红细胞冷凝集对不同类型血细胞分析仪检测结果的影响探讨.pdf

C I i n ic a I A p p I jc a l i 0 n I 医 械 临 床 红细胞冷凝集对不同类型血细胞分析仪检测结果的影响探讨 乐 家新 马骏 龙 徐 菡 兰雅婷 傅 淑 宏 王成 彬 解放军总医院 北京1 0 0 8 5 3 摘要 目的 探讨红细胞冷凝 集对不 同类型血细胞分析仪检 测结果 的影响 并提 出处理方法 方法 将红细胞冷凝集 标本分别在 A D V I A 一 1 2 0 S F 一 3 0 0 O和 B C 一 3 0 O 0 P L U 3类不同仪 器上测定 并对 3 7 水浴前后的结果进行分析 比较 结 果 水浴前 wB C和 R B C分布 图均 明显异 常并有相 应的报 警 HG B轻 度减低 R B C和 HC T结果 显著 减低 M C V MC H MC HC和 R D w 结果均显著增 高 WB C和 P 结果在 3种仪 器上表现 不一 水浴后 血 细胞分布 图形和各参数 的检测结果均恢复 正常 结论 红细胞冷凝集对不 同类型的血细胞分析仪测量的血细胞参数 结果 均有 不同程度 的影 响 对怀疑为红细胞冷凝集的标本 必须置 3 7 水浴 消除冷凝集后进 行重新测 定才能报告结果 关键词 血细胞分析仪 冷凝集素 细胞计数 中图分类号 T H7 7 6 文献标 志码 A 文章编号 1 0 0 3 8 8 6 8 2 0 0 9 0 2 一 o 0 6 9 0 3 I I l f l u e n c e I nv e s t i g a t i O n O f Te s t Di me ns i O n O f Ak ar y O c y t e C0 I d Ag g I ut i n at i o n i n Di s t i n g ui s he d Ty pe Cy t 0 a na l y z e r YUE J i a x i n MA J u n l o n g XU Ha n I AN Ya t i n g F U S h u h o n g WANG C h e n g b i n G e n e r a I H o s p i a J o f P L A B e i j i n g 1 o 0 8 5 3 C h i n a A b s t r a c t a b j 由 e T o i n v e s t i g a t e 山e e f f c t 0 f t e s t d i m e n s i o n i n t h e t h r e e d i f f e r e n t t y p e c y t o a n a l y z e r f 0 r c 0 l d a g u t i n a t i o n a n d p u t f 0 r w a r d s o l v e me a s u r e s M hD d 8 T h e s p e c i me n o f t h e a k a r y o c y t e c o l d a g u t i n a t i o n w a s d e t e r r n i n e d r e s p e c t i v e l v wi t h t h e B a y e r ADV I A一 1 2 0 S y s me x S F 一 3 0 0 o a n d Mi n d my B C一 3 0 0 0 a n d t h e r e s u l t s we r e a n a l y z e d i n 3 7 w a t e r b a t h i n f lr 0 n t a n d b a c k 1 b 舅 l 山T h e c y t o a n a l v z e r c a n b e d i s p l a y e d t h e a b n 0 r n 1 a 1 s c a t t e r a n d h i s t o g I a m f 0 r t h e wh i t e b l o 0 d c e 1 1 B C a n d t h e r e d b l o 0 d c e l 1 R B C a n d g a v e c o r r e s p o n d i n g a l a H n b e f 0 r e 0 f 3 7 w a t e r b a t h H e m o 0 b i n HG B i s l i g h t l y d e c r e a s e d f P 0 O 5 R B C a n d h a e ma t o c r i t HC rr w e r e s i g n i 矗 c a n t 1 y d e c r e a s e d P 0 0 0 1 Wh e r e a s t h e r e s u l t s o f me a n c 0 r p u s c u l a r v o l u me Mc V me a n c o r p u s c u l a r h e m o g l o b i n MC H me a n c o r