中药化学上课内容.doc

1.中药有效成分化学结构的研究方法：化合物的纯度测定（理化检查：检查晶形、色泽、测定熔点；纯化合物一般有一定的晶形和均匀的色泽，有明确而敏锐的熔点，熔距很窄，且重结晶前后熔点一致；色谱检查：三种不同的溶剂系统中均呈现单斑时才能说明是单体化合物，纯的单体化合物应是单峰）结构研究的主要程序(初步推断母核类型确定分子式计算不饱和度推断结构片断、官能团和基本骨架-确定化合物的结构-确定化合物的立体结构)结构研究的主要方法（质谱MS、紫外光谱UV、红外光谱IR、核磁共振光谱NMR）。2.人参皂苷207210nm(UV)。IR光谱：主要用于确定化合物中官能团以及鉴别化合物的真伪；UV光谱：主要用于确定化合物的骨架类型（共轭体系）；NMR谱：主要用于确定化合物中H、C的化学环境、类型、数目；MS：主要用于确定化合物的分子量、分子式。1H-NMR谱的化学位移（）范围在020ppm；13C-NMR谱的化学位移（）范围在0250ppm。3.糖的结构与性质（了解）、苷的结构与性质（重点）、提取和分离（重点）、结构研究（了解）。六元氧环吡喃、五元氧环-呋喃。单糖分子中的伯醇基氧化成羧基的化合物叫糖醛酸。单糖的醛或酮基还原成羟基后所得到的多元醇称糖醇。端基碳：单糖成环后形成的一个新的手性碳原子形成的一对异构体，称为端基差向异构体，有、之分（相对构型）。单糖的伯或仲羟基被置换为氨基，就成为氨基糖。C5-R(或C4-R)在环平面向上的为D型，向下的为L型。当C1羟基与六碳糖C5（五碳糖C4）上取代基在环的同一侧为构型，在环的异侧为型。实测旋光为右旋者为+，左旋者为。4.低聚糖是由2-9个单糖通过苷键结合而成的直链或支链多糖，分为还原糖和非还原糖。区别：是否含有游离的醛基或酮基。优势构象：呋喃糖（五元氧环基本在一个平面-信封式）、吡喃糖(六元氧环基本不在一个平面-船式、椅式（优势构象：C1式C4在上，C1在下；1C- C1在上，C4在下）)。化学性质：氧化反应（银镜反应、弗林反应、过碘酸氧化反应）、糖醛形成反应、羟基反应。5.苷类化合物 苷的定义、苷的结构、苷的分类（重点）、苷的性质。6.苷类是糖或糖的衍生物与另一非糖物质通过糖的端基碳原子连接而成的一类化合物，又称为配糖体。其中的非糖部分称为苷元或配基。糖的半缩醛或半缩酮羟基与苷元脱水形成的键为苷键。苷的共性是糖和苷键。糖与糖及糖的衍生物形成的化学键均称为苷键。几乎所有的天然产物均可形成苷。最大的区别在于苷元。苷键：糖与糖之间或糖与苷元之间的键。苷键原子：连接苷元和糖的原子。7.苷类的分类：按苷类在植物体内的存在状况分为原生苷（原存在植物体内没有被水解的苷）和次生苷（原生苷水解一部分糖分子后生成的苷）按分子所含单糖的数目分：单糖苷、双糖苷、多糖苷等按苷元的化学结构分为：黄酮苷、蒽醌苷等按生理作用或物理特性分为：皂苷（加热不变性）、强心苷按分子中的糖链数目分为：单糖链苷、双糖链苷等按苷键原子分为（最重要）：氧苷（O-苷）、硫苷（S-苷）、氮苷（N-苷）、碳苷（C-苷）。氧苷包括醇苷、酚苷、酯苷、氰苷（易水解）。醇苷是苷元上的醇羟基与糖的半缩醛或半缩酮羟基脱水生成。酚苷：苷元上的酚羟基与糖的半缩醛或半缩酮羟基脱水生成。酯苷：苷元上的羧基与糖的半缩醛（酮）羟基脱水生成，包括腺苷、鸟苷、胞苷、尿苷、巴豆苷。