研发部制度.doc

1 研发事业部制度汇总 第一章第一章 实验室安全实验室安全 1 第二章第二章 无菌室管理制度无菌室管理制度 4 第三章第三章 细胞培养室管理制度细胞培养室管理制度 6 第四章第四章 研发部安全生产制度研发部安全生产制度 8 第五章第五章 发酵罐操作规程发酵罐操作规程 9 第六章第六章 干扰素分装工艺流程干扰素分装工艺流程 10 第七章第七章 干扰素后处理干扰素后处理 13 第八章第八章 退货处理退货处理 14 第九章第九章 抗菌肽生产管理制度抗菌肽生产管理制度 14 2 第一章第一章 实验室安全实验室安全 一 为实验人员更安全的进行试验工作 所有实验工作人员必须遵守以下 预防措施 1 所有实验室成员在工作期间必须始终穿着所提供的工作服 离开实验室 时 工作服须挂在指定地方 不得在实验室外冼工作服 2 所有工作人员在离开工作区必须洗手 并且要先脱去工作服和手套 3 食物和饮料不允许带入任何处理标本的房间 不允许在处理标本的任何 地方吸烟 不允许在处理标本的任何地方使用化妆品 4 手上的伤口和擦伤必须覆盖保护物 5 个人衣物不允许带入实验室 并且必须保存在带锁的柜子里 6 使用过的针头和一次性切割器必须丢入专门的带有盖子和桶内 以备安 全处理 防止容器过满盛装 7 打烂的玻璃必须放入坚硬的容器 不要用手 然后再放入黑色垃圾袋 8 所有在实验室使用的具有潜在污染性的物质都需去污染 最好先高压 再做处理 二 实验室物质处理 1 黑色塑料袋用来收集未污染或经高压过需处理的废物 2 废纸屡用来收未污染的废纸 用过的纸巾等 3 所有可能传染的物质必须高压或焚化 4 所有丢弃的标本 培养基和实验室废物必须放在专门容器里 5 用白色聚丙烯罐盛装 2 新鲜配置次氯酸液 以供工作中丢弃标本 污染 吸头 棉拭子临时处理待一天工作结束之后 再经高压处理 6 所有培养基的传染性物质都要高压 除非准备焚烧的 高压的最大好处 是使传染性物质离开实验室可保证安全 三 实验安全操作程序 1 工作人员在试验过程中应当防止病原微生物扩散和感染 3 2 试验过程中绝对禁止吸烟 饮食等 不要以手抚头面部等 3 细菌的分离培养 菌种开封 转种 研磨 稀释等操作 均应在生物安 全柜中进行 4 使用接种环进行操作时 接种环应在工作灯的内焰中燃烧 以避免菌液 或菌块飞溅 5 稀释菌液时 吸管 针管要缓慢插入试管或烧瓶底部 小心操作避免产 生气泡或气溶胶 6 使用注射器加样时 用过的针头切勿再重新入套或拔开注射器与针头 应直接放入锐器收集器 以免划破皮肤造成接种感染 7 进行毒菌操作过程中 不要穿戴巳经污染的防护性手套触摸门柄 仪器 或毒菌区以外区域 避免由于粗心扩大污染范围 8 试验结束后 操作过程中所有可能与生物危险物接触或被污染的试验器 械和物品 能够高压消毒的必须高压消毒 不能进行高压消毒的设备 仪器 应使用有效的消毒剂擦洗后再以紫外灯近距离长时间消毒 9 实验中发生意外污染情况 应立即通知主管人员并做好处理污染物和相 应区域的准备 不得擅自采用其它禁止的方法进行消毒处理 10 实验室内任何微生物的样本 废弃物都必须经高温高压灭菌后 方可按 一般垃圾处理 四 实验室污物处理及消毒操作程序 1 实验室含有生物危险物物品及被污染的一次性用品 试验完成后 应在 操作台或实验区域内以紫外灯近距离照射消毒 