h ei m p a c to ft h er e l a t i v eb l o c ko fn e v e r i t ad i d y m a 5 1 2 2 水温对初孵化面盘幼虫个体大小及幼虫生长发育的影响 水温对扁玉螺初孵化面盘幼虫个体大小的影响见表5 1 ，可以看出，随着水温升高， - 2 5 伯加加。 鲁东大学硕士学位论文 初孵化面盘幼虫的个体基本上也逐渐增大，但都比水温2 0 。c 时孵化的幼虫个体小。 表5 一l 水温对扁玉螺初孵化面盘幼虫大小的影响 t a b l e 5 一lw a t e rt e m p e r a t u r eo nt h es i z eo fh a t c h i n ge a r l yv e l i g e ro fn e v e r i t od i d y m a 注：p o o l 为差异显著 由图5 3 可以看出水温对扁玉螺孵化面盘幼虫生长发育的影响较显著，当水温 2 0 - - - , 2 8 * ( 2 时幼虫的平均壳宽日增长在2 6 9 p r o 以上，水温2 5 * ( 2 时达到最大壳长日增长 7 1 4 胁，幼虫期壳宽日增长也在2 5 时达到最大6 6 2 胁，在水温2 0 , - - , 2 5 ( 2 时扁玉螺幼 虫的日增长量有随水温的增长在逐渐增长的趋势，水温2 5 , - - , 3 1 时扁玉螺幼虫的日增长 量有随水温的增长而逐渐下降的趋势。 2 0 2 3 2 52 83 l3 2 5 温度( ) 图5 3 不同水温对扁玉螺幼虫日增长量的影响 f i g 5 3d i f f e r e n tw a t e rt e m p e r a t u r et ot h ef l a tj a d es n a ill a r v a eo nt h ed a yi n c r e a s eo fn e v e r i t ad i d y m a o 8 6 4 2 o iv一攀鼻 鲁东大学硕士学位论文 5 1 3 小结 海洋贝类分为广温性和狭温性两类，从成贝适宜水温来看，扁玉螺属于广温性种类， 一般来说成贝对水温的耐受力强，幼虫的耐受力要比成贝弱，因此它的适宜生长水温范 围要比成贝窄。不同发育阶段的幼虫个体对水温有不同的适宜范围，在适宜范围内水温 越宽、生长越快，这是因为水温宽时，幼虫摄食活跃，对所摄取饵料异化速度加快，在水温 高时，酶的活力增强，加速了对饵料的消化和体内同化作用，从而促进了幼虫的长，在低 温下某些酶渐渐失去活性，不能消化所摄取的食物，因而影响幼虫的生长。在适温范围以 上时，出现畸形发育或很快死亡叭删，在适温范围以下时，出现停止进一步发育的现象。 在适温范围以内，即使相差几度，发育速度也有显著的差异，而且在发育初期对水温的适 应范围较窄，随着发育的进行，适应范围愈来愈广。 水温是影响生物繁殖、生长和发育的主要因子之一。水温不仅影响扁玉螺胚胎的孵 化率而且影响胚胎发育的速度。2 0 到3 2 5 。c 的水温对胚胎发育的影响比较大，不同水 温梯度组的发育不再同步明，时间相差大，扁玉螺在水温1 7 8 2 3 6 。c ，盐度3 2 的环境 中经2 7 小时发育到担轮幼虫，此时卵块呈淡黄色，5 7 天发育到平均起始壳长为 2 0 6 1 1 啪，平均起始壳宽为1 5 2 3 1 1 | f n 的面盘幼虫，再经过一天左右的时间，卵块散落， 只剩下一摊散沙，幼虫孵化出膜，在水中营浮游生活。