碳苷：苷元碳上的氢与糖的半缩醛脱水缩合而成。苷元多为黄酮、蒽醌、酚酸类、芦荟苷、芒果苷等。性质特殊，难溶于水和有机溶剂中，易溶于吡啶，且难水解。在各类溶剂中溶解度小，难水解获得原苷元；在消化道等某些微生物的作用下，可水解生成原苷元。8.苷元的通性：多数为无定形粉末，少数可结晶；均有旋光性，多为左旋，无还原性。水解后常为右旋，多有还原性（弗林试剂、多伦试剂）。苷类因含有糖的缘故具有一定的亲水性，多数可溶于甲醇、乙醇、含水正丁醇、沸水等，而苷元相对来说具有亲脂性。9.碳苷在水和有机溶剂中的溶解度均较小。分离苷和苷元可用两相溶剂萃取法。1.有效成分：中药中有生物活性、能起防病治病作用的单体成分。2.有效部位：含有主要有效成分的中药提取分离部位。3.活性成分：经过药效试验或生理活性实验，证明对机体具有一定生理活性的成分。4.中药化学是在中医药理论指导下，运用现代科学理论与方法（特别是化学理论和方法）研究中药化学成分的一门学科。5.各类中药化学成分的主要生物合成途径：（一）乙酸-丙二酸途径：脂肪酸类、酚类、醌类；（二）甲戊二羟酸途径：萜类、甾类化合物；（三）莽草酸途径：苯丙素类、黄酮类；（四）氨基酸途径：生物碱类；（五）复合途径：查尔酮类、二氢黄酮类、萜类生物碱等化合物。6.中药有效成分的提取方法：（一）溶剂提取法：煎煮法、浸渍法、渗漉法、回流提取法、连续回流提取法；（二）水蒸汽蒸馏法；（三）超临界流体萃取法；（四）其他方法：吸收法、升华法、压榨法。7.常用于中药成分提取的溶剂按极性由弱到强的顺序如下：石油醚正己烷（n-C6H14）环己烷（cyclohexane）四氯化碳（CCl4）苯（C6H6）二氯甲烷（CHCl2）氯仿（CHCl3）无水乙醚（Et2O）乙酸乙酯（Et0AC）正丁醇（n-BuoH）丙酮（Me2Co）乙醇（EtoH）甲醇（MeoH）KB) 100时一次简单萃取即可将二者分开；10100要萃取1012次；2宜萃取100次，宜萃取100次以上，宜用逆流分溶法；1不能用本法分离。19.中药水提液中的亲脂性成分用石油醚、苯、氯仿、乙醚萃取；中等极性成分用乙酸乙酯萃取；亲水性成分可用正丁醇、异戊醇萃取。20.沉淀法包括：专属试剂沉淀法、分级沉淀法、盐析法、酸碱沉淀法。21.专属试剂沉淀法 如雷氏铵盐沉淀水溶性生物碱；胆甾醇沉淀甾体皂苷。22.分级沉淀法：加入一定溶剂改变混合溶剂的极性，使某些组分溶解度降低而沉淀，如水提醇沉法。23.盐析法：在药材水提液中加入一定量的易溶于水的无机盐使某些成分在水中溶解度降低，从而与水溶性大的成分分离。（饱和状态过饱和状态沉淀法）常用的无机盐：氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等。HR（亲脂，游离态）H+R-（解离态）24.酸碱沉淀法 ：碱溶酸沉法；酸溶碱沉法。1.系统溶剂分离法：两相分配的原理，常用于中药提取物的部位分离。溶剂极性由小到大，常用石油醚（或正己烷）-氯仿（乙醚）-乙酸乙酯-正丁醇依次萃取。2.PH梯度萃取法：利用不同成分的酸碱性的差异，在某一定PH下，某些成分可以成盐或者游离，改变其成分在溶剂系统中分配系数的差异而与其它成分分离。3.