2 小时以上 再经高压消毒后方 可丢弃或焚烧 2 可重复使用的实验用品及器材 完成实验后 应在操作台或实验区域内 经紫外灯近距离照射消毒 2 小时以上后 再交有关人员进行高压消毒和煮沸洗 刷 3 实验用的试管 吸管 注射器 须装在加盖不漏的容器内 经高压灭菌 后取出 4 4 培养物或实验室垃圾 在丢弃前必须经高压消毒和紫外灯近距离长时间 照射处理 不允许积存垃圾和实验室废弃物 已装满的容器应定期运走 在去 污染或最终处置之前 应存放在指定的安全地方 通常在实验室区内 5 实验过程中 如致病菌液被打翻污染了操作台或地面 应以吸满 70 酒 精的卫生纸覆盖污染区 15 分钟以后卫生纸方可移去 五 意外事故处理程序 1 如果发生意外 必须立即通知实验室主管人员和医院生物安全办公室 并在有关人员的指导监督下对出事现场进行处理 绝对禁止未经报告而私自对 出事现场给予非规范的处理 2 实验过程中 如污染物溅落到身体表面 或有割伤 刺伤 烧伤 烫伤 等情况发生 应立即停止实验工作进行紧急处理 更换被污染的实验服 皮肤 表面用消毒液清洗 伤口以碘酒或酒精消毒 眼睛用无菌生理盐水冲洗 3 如果发生菌液溢出 含菌种的培养管破碎等 造成中 小面积污染 可 用比污染面积大 25 以上的纱布覆盖污染区域 边缘用脱脂棉围住 向纱布倾 倒 5 苯酚溶液或 70 的酒精 浸泡 2 小时以上 其间适量加溶液防止干燥 再 经紫外灯近距离 1 米内 照射 2 小时以上 被污染的器械 容器等立即浸泡 于 70 酒精中 2 小时以上 再次着防护衣进入房间 将污染溢出物和用于清洁 的纱布放入可耐受高压的双层塑料袋内并尽快高压 4 如果发生气溶胶污染或大面积污染 应立即停止实验并关闭实验室 对 污染区域进行紫外灯照射消毒过夜 第二天对污染区进行 24 小时封闭空气熏蒸 消毒 第二章第二章 无菌室管理制度无菌室管理制度 为了能够严格规范操作 无菌室特制定管理制度如下 一 无菌室应设有无菌操作间和缓冲间 无菌操作间洁净度应达到 10000 级 室内温度保持在 20 24 湿度保持在 45 60 超净台洁净度应达到 100 5 级 二 无菌室应保持清洁 严禁堆放杂物 以防污染 三 严防一切灭菌器材和培养基污染 已污染者应停止使用 四 无菌室应备有工作浓度的消毒液 如 5 的甲酚溶液 75 的酒精 0 1 的新洁尔灭溶液 等等 五 需要带入无菌室使用的仪器 器械 平皿等一切物品 均应包扎严密 高压蒸汽灭菌 含有葡萄糖的培养基灭菌条件为 118 30min 不含葡萄糖的 为 121 20min 六 每天上班之前必须将无菌室内及外缓冲间的空调开启 七 进入无菌室做实验之前 必须开启洁净台紫外灯辐照 30 分钟 室内紫 外灯辐照 30 分钟后方可进入无菌室进行操作 八 工作人员进入无菌室前 必须用肥皂或消毒液洗手消毒 然后在缓冲 间更换专用工作服 鞋 双手用 75 的乙醇再次擦拭 方可进入无菌室进行操 作 九 实验完毕后 洁净台面上所用物品必须归原位置 摆放整齐 并用 5 来苏水擦拭台面并开启紫外灯辐照消毒 30 分钟 以备他人使用 十 使用微量移液器时 用酒精擦拭 并且在使用完后调至量程最大值处 酒精灯的酒精应不少于其容积的 1 3 十一 实验中接种针每次使用前后 必须通过火焰灼烧灭菌 待冷却后 方可接种培养物 十二 