本文所提幼虫是从卵块内的卵膜 “孵出”即指面盘幼虫从卵膜破裂释放出膜的过程。 5 2 盐度对胚胎以及幼虫生长存活的影响 5 2 1 实验方法 ( 1 ) 试验开放性实验室内进行，设9 个盐度梯度，每个盐度梯度设3 个平行试验组。 ( 2 ) 卵块内幼体的孵出实验是在1 0 0 0 ml 的烧杯内进行，从扁玉螺卵块中选取颜色 相近完好健康的卵块( 经抽样镜检观察，卵块内幼体处于同一发育阶段) ，随机取5 个卵块 放入9 个不同的盐度组内，每天换水1 次，每次全量换水，早晨观察其颜色变化及幼体孵 出情况，取3 0 个孵出幼体测量其平均壳长壳宽。 ( 3 ) 盐度对扁玉螺浮游幼体生长及存活影响的实验是在1 0 0 0 ml 的烧杯内进行。将 前一天晚上从卵块内孵出的浮游幼体，用筛绢网浓缩于各梯度盐度的自然海水中，浮游 幼体投放密度为13 16 个ml ，水温2 5 ，日换水1 次，每次换全量的1 2 ，换水后投 饵，饵料为角毛藻和小球藻。每天镜检一次，测量其生长情况。 鲁东大学硕士学位论文 ( 4 ) 以盐度3 2 ，1 9 卵块的孵化数量为基准，计算不同盐度时的相对孵化率。 5 2 2 结果 5 。2 。2 。1盐度对胚胎发育以及卵块孵化率的影响 在相同水温、光照、卵块的幼体处于同一发育时期的条件下，试验的9 个不同盐度 组中，只有盐度为2 0 - 3 8 的8 组可以孵出幼体。其中盐度为3 8 组的虽然可以孵化并存 活，但只存活1 天，第2 天全部死亡，盐度为4 0 组发育到多细胞期就已经解体，不能 孵化。 通过图4 可以看到在盐度2 0 ，- - 4 0 组共8 个盐度梯度的卵块相对孵化率呈现先上升 后下降的趋势，在盐度3 2 组孵化率达到最大，1 9 卵块的孵化数达到2 7 6 8 9 ，其中盐度 在2 0 - - - 3 2 组6 个梯度组的卵块幼虫孵化率呈现逐渐上升的趋势，盐度3 2 组达到顶峰， 然后在3 2 一- 4 0 组3 个盐度梯度之间卵块幼虫相对孵化率呈现逐渐下降的趋势，在盐度 为4 0 组达到最低，孵化率为0 。 2 02 22 42 62 93 53 84 0 盐度 图5 4 不同盐度对扁玉螺卵块相对孵化率的影响 f i g 5 4e f f e c to fs a l i n i t yo nd i f f e r e n tf l a tj a d es n a i le g gh a t c h i n gr a t et h ei m p a c t o ft h er e l a t i v eb l o c ko fn e v e r i t ad i d y m a 5 。2 。2 。2 盐度对初孵化面盘幼虫个体大小及生长发育的影响 盐度对扁玉螺初孵化面盘幼虫个体大小的影响见表5 2 ，可以看出，盐度过低或过 高时，初孵化面盘幼虫的个体大小都比水温2 0 c 时孵化的幼虫小。 o o o o o 0 o o o 8 7 6 5 4 3 2 l 料葚婺忉桑 鲁东大学硕士学位论文 表5 - - 2盐度对扁玉螺初孵化面盘幼虫大小的影响 e f f e c t so fs a li n i t yo nt h ee a r l yv e li g e rh a t c h i n go fn e v e r i t ad i d y m a 注：p o 0 5 为差异不显著 由图5 可以看出盐度对扁玉螺孵化面盘幼虫生长发育的影响显著，盐度2 0 - - - 2 2 组 孵化幼虫日增长量变化不是很显著，其平均壳长日增长为7 0 6 p r o ，壳宽日增长为 4 2 3 p r o ，2 4 - 2 9 组壳长日增量变化不显著，平均壳长日增长为2 5 4 p r o 而壳宽日增量有 逐渐上升的趋势，由0 1 7 p r o 上升到1 2 岫，盐度2 9 3 5 组其孵化幼虫日增长量先上升 后下降，盐度为3 2 的正常自然海水中孵化幼虫日增长量达到最大，壳长日增长和壳宽 日增长分别为7 1 4 p r o 和6 6 2 p r o 。