p u s c u 1 a r h e m o 0 b i n c o n c e n t mt i o n Mc H C a n d I le d b l o o d c e l l v o l u m e d i s t r i b u t i o n w i d t h R D w w e r e s i g n i 矗 c a n t l y i n c I e a s e d P 3 6 0 g L的标本 排除脂血 黄疸 溶血后 共筛选 出有 红细胞冷凝集 的标本 3 4例 其 中男性 2 0例 女性 1 4 例 年龄 8 7 7岁 包括支原体肺炎 5例 淋 巴瘤 5例 免疫性 溶血 性贫血 7例 传 染性单核 细胞增多症 3例 上呼吸道 感 染 3例 乙肝 2例 肺癌 2例 C L L 2例 先心病 脑梗塞 腹水 待查 急性胆管炎和带状疱疹各 1 例 1 3分析方法 肘静 脉处采集血液 2 m 1 加人 B D公 司生产的 E D T A K 2 真空采血管 内 轻轻颠倒混匀抗凝 标本于采集后 0 5 4 h分 医疗卫生装备 2 0 0 9年 2月第 3 0卷第 2期 Q Ch i n ds e Me d i ca l E qu i pme n l J Ou mal VOI 30 NO 2 Fe bn J a r y 2O 0 9 VU 医 械 临 床I C I in ic a I A p p lic a t io n 别 在 A D V I A一 1 2 0 S F 一 3 0 0 0和 B C 一 3 0 O 0 仪器上 严格 按仪 器说 明书的操作程序进行检测 打印出结果及细胞分布图 1 4质 量 控 制 3台血细胞分析仪使用前均 已校准 每 日测 定配套质控 物 结果也均在靶值允许的范 嗣内 1 5统 计 方 法 计量数据用均数 标准差 艇 表示 水浴前后结果均数 比较采用配对资料 检验 2结果 红细胞冷凝集标 本在 3种不 同类 型的血细 胞分析仪 上 检测时 白细胞 和红细胞分 布图均明显异 常并 有相应 的报 警 S F 一 3 0 0 0仪器 白细胞 D I F F散点 图的左下区域 出现许多 黑色 的散点 WB C F l a g显示 WB C A b n S c g B 1 a s t A l v I mm G f a n N R B C P I J rr C报警 红细胞直方 图显著 降低 R B C F l a g 显 示 RB C Ab n D s t Di mo f p h P 0 p Ma c r RB C Ag g l u t和 T u r b H G B等报警 见 图 1 a A d v i a l 2 0仪器 白细胞 P e r 0 x和 B a s o散点图中的细胞散点 明显减少 红细胞 V H C散点图中 主要散点图的上方出现许 多异 常散点 并显示 MA C R O H Y P 0 和 A N I S 0 等报 警 见 图 2 b 所 示 B C 一 3 0 O 0 n 仪器 白细胞 直方图左侧峰增大 整个直方图呈三角 形 并显示 R1 R 2 R 3 R 4和 R M报 警 红细胞直方图显著降 低 见 图 3 a 3 7 水浴前 的标 本做血涂片时发现血膜上 有许 多细小颗粒 仔细观察试 管内抗凝血 发现管 内壁有许 多细沙样凝集颗粒 将该标本置 3 7 水浴 3 0 m i n 取 出观察 试管 内抗凝血 未发现管 内壁有凝集颗粒 混匀后立 即上机 测定 白细胞 和红 细胞 的细胞分布 图形及检测结果均恢复正 常 各种报警消失 见 图 1 a 图 3 b 同时制备血涂片 两 批血涂片染色后 显微镜下观察 3 7 水浴前 的血涂片可见 红 细胞 凝集 见 图 4 a 3 7 水浴后 的血涂片未 见红细胞 凝集 见 图 4 b 红细胞冷凝集标本 3 7 q C 水浴前 后在 血细 胞分析仪上的测量结果见表 1 3 3讨 论 血液冷凝集综合征是一种 自身免疫 性疾病 当血液温度 低 于某一特定温度时 循环 中 自身抗体就会与红细胞抗原相 结合 这一特定的温度称为冷凝集阈值温度 其范围为 4 3 5 冷凝集阈温度很少高于 3 0 通常低 于 2 5 无症状 的 患者尤其如此l 1 l 部分正常人或 婴儿可 以存在有低滴度 的冷 凝集抗体 一般在 1 1 6以下 在 3 0 以上一般不发生凝集 反应 但较高滴度 的冷凝集抗体就会导致冷凝集综合征 冷凝集抗体 可以为多克隆或单 克隆 自体抗体 绝大多数 单 克隆冷凝集抗体发现于淋 巴网状 内皮细胞瘤患者 而多克 隆冷凝 集抗体则 是由于感染引起 特别是支原体肺 炎或传染 性单核 细胞增多症 冷凝集 自身抗体主要是 I g M 少部分是 I g G和 I I g M 抗体对人红细胞 I 类抗 原具有特异性 与其 抗原有 1 0个结合位点 冷 凝集 自身抗体 的抗原 即红 细胞 3 O 以下抗体 可与多个 红细胞结合后迅速形成血凝块 红细胞 凝集 温度提高后凝集消失 7 n医疗卫生装备 2 0 0 9 年 2 月第3 0 卷第 2 期 U Chi n e s e Me di c a l Eq uI p men t J Ou maI