实验后带有菌液的吸管 试管 培养皿等器皿应浸泡在盛有 5 来苏 水溶液的消毒桶内消毒 24 小时后取出冲洗 十三 进入实验室做实验 如有不慎将菌液洒在桌面或设备上 应立即用 5 石碳酸溶液或 3 的来苏水倾覆在被污染处至少 30 分钟 再做处理 工作衣 帽等受到菌液污染时 应立即脱去 高压蒸汽灭菌后洗涤 十四 凡带有活菌的物品 必须经消毒后 才能在水龙头下冲洗 严禁污 染下水道 6 十五 无菌室应每月检查菌落数 在超净工作台开启的状态下 取内径 90mm 的无菌培养皿若干 无菌操作分别注入融化并冷却至约 45 的营养琼脂培养基 约 15ml 放至凝固后 倒置于 30 35 培养箱培养 16 小时 证明无菌后 取 平板 3 5 个 分别放置工作位置的左中右等处 开盖暴露 30 分钟后 倒置于 30 35 培养箱培养 16 小时 取出检查 100 级洁净区平板杂菌数平均不得超 过 1 个菌落 10000 级洁净室平均不得超过 3 个菌落 如超过限度 应对无菌 室进行彻底消毒 直至重复检查合乎要求为止 十六 进入无菌室做实验后 使用任何设备 必须认真 清楚的填写好设 备使用记录 十七 每周六下午 对无菌室进行彻底消毒 用 0 1 新洁尔灭将屋顶 墙 面 地面 门 设备 内外 台面擦拭 室内工作服及拖鞋洗净 并开启紫外 灯消毒 30 分钟 十八 无菌室外缓冲间每天下班前 物品摆放整齐 并将台面 地面擦拭 干净 十九 每天下班前 该实验室负责人负责关闭不用设备电源 并锁门 二十 无菌室内禁止做一切不利于实验的事情 比如打闹 嬉戏 吃东西 等 第三章第三章 细胞培养室管理制度细胞培养室管理制度 细胞培养室是进行各种细胞培养的净化级实验室 所有进入实验室的人员 都必须遵守实验室有关的规章制度 接受实验室管理人员的管理并认真填写实 验室及设备使用记录 一 使用该实验室必须向管理人员提前预约 经管理人员同意后才可进入 本室工作 并由专人陪同 参观时不要妨碍实验室工作的正常进行 未经实验 管理人员同意 不得擅自进入细胞培养室 禁止带外来非实验人员进入实验室 或使用室内的仪器设备 每组同时操作人员不得超过两名 7 二 禁止在细胞培养室内进行非细胞培养类实验 室内常规用品不准随意 拿出室外 所有物品不得挪作它用 三 实验前超净工作台和无菌室开紫外灯照射 30 分钟 进入无菌室内 必须换拖鞋 戴口罩 更换无菌工作服 清洗双手 用 75 酒精擦手 四 带入无菌间的物品必须经过灭菌处理 严禁将与实验无关的易燃 易 爆及其他有毒有害物品带入细胞室 五 实验人员在进行试验前必须熟悉试验内容 操作步骤及各类仪器的性 能和操作方法 并做好必要的安全防护 使用仪器前必须经过技术培训 并严 格按 操作规程 进行操作 未经管理者同意不得擅自更改仪器程序 使用后 仪器恢复原位 并填写 使用情况记录 如仪器出现故障 请及时通知实验室 管理人员 六 灭菌前须检查包布是否双层并无破损 物品是否清洁 包扎是否严密 放置玻璃器材时不得挤压 拿取无菌物品时 必须洗净双手 已灭菌物品和未 灭菌物品应严格分开放置 以免混淆 七 操作时应严肃认真细心 严格执行无菌操作规程 禁止大声喧哗和闲 聊 尽量避免走动 以免污染环境 八 实验人员在进行病毒培养试验时 应在超净工作台内安全操作 试验 后的废液和废弃物品都应该自行高压消毒以后再拿至洗涤室内进行物品的洗涤 