在盐度为2 4 组壳宽增长缓慢，这可能是由于浮游幼体 对盐度的不适应，发育畸形，在此盐度下的壳宽生长十分缓慢，导致测量活体的壳宽增长 呈现缓慢的趋势。值得注意的事，我们发现在盐度为2 0 - - - 2 4 的低盐度环境中，虽然幼 虫历经7 2 小时全部死亡，但在7 2 小时中其平均壳长日增长为5 4 6um ，壳宽日增长 虽 v 删 业 磐 皿；u 工 2 02 2丢2 62 93 23 5 盐度 图5 - - 5 不同盐度对扁玉螺幼虫日增长量的影响 e f f e c to fs a l i n i t yo nd i f f e r e n tf l a tj a d es n a i ll a r v a ei n c r e a s et h ei m p a c t - 2 9 o 8 6 4 2 o 2 鲁东大学硕士学位论文 o fd a yo fn e v e r i t ad i d y m a 为2 8 7g m 。在盐度为2 2 的环境中虽然幼虫历经7 2 小时全部死亡，但其壳长日增长达 到7 2 3 z m ，壳宽日增长达到4 2 7 m ，可见扁玉螺幼虫在危及其生存的极限盐度中， 暂时还能继续生长。 5 2 3 小结 在实验当中，将采回的卵块直接放入各盐度梯度中进行试验以及将在正常环境中发 育到不同发育阶段的胚胎放入各盐度梯度的环境中继续发育，研究胚胎不同发育阶段对 盐度的耐受力，实验结果表明，处于不同发育阶段的扁玉螺对盐度有不同的适应范围， 卵裂期对盐度变化最敏感，早期胚胎发育对盐度的适应范围要比幼虫的存活和生长的盐 度范围狭窄，幼虫变态以后，对盐度的耐受范围便进一步扩大。我们观察到幼虫在适宜 盐度中比在不利的盐度中能更早完成变态，同时，幼虫在适宜盐度中生长率更宽，由此 推测盐度也会影响胚胎发育速度，影响幼虫的浮游期。k i n n e n 叫指出，超过盐度忍受范 围会引起生物体渗透压的改变，渗透压的改变不仅会降低动物的代谢速率，同时也会影 响代谢过程的效率n 叫，本试验所做的2 0 - - 4 0 共九组盐度梯度当中，通过实验结果我们可 以总结出扁玉螺受精卵早期的胚胎发育以及孵化出的幼虫对低盐度的耐受力要远远超 过对宽盐度的耐受力，但目前还不清楚这种耐低盐性源自遗传变异还是生理调节的适应 现象，这可能与扁玉螺生长在潮间带和入海口附近的缘故。 在盐度对扁玉螺浮游幼体生长影响的实验中( 见图5 ) ，在2 0 - - 3 5 共7 组梯度盐度中， 盐度为3 2 的正常自然海水中孵化幼虫日增长量达到最大，壳长日增长和壳宽日增长分别 为7 1 4 p m 和6 6 2 m ，其幼虫的适宜盐度为2 9 - - 3 5 之间，扁玉螺卵块在盐度2 0 - - 3 8 内都可 以孵出幼体，随着盐度的上升其孵化率先上升，在盐度3 2 的海水中发育孵化率达到最大， 然后孵化率逐渐下降，盐度为3 8 的环境中虽然可以孵化，但幼虫只能存活2 4 d x 时，当盐 度上升到4 0 时没有幼虫孵化，由此可以推知，扁玉螺卵块孵化的上限盐度为4 0 。 