中药有效成分的分离精制方法：（一）溶剂法：酸碱溶剂法溶剂分配法（二）沉淀法：专属试剂沉淀法分级沉淀法盐析法（三）分馏法（四）膜分离法（五）升华法（六）结晶法（七）色谱分离法：吸附色谱凝胶过滤色谱（排阻色谱、分子筛色谱）离子交换色谱大孔树脂色谱分配色谱4.分馏法 原理：利用液体混合物中各成分的沸点的不同而分离的方法。5.膜分离法 原理：利用高分子膜以外加压力或化学位差为推动力，对混合物溶液中的成分进行分离、分级、提纯、富集。6.升华法：用来分离少量有升华性的化合物，如咖啡因的,某些小分子生物碱、香豆素等的提取。7.结晶法 原理：利用混合物中各成分在溶剂中的溶解度不同达到分离的方法。8.色谱分离法：利用混合物中各组分对固定相和流动相的亲和力的不同而达到分离的方法。9.吸附色谱法 原理：利用吸附剂对混合物中各成分对固定相吸附能力的差异而达到分离的色谱法。它的过程三要素：吸附剂（固定相）、洗脱剂/展开剂（流动相）、化学成分（混合物）。按原理分类：物理吸附色谱法（无选择性，吸附与解吸附可逆，可快速进行；吸附剂有硅胶、活性炭可用于非极性脱色）、化学吸附色谱法（有选择性，吸附牢固，甚至不可逆，；吸附剂有：碱性氧化铝、酸性硅胶）、半化学吸附色谱法（一般是氢键吸附，力量介于物理吸附和化学吸附之间；吸附剂：聚酰胺、大分子树脂）、大孔吸附树脂色谱法。洗脱剂（或展开剂）：对极性吸附剂而言，洗脱剂极性增大，洗脱能力增强，比移值增大。常见溶剂洗脱能力：石油醚已烷苯乙醚氯仿乙酸乙酯丙酮乙醇甲醇水。常用混合溶剂洗脱，洗脱时极性要逐步增加，常用梯度洗脱。对极性吸附剂而言，成分极性越大，越难洗脱（TLCA中则Rf值越小）；洗脱剂的极性越大，越易洗脱（TLCA中则Rf值越大）。极性基团：糖基、-COOH、-OH、-NH、-C=O；非极性基团：-OR-、-R-。10.物理吸附色谱法 吸附剂：极性吸附剂如硅胶、氧化铝、氧化镁、碳酸钙、硅藻土等，成分极性越大，被吸附越强，比移值Rf越小非极性吸附剂如活性炭，成分极性越大，比移值Rf越大。硅胶有弱酸性，吸水后形成硅醇基而使吸附能力较低。11.聚酰胺色谱法 原理：氢键吸附。适用于分离酚类、醌类、黄酮类化合物。影响因素：形成氢键基团的数目、位置、分子芳香化程度、溶剂介质。溶剂洗脱能力：水甲醇/乙醇丙酮氢氧化钠溶液甲酰胺DMFRP-8RP-2。操作方式：柱色谱、TLC、纸色谱（PC）。4.苯丙素类是指基本母核具有一个或几个C6-C3单元的天然有机化合物类群。广义而言，苯丙素类化合物包括了简单苯丙素类（如苯丙烯、苯丙醇、苯丙醛、苯丙酸等）、香豆素类、木酯素和木质素类、黄酮类，涵盖了多数的天然芳香族化合物。狭义而言，苯丙素类化合物是指简单苯丙素类、香豆素类、木酯素类。苯丙素类化合物的关键前体是对羟基桂皮酸，而它是香豆素类的关键前体。5.简单苯丙素类成分依其极性大小和溶解度的不同，一般用有机溶剂或水提取，按照中药化学成分分离的一般方法分离，如硅胶柱色谱、高效液相色谱等。其中苯丙烯、苯丙醛及苯丙酸的简单酯类衍生物多具有挥发性，是挥发油芳香族化合物的主要组成部分，可用水蒸气蒸馏法提取。苯丙酸衍生物是植物酸性成分，可用有机酸的常规方法（碱提酸沉法）提取。6.香豆素类成分是一类具有苯骈-吡喃酮母核的天然产物的总称，在结构上可以看成是顺式邻羟基桂皮酸脱水而形成的内酯类化合物。7.