九 各人存放于冰箱内的培养液要注明姓名 配制日期 不得随便使用他 人的培养液和翻看其他实验者的细胞 以免交叉污染 十 实验完毕清除杂物 用 75 酒精 3 新洁尔灭 擦拭超净台 边台 倒置显微镜的载物台 并开紫外灯照射 30 分钟 物品归类还原 以方便他人或 下次使用 十一 结束实验后要关水 关电 关空调 关门窗 确保冰箱 CO2 培养 箱等重要设备运转正常后方可离开 并将废弃物品带出实验室 十二 加强危险物品的管理 对液氮储罐及二氧化碳钢瓶要由专人管理 8 不准私自拆装钢瓶阀门 定期检查液氮罐内液氮量 及时添加 做好冻存记录 接触洗液时要佩戴专用手套 做好必要的安全防护 十三 爱护实验室公共财物 注意安全 防火防盗 节约用水用电 紫外 灯开启时间不得超过一小时 十四 无菌室定期消毒 每周清洗无菌工作服 口罩 晾干后 放置无菌 室内紫外灯照射 30 分钟后方可使用 清扫无菌室卫生时先用自来水拖地 擦桌 子 超净工作台等 然后用 3 来苏水或者新洁尔灭擦拭 十五 CO2 孵箱 培养箱 灭菌 先用 3 新洁尔灭擦拭 然后用 75 酒 精擦拭 再用紫外灯照射 十六 在中心进行科研的人员必须遵守以上各项规定 以保证实验的顺利 进行 否则中心工作人员有权终止其使用 对违反本规则和有关规章制度所造 成的事故和损失 要追究当事人的责任 并视情节给以适当处理 第四章第四章 研发部安全生产制度研发部安全生产制度 1 为加强生产组的劳动保护 改善劳动条件 保护劳动者在生产过程中的 安全和健康 促进工作的发展 根据本组的实际情况制订本规定 2 生产组的安全生产工作必须贯彻 安全第一 预防为主 的方针 生产 要服从安全的需要 实现安全生产和文明生产 3 开展工作前 要先检查所用设备是否正常 有无漏电现象 防患于未然 避免事故的发生 4 接触有腐蚀性或有毒药品时要戴口罩或防护手套 如甲醇等有害物质不 慎溅到皮肤上要及时用清水冲洗 5 如工作中发现设备有异常要及时停止进行检查 有故障及时维修 严格 禁止使用有故障的设备 避免不必要的事故 6 禁止进入开紫外灯的房间 要在关掉紫外灯半小时后方可进入 7 压盖人员眼睛要远离压盖刀口 避免压破瓶弄伤眼睛 有搅拌桨的工作 操作人员要远离搅拌桨 避免弄伤手 9 8 高压灭菌后 要等温度降到 60 度以下方可从高压锅中拿出 避免瓶装 高温液体骤冷爆炸 9 上罐人员尤其在夏天要穿长袖衣服 避免烫伤 10 离心人员要等转速降到零方可打开盖子 避免高速离心物体甩出造成 伤害 11 如有人员因事故受到伤害 自己或在旁人员要及时通知负责人 严重 时可直接送往医院 12 干完工作要停掉不需要的电源 关掉所有不需要的设备开关 下班前 锁好门窗 做好防盗工作 第五章第五章 发酵罐操作规程发酵罐操作规程 一 安装电极 上罐前一天下午 将 PH 电极和溶氧电极接到各自信号线上 分别放 到标准缓冲液和饱和亚硫酸钠溶液中 打开电源 待第二天早晨校对 二 电极校正 第二天 在显示屏上找到 参数校正 目录中 PH 校正和溶氧校正 PH 电极 先将光标移至 6 86 上 按确认键 再将电极用纯化水冲净后放 进 4 0 的缓冲液中 将光标移至 4 00 上 确认 然后再放回 6 86 缓冲液中 如 数值为 6 86 或接近则电极正常 溶氧电极 此时溶氧校正一项中右上角数值为接近 