本实验设计的各组盐度梯度较大，未能考察出其最适范围。因此，今后有必要在盐度 2 9 , - - - 3 5 之间减小组间盐度差，细化分组n 0 2 删，进一步深入探讨其孵化和生长的最适盐度 范围。 鲁东大学硕士学位论文 5 3 酸碱度对胚胎以及幼虫生长存活的影响 5 3 1 实验方法 ( 1 ) 试验在开放性实验室内进行，设7 个梯度，每个梯度设3 个平行试验组。 ( 2 ) 卵块内幼体的孵出实验是在1 0 0 0 ml 的烧杯内进行，从扁玉螺卵块中选取颜色 相近完好健康的卵块( 经抽样镜检观察，卵块内幼体处于同一发育阶段) ，随机取5 个卵块 放入7 个不同的梯度组内，每天换水1 次，每次换全量1 2 ，早晨观察其颜色变化及幼体孵 出情况，取3 0 个孵出幼体测量其平均壳长壳宽。 ( 3 ) 酸碱度对扁玉螺浮游幼体生长及存活影响的实验是在1 0 0 0 ml 的烧杯内进行。 将前一天晚上从卵块内孵出的浮游幼体，用筛绢网浓缩于各酸碱梯度的自然海水中，浮 游幼体投放密度为1 3 - - 1 6 个ml ，水温2 5 c ，日换水1 次，每次换全量的1 2 ，换水后投 饵，饵料为角毛藻、小球藻。每天镜检一次，测量其生长情况。 ( 4 ) 以p h 8 0 时l g 卵块的孵化数量为基准，计算不同酸碱度时的相对孵化率。 5 3 2 结果 5 3 2 1 酸碱度对胚胎发育以及卯块孵化的影响 在相同水温、光照、卵块的幼体处于同一发育时期的条件下，试验的7 个不同p h 值组中，p h 为6 5 - - 9 5 的7 组都可以孵出幼体。其中p h 为9 5 组的虽然可以孵化并 存活l 天，但大多为畸形，且第2 天全部死亡。 通过图5 6 可以看到在p h 为6 5 - - 9 5 的7 个梯度的卵块相对孵化率呈现先上升 后下降的趋势，在p h 为8 0 组相对孵化率达到最大，l g 卵块的孵化数达到1 9 2 0 2 ，其 中p h 在6 5 , - - , 8 0 梯度组的卵块幼虫孵化率呈现逐渐上升的趋势，p h 为8 0 组达到顶峰， 然后在8 0 - - - 9 5 组3 个p h 值梯度之间卵块幼虫孵化率呈现逐渐下降的趋势，在p h 为 9 5 组相对孵化率达到最低，孵化个数为1 0 2 2 6 。 鲁东大学硕士学位论文 8 0 7 0 錾： 禁4 0 羹3 0 2 0 1 0 o 6 577 5 88 599 5 p h 值 图5 - - 6p h 值对扁玉螺卵块相对孵化率的影响 f i g 5 6 e f f e c to fp ho nt h ef l a tj a d es n a i le g gh a t c h i n gr a t et h ei m p a c t o ft h er e l a t i v eb l o c ko fn e v e r i t ad i d y m a 5 3 2 2 酸碱度对初孵化面盘幼虫个体大小及生长发育的影响 p h 值对扁玉螺初孵化面盘幼虫个体大小的影响见表5 3 ，从表中可以看出，p h 值 过高或过低，幼虫大小均不正常。 表5 3p h 值对扁玉螺初孵化面盘幼虫大小的影响 t a b l e 5 3e f f e c t so fp ho i lt h ee a r l yv e li g e rh a t c h i n go fn e v e r i t ad i d y m a 注：p o 0 1 差异显著，p 0 。