VO I 3 O NO 2 Fe b n J ar y 2 00 9 阳性 形态学 计数 DI FF RBC 2 5 0 n J 阴 性 W BC BASO DI F F P RHC 4 0f1 2 5 0仃 WBC B AS 0 PL J T 4 0f L a 3 7 水浴前 b 3 7 水浴后 图 1 红细胞冷凝集标本在S F 一 3 O 0 0血细胞分析仪的血细胞图形变化 过氧化物酶通道 嗜碱性细胞通道 红细胞体积 血红蛋白浓度 a 3 7 水浴前 过氧化物酶通道 嗜碱性细胞通道 红 细胞体积 血红蛋白浓 度 b 3 7 水浴后 图2 红细胞冷凝集标本 A d v ia 一 1 2 O血细胞分析仪的血细胞图形变化 W B C R1 R2 R3 R 4 R m WB C R 3 二 一 l l 0 I l 露 蟹 O 5 O 1 5 2O 25丌 b 3 7 水浴后 P L U S血细胞分析仪的血细胞图形变化 l 一 i j 誊 a 3 7 水浴前 b 3 7 水浴后 图 4 红细胞冷凝集标本3 7 水浴前后血涂片上细胞分布的变化 支原体肺炎 和某些含寒冷凝集素 的患者 血清中常含有 C l in ic a I A p p II c a t io n I 医 械 临 床 表 1 红细胞冷凝集标本3 7 水 浴前后 AD VIA一 1 2 O仪器检 测结果比较 J l 3 4 注 尸 0 O 5 p o O 1 尸 O o o 1 表 2 红细胞冷凝集标本 3 7 水浴前后 S F 一 3 O O 0仪器检测结果 比较 l 3 4 注 尸 0 O 5 P 0 0 1 P 0 o o 1 表 3 红细胞冷凝集标本 3 7 水浴前后 B Cl 3 0 0 0 仪器检测结果比较 l 3 4 注 尸 O 0 5 p 0 0 5 R B C和 H C T结果 显著降低 P O O O 1 同时 MC V P 0 0 1 MC H P 0 o o 1 和 MC H C P 0 o o 1 结 果 均显 著增 高 这种现象是由于冷凝集素使红 细胞凝集 导致 R B C数减低 尽管凝集 的 R B C体积大于单个 R B C体积 在通过血 细胞 分 析仪微孔计数时得到的 MC V增大 但红细胞凝集 时以 R B C 减低 为主要特征 因此 H C T HC T R B C MC V 结 果仍然 减 低 并 由此造成 MC H MC H HG B R B C MC H C MC HC H G B HC T 的计算值异常升高 冷凝集素除对红细胞有 作用外 也可凝集淋 巴细胞 中 性粒 细胞 单核 细胞 巨噬细胞 和血 小板 使 wB C P L T的结 果也假性减低 实验结 果发 现 3 7 水 浴前 后的结果 比较 WB C和 P I J rr 在 3种不 同的血 细胞 分析仪上检测 结果表现不 一 细胞 化学 染色加光散 射法检测 的仪器 A D V I A 一 1 2 0和 S F 一 3 O o 0 计数 的白细胞 3 7 水浴前的结果低于水浴后的结 果 P 0 0 5 0 0 1 而 在电 阻抗 法计 数 WB C的仪器 B C 一 3 0 O 0 上 3 7 水 浴前 的结果 明显高 于水浴后 的结果 P 0 0 0 1 这可能是 由于凝集的 R B C在仪器特定 的时间内不 能 被溶血剂完全溶解 光散射法计数 白细胞的仪器通过低 角度 检 测 白细胞 的体积 高角度 检测 白细胞 的 内部结构 可 以较 准确 地区分 白细胞和 未溶解 的凝 集红细胞 电阻抗法计数 WB C的 仪器不 能区分 白细胞 和未溶解 的 凝集红细胞 只要被计数的颗粒 与 白细胞体积近似 均被 当作 WB C 颗粒计数 导致 WB C结果 假性增 高 对 P j J T而言 S F 一 3 0 O 0和 B C 一 3 o 0 0 仪 器 3 7 水 浴前 的结 果 多数 2 9 3 4 低 于水浴后 的结果 P 0 0 5 而 AD V I A一 1 2 0仪器 3 7 水 浴前 的结 果多数 3 1 3 4 高于 水浴后 的结果 P O O 1 具体原 因 有待今后进一步探讨 实验 中我们还发 现 患者冷凝 集素效价越高 红细胞凝集程度也 越高 对血细胞分析仪检测结果 的 影响越大 冷凝集标本在 3 7 水 浴后取 出 上机检测之前一定要注 意保温 简单 方法 将盛有 血样 的 抗凝管握在 掌心颠倒混匀 开盖后 立即吸样检测 对冷凝集 阈值温 度较 高的标本 更应特别注意 否 则将 不能完全 消除红 细胞冷凝 集 对仪器检测结果的影响 综上 所述 在进行 仪器 自动血 细胞分析 时 为 了防止可 能出现的 R B C冷凝集对血 细胞计 数结果 的影 响 要使 实验 室保持在合 适 的温 度 1 8 2 5 低于 l 5 或 高于 3 0 均 对结果 有影 响 因此 血细胞检测实验室应有恒温装置 这一 点对没有暖气或空调 的实验室要特别注意 对怀疑有冷凝集 的标本 应将 血标本 置 3 7 水浴 3 0 m i n 待红细胞冷凝集 消 除后 再立 即上机测定 重视和坚持做好分析后质量控制工 作是获 得准确实验结果的重要环节 因此 在 日常工作 中要