2 的数右下角接近 0 为 正常 将光标移至 0 00 上确认即可 三 空气过滤器及管道消毒 打开排汽阀 排净蒸汽管道的冷凝水后关闭 然后开进过滤器阀及相应 排废气阀 控制过滤器上压力在 0 14mpa 到 0 2mpa 之间 维持 30 40 分钟 消 毒过程中打开空压机 消完后关掉进蒸汽阀迅速打开进空气阀将过滤器吹干 吹干后将排废气阀全部关掉 四 空消 10 排净罐内水后打开进罐蒸汽阀 微开排气阀 将罐温升至 121 度 维持 30 分钟 五 实消 空消结束后将罐内冷凝水排净 将放料阀取样口等关紧 安上电极 加 水及培养基至所需量 打开搅拌 打开进夹套蒸汽阀预热 打开排气阀 85 度 左右打开进罐蒸汽阀使蒸汽进罐加热 95 度左右关搅拌 微开排气阀 待温度 升至 121 度维持 30 分钟 小型罐可只用夹套维持 六 降温 实消结束后 关掉所有进蒸汽阀 待罐压降至 0 05mpa 时打开进空气阀 降温 80 度左右可开自来水进夹套降温 降至接种温度后方可接种 七 接种 降至接种温度后 将放有酒精棉球的接种环放到接种口 戴上手套 关 掉进气阀 开放气阀放掉罐内空气后迅速关掉 点燃棉球 打开接种口 将原 料及种子接入罐中 注意开胶塞时要靠近火焰 接完后将接种口盖在火上烤一 烤拧紧 打开进气阀 调节进风量和排气阀将罐压调在 0 05mpa 0 07mpa 之间 打开搅拌 转速调至需要值 将加热 冷却调至自动状态 将溶氧调至 100 装上流加瓶 八 工艺控制 需调 PH 值的加酸调至适当数值 根据需要按时加上诱导剂 定时观察各 参数变化 作好记录 注意设备运行是否正常 保持罐体卫生 九 放罐 培养至发酵终点后 关掉搅拌 由放料口放料 然后取下流加瓶 关掉电 源 空压机 用水将罐冲刷干净 有蒸汽时将罐空消一下 将 PH 电极放入 3mol kcl 溶液或 4 0 缓冲液中保存 发酵液进行相应处理 11 第六章第六章 干扰素分装工艺流程干扰素分装工艺流程 一 生产器具和原料的准备 1 西林瓶的准备 1 1 西林瓶的清洗 将干扰素使用的 15 毫升或 20 毫升西林瓶 用软化水冲洗后 超声波勤分 析 2 3 遍 再用纯化水刷洗后 烘干备用 1 2 西林瓶的灭菌 将干扰素生产使用的西林瓶装入四层不锈钢饭盒中 每个饭盒装 70 只左右 的西林瓶 放入烘箱中 180 干烤 220 分钟以上 降温备用 1 3 西林瓶的使用 将灭菌降温后装西林瓶的不锈钢饭盒用酒精棉球擦拭后 纳入开启的超净 工作台中 在超净工作台内打开 一次检查瓶子的洁净度 用火焰旋转燎口后 在不锈钢托盘中排列摆放使用 注意在操作过程中皮肤不允许和瓶口接触 不 锈钢托盘在摆放西林瓶后不允许移出超净工作台外 2 干扰素生产用原料的准备 2 1 装干扰素原料的瓶子的准备 将 500 毫升输液瓶清洗后需用软化水润洗三遍后方可烘干 烘干后用锡箔 纸封口并包两层报纸扎口 放入烘箱 180 干烤 220 分钟 降温备用 2 2 干扰素原料除菌滤器的准备 0 22 微米微孔滤膜在盛软化水的容器中浸泡 10 分钟左右 在滤器中装入 微孔滤膜 密封后高压 121 20 分钟灭菌降温备用 2 2 干扰素原料的制备 将板框超滤后的干扰素发酵液在无菌环境中灭菌后的 0 22 微米的滤器 青 叶装入 500 毫升灭菌备用的无菌输液瓶中 