陕西省延长县中学高中生物《52 植物种苗脱毒技术》导学案 中图版选修1.doc

延长县中学学生自主学习导学案科 目生物课 题课型设计人审查人审批人序号学习 目标1.了解植物病毒的侵染规律及分布特点。2.掌握作物脱毒的培养过程。3.了解应用脱毒种苗的实践意义。【自主学习】1 农作物在种植过程中经常会受到 、 和 等病原体感染，导致产量降低，品种退化。2分生区一般不会受到病毒侵染。在植物生长过程中，侵入植物体的病毒可以通过 和 扩散到所有的组织器官，但是植物的茎尖等分生组织处于 阶段，其组织内 还未形成。此时植物体内的病毒只能通过 移动到分生区，而这一移动过程远不及 速度。所以分生区一般不会受到病毒侵染。3种苗脱毒：把 从感染病毒的植株上剥离，在 条件下进行组织培养，从而获得不含 的 ，这一过程称为种苗脱毒。【合作学习】实践案例马铃薯脱毒苗的培养1材料用具：略。（注意：这里所提到的ms培养基是灭完菌的）2活动程序（1）取材和消毒剪下后用 冲洗10min，在无菌室内用 消毒后，再用 冲洗23次。（2）剥离和接种 在40倍 下操作，用解剖针细心剥取所需的茎尖（约0.10.5cm），将茎尖接种于ms培养基上， 接触培养基。（3）培养将接种的茎尖置于25c15003000lx光照条件下培养。（4）移栽 茎尖长成34片叶的小植株，即可移栽。3结果分析（1）检测马铃薯脱毒是否成功（2）计算脱毒成功率探究活动1草莓脱毒苗的培养2探究切取茎尖的最佳长度（设计对照实验，自变量是 ）【当堂检测】1马铃薯可以进行的生殖方式是（ ） a出芽生殖和有性生殖 b分裂生殖和营养生殖 c营养生殖和有性生殖 d出芽生殖和营养生殖 2马铃薯利用它的块茎进行无性繁殖，种植的世代多了以后往往会感染病毒而减产，为此农户都希望得到无病毒的幼苗进行种植。获得无病毒幼苗的最佳办法是（ ） a选择优良品种进行杂交 b进行远缘植物体细胞杂交 c利用茎尖进行组织培养 d人工诱导基因突变 3植物组织培养过程的顺序是（ ） 外植体 根、芽 愈伤组织 脱分化 再分化 植物体 a b c d 4科学工作者把胡萝卜的韧皮部细胞分离出来，将单个细胞放入培养基中培养，获得了许多完整的植株，这些植株的共同特点是（ ） a彼此性状相似 b变异频率较高 c单倍体 d都是纯合子【课堂小结】 【课后练习】 课本66页1、2题【自学反馈】【背景知识】无病毒苗的获得：（一）材料的培养和灭菌 为了获得无菌的茎尖，应把供试植株种在无菌的盆土中，放在温室栽培。浇水要浇在土中，不要浇在叶片上。如材料取自田间，可切取插条，在实验室内进行溶液培养。由这些插条的腋芽长成的枝条，其污染程度比直接从田间植株取来的枝条少得多。自外，定期喷施内吸杀菌剂（如0.1%多菌灵和0.1%链霉素）也十分有效。（二）茎类剥离 取幼苗茎尖23cm小段，剥去可见的大叶，放在烧杯内用自来水冲洗1h左右，移入无菌室进行严格消毒。先用95%酒精快速浸泡一下，再放入5%的漂白粉溶液内消毒710min（也可用市场上出售的次氯酸钠溶液稀释为5%），然后用无菌水冲洗34次，在双筒解剖镜下一手用细镊子将茎芽按住，另一手用解剖针仔细地将幼叶剥去，最后露出圆滑的生长点，用注的针头侧刃或自制的解剖针，仔细地切取带有12个叶原基的生长点，随即接种到试管培养基上进行培养。这样外植体（生长锥带12个原叶基）的培养，严格来说，应称为分生组织培养。 以上操作必须严格在无菌条件下的超净工作台中进行，所用器具都应浸泡于70%的酒精中，使用前要在究竟灯上烧灼灭菌，注意不使解剖针、刀太烫，以免损伤组织。解剖镜台应垫载玻片，每剥离一个茎尖应以酒精棉团擦拭，手也应经常用70%酒精擦试。茎尖很幼嫩，暴露时间越短约好。因为超净台的气流和酒精灯发出的热都会使茎尖迅速变干。（三）茎尖培养 目前常使用的的基本培养基是ms培养基或white培养基，它有较高浓度的无机盐，对促进组织分化和愈伤组织生长是有利的。在培养基中可酌情添加5%10%椰乳，0.11.0mg/l的吲哚乙酸、萘乙酸、苄基腺嘌呤等，有的还需添加活性炭。根据培养种类不同，添加的生长调节剂可适当调整。 茎尖培养的生长可能有4种类型： 组织不增大，不久变褐死亡，这可能是生长点受伤所致。 组织渐变绿，但体积增大缓慢，可把组织转到naa浓度高于0.05mg/l的培养基上，并提高温度以加速其生长。 组织基部不产生或少量产生愈伤组织，而生长点发育正常，一个月内可形成无根的小植株，这是最理想的情况。当长有23片西欧啊叶时，应把小植株转到无生长素的培养基上，促进生根。 茎尖基部产生大量愈伤组织而生长点很少伸长，不理想。这时应把这些愈伤组织转移到无生长素的培养基上，并降低培养温度，以抑制愈伤组织生长促进其分化。（四）提高脱毒效果 感染了病毒的蜘蛛在切取茎尖进行培养之前，进行高温处理、低温处理或化学处理，可以提高脱毒效果。1. 高温处理又称温热疗法。某些病毒受热以后不稳定，失去活性。根据这个原理，把植物放在高于正常温度的环境中，组织内部的病毒受热后部分或全部钝化，但寄主植物的组织很少或不会受到伤害。 高温处理有两种方法：（1）汤浸渍处理，适用于切下的材料，在50c左右的温水中浸渍数分钟至数小时，方法简便易行但易致材料受伤。 （2）热风处理，将生长的盆栽植物移入室内或生长箱内，处理温度和时间因植物种类和器官生理状况而异。一般为3540c，短则几十分钟，长可达数月。 每一种植物高温处理有他的临界温度，超出这个温度或温度虽在此范围内但处理时间过长，组织就受伤。可以采用变温方法，即每天40c处理4 h，1620c处理20 h，这样，既可保持芽眼的活力，亦可清除芽眼中幼叶的病毒。2. 低温处理，亦称冷疗法。菊花植株在5c条件下分别处理4个月或7.5个月，没有菊花矮化病毒（csv）的无病毒苗分别是67%和73%，而没有菊花褪绿斑驳病毒（ccmv）的无病毒苗分别是22%和49%，未经处理的茎尖则无脱毒效果。3. 化学处理，又称化学疗法。一些化学药品如嘌呤和嘧啶；类似物、氨基酸、抗生素处理，可在某种程度上抑制植物体内或离体叶片内病毒的合成，但仍不能是病毒失活。近年发现三氮唑核苷（1d呋喃核糖1，