0 5 为差异不显著 酸碱度对扁玉螺孵化面盘幼虫生长发育的影响较显著，由图可以看出p h 值对扁玉 螺卵块孵化幼虫日增长量的影响比较显著，p h 值7 o 7 5 和8 5 - 一9 0 组孵化幼虫日增 长量变化不是很显著，在p h 值7 o 9 0 组之间其孵化幼虫日增长量先上升后下降，p h 值为8 o 的正常自然海水中孵化幼虫日增长量达到最大，壳长日增长和壳宽日增长分别 为7 1 4 啪和6 6 2 1 1 m ，在p h 值7 o 7 5 和8 5 9 0 组体长增长缓慢，这可能是由于浮 游幼体对生活环境的不适应，值得注意的事，通过实验结果我们可以得出幼虫对碱性环 境的适应能力要比酸性环境的适应能力强。 鲁东大学硕士学位论文 虽 v 稠 业 靶 皿 6 577 588 599 5 p 啦 图5 7 酸碱度对扁玉螺孵化幼虫日增长量的影响 f i g 5 7e f f e c to fh to nd i f f e r e n tf l a tj a d es n a i ll a r v a ei n c r e a s et h ei m p a c to fd a yo fn e v e r i t ad i d y m a 5 3 3 小结 5 3 3 1 不同酸碱度对初孵化面盘幼虫大小以及生长的影响 海水一般呈弱减性，引起海水呈酸性主要有下列几个原因n 1 制：大气中c o 。的溶解， 海洋生物的呼吸作用，海水中有机物含量的升宽。海水的p h 值对贝类幼虫的生长影响也 较大。超过幼虫生长的适宜p h 值范围，会导致贝类幼虫生长停止、畸形，甚至死亡。海 水的p h 值为7 5 8 3 ，贝类幼虫的适宜p h 大致也在这个范围。随着幼虫的发育，适宜的 p h 值范围呈增大的趋势。在p h 为6 5 以下9 5 以上的条件下浮游幼虫存活率很低，接近 零存活率。p h 值对贝类幼虫的影响，主要是改变了血液及围心腔液的p h 值，从而抑制心 脏的搏动n 州1 4 】。 在酸碱度试验当中，可以得出p h 值在6 5 到7 0 之间的生存环境对孵化幼虫起始 体长影响显著。p h 值在7 9 5 共6 个p h 值梯度组对扁玉螺卵块孵化幼虫的起始体长影 响并不显著，平均起始壳长为2 1 7 1 3 p r o ，起始壳宽为1 5 7 6 1 p r o 。由此可以得出扁玉螺 幼虫对酸性环境的适应能力较差。 浮游幼虫在高p h 值海水中生长不稳定，在低p h 值海水中存活率很低，适宜范围为 7 o o 9 0 0 左右，以p h 值8 0 左右幼虫存活率较高，生长较好，但在p h 值6 5 以下及 9 5 以上的条件下存活率较低。另外水质对幼虫的生长也非常重要，如水处理不彻底， 原生动物会乘虚而入，大量繁殖造成育苗失败，其危害主要在浮游幼虫期。原生动物不 但会噬食受精卵，甚至钻人卵膜内吃食胚胎，有的还会寄生于幼体体表，同时能产生大 量毒素，危害受精卵和幼体n 峥u 引。为了杜绝原生动物危害，可以采取如下措施：首先使 鲁东大学硕士学位论文 用砂滤海水，再者，一旦发现原生动物，可以大量换水，消除水中的有机质，清理原生 动物和抑制其繁殖。 5 3 3 2 酸碱度对卯块孵化的影响以及幼虫生长的适宜酸碱度 在酸碱度对扁玉螺浮游幼体生长影响的实验中，p h 值6 5 - 9 5 共7 个梯度组中， p h 值为8 的正常自然海水中孵化幼虫日增长量达到最大，壳长和壳宽日增长分别为 7 1 4 1 j _ m 和6 6 2 t j l n ，由此我们推