抽样检测无菌合格后放置到冰箱中 备用 3 丁基胶塞的准备 12 3 1 丁基胶塞的清洗灭菌 将丁基胶塞用洗洁精洗干净再用自来水浸泡清洗后用软化水处理 装入不 锈钢饭盒中 密封后 121 高压灭菌 30 分钟 降温备用 3 2 丁基胶塞的使用 将装无菌丁基胶塞的饭盒用消毒剂浸泡过的纱布擦拭后 放入超净工作台 中 打开后用无菌镊子夹取 迅速压入装干扰素的西林瓶上 注意 操作过程 中 胶塞和瓶口接触部位不允许和皮肤直接接触 4 无菌水和黄芪多糖原料的准备 4 1 将超滤后的软化水分装至 500 毫升输液瓶中 密封后 121 高压灭菌 20 分钟以上 降温后冰箱放置备用 4 2 将超滤后的软化水和黄芪多糖按照每升 18 克的含量配制 充分溶解后 过 0 22 微米的板框过滤 分装至 500 毫升输液瓶中 密封后 121 高压灭菌 20 分钟以上 降温后冰箱放置备用 注意 黄芪多糖溶液板框过滤后需即刻高压 灭菌 不允许长时间放置 5 分装间的消毒 5 1 将生产用 5000 毫升洁净的烧杯 用锡箔纸封口两层报纸扎口后 放入 烘箱 160 180 分钟干热灭菌 然后用酒精棉球擦拭后至于超净工作台内 开 紫外灯灭菌 30 分钟 5 2 分装间在分装之前开紫外灯消毒 30 分钟后静置 20 分钟后方可进入 5 3 每天生产结束后 清场并对桌面 地面进行消毒一次 每周六对分装间 进行环境卫生消毒一次 用稀释 20 倍的新洁尔灭水擦洗超净工作台和操作台以 及地面 墙面 屋顶 并开启紫外灯消毒 30 分钟 6 乳胶管的准备 6 1 乳胶管的灭菌 将乳胶管经自来水 软化水依次冲洗干净后晾干 再将乳胶管置于饭盒 密封后 121 高压灭菌 30 分钟 降温备用 6 2 乳胶管的使用 13 将灭菌后装有乳胶管的容器在开启的超净工作台中打开 取出无菌的乳胶 管与蠕动泵连接 开启蠕动泵 调节流速和流量 注意 不允许灭菌后的乳胶 管两头离开超净台 与原料直接接触的一段乳胶管不允许和其他任何物品包括 皮肤接触 7 干扰素生产用无菌转子的准备 将转子用软化水清洗 先用铝箔纸包裹 再用报纸包扎或放在西林瓶密 封后高压灭菌 二 干扰素分装生产步骤 1 干扰素分装 1 1 生产干扰素人员在进入分装间前用稀释 20 倍的新洁尔灭洗手 换穿干 扰素生产净 化服 口罩 帽子和拖鞋方可进入干扰素分装间 1 2 分装人员打开超净工作台开始运行 在超净工作台内将干扰素原料和 无菌水 黄芪多糖溶液调配倒入烧杯中 加入 0 1 0 2 的苯甲酸 用无菌转子 混匀后即刻分装 1 3 分装工作在开启的超净工作台中操作 有三人三部分组成 首先一人 在超净工作台中将灭菌后的西林瓶饭盒依次打开 目检西林瓶后 旋转瓶口燎 火依次摆入不锈钢托盘中 第二人调试蠕动泵的流量和流速 用乳胶管一端直 接插入摆放好的西林瓶中 第三人将加好干扰素的西林瓶依次扣无菌胶塞 并 检查干扰素分装量是否一致 注意 配好的干扰素液体产品在分装过程中不允许和皮肤接触 干扰素原 料必须即刻分装 注意房间温度 2 干扰素扣盖压盖 从超净台移出的干扰素西林瓶 选择正确铝塑迅速扣盖压盖 3 干扰素灯检 对成品依次在灯检仪下灯检 检出含杂质的次品并统计数量 4 干扰素包装 将压盖灯检后的干扰素产品贴相应的标签 并检查贴标是否合格 合格的 14 产品装箱清点数量 放入 4 度冰箱保存 5