香豆素类的结构与分类：简单香豆素类：仅在苯核上具有取代基的香豆素类呋喃香豆素类：呋喃香豆素结构中的呋喃环往往是由香豆素苯核上所存在的异戊烯基与其邻位的酚羟基环合而成，成环后有时可因降解而失去3个C原子；6位异戊烯基与7位羟基形成呋喃环，则呋喃环与苯环、-吡喃环处在一条直线上，称为线型呋喃香豆素。如8位异戊烯基与7位羟基形成呋喃环，则呋喃环与苯环、-吡喃环处在一条折线上，称为角型呋喃香豆素吡喃香豆素类：7位羟基和6（8）位取代异戊烯基缩合形成吡喃环，即属吡喃香豆素类。6位异戊烯基和7位羟基形成吡喃环者，称为线型吡喃香豆素；8位异戊烯基和7位羟基形成吡喃环者，称为角型吡喃香豆素。吡喃环被氢化，称为二氢吡喃香豆素。其它香豆素类：-吡喃环环上有取代（C3或C4有苯基、羟基、烷基、异戊烯基取代）的香豆素类。8.游离香豆素类：固体，有晶形，有一定熔点，多具芳香气味，能可溶于石油醚，易溶于氯仿、乙醚、丙酮、乙醇、甲醇，难溶于水。分子量小的香豆素类化合物：有挥发性，能随水蒸气蒸馏出，并能升华。香豆素苷：多数无香味和挥发性，也不能升华，可溶于水、乙醇、甲醇，难溶于氯仿、乙醚等极性小的有机溶剂。在紫外光照射下，香豆素类成分多显蓝色或紫色荧光。9.内酯的碱水解 香豆素类分子中具，-不饱和内酯结构，在稀碱液的作用下内酯环可水解开环，生成顺式邻羟基桂皮酸的盐。该盐不稳定，酸化即闭环恢复为内酯结构（该性质可用于提取分离）。如果与碱液长时间加热，水解产物顺式邻羟基桂皮酸衍生物则转变为反式邻羟基桂皮酸衍生物，再经酸化也不再发生内酯化闭环反应。10.显色反应：异羟肟酸铁反应：（香豆素内酯类）香豆素类成分具有内酯结构，在碱性条件下开环，与盐酸羟胺缩合生成异羟肟酸，在酸性条件下再与Fe3+络合而显红色酚羟基反应：有酚羟基的化合物与三氯化铁（醇）溶液反应产生污绿、蓝绿、墨绿色Gibbs反应：香豆素类成分在碱性条件下（pH910）下内酯水解生成酚羟基，如果其对位（6位）无取代，与2,6-二氯（溴）苯醌氯亚胺（Gibbs试剂）反应而显蓝色Emerson反应：与Gibbs反应相类似，香豆素类成分如在6位无取代，内酯环在碱性条件下开环后与Emerson试剂（4-氨基安替比林和铁氰化钾）反应生成红色（酚羟基对位未被取代或C6没有取代基的香豆素）。此反应用于判断C6位有无取代基存在。11.香豆素类的提取：溶剂提取法（提取香豆素类成分的主要方法）、碱溶酸沉法（提取香豆素类成分，常有大量中性杂质存在，可利用香豆素类具有内酯结构，被热的稀碱液所皂化溶解，加酸酸化后可降低在水中的溶解度，可析出沉淀或被乙醚溶解而与杂质分离）、水蒸气蒸馏法（小分子的香豆素类成分因具有挥发性，可采用水蒸气蒸馏法提取，提取液经适当浓缩后可析出香豆素结晶）、色谱法（了解-不用氧化铝，因为氧化铝显碱性，可破坏内酯环结构；可用葡聚糖凝胶-分子筛原理）12.荧光 香豆素类化合物在紫外光（365nm）照射下一般显蓝色或紫色的荧光，可用于检识。7-羟基香豆素类往往有较强的蓝色荧光，加碱后其荧光更强，颜色变为绿色；羟基香豆素醚化，或导入非羟基取代基往往使荧光强度减弱，、色调变紫；多烷氧基取代的呋喃香豆素类一般呈黄绿色或褐色荧光。13.香豆素有荧光，日光下碧蓝色荧光；碱液中荧光加强，遇碱开环，遇酸闭环，不能长时间加热。多为游离态，少数与糖结合成苷。4.苷键具有缩醛结构，在稀酸或酶的作用下，苷键可发生断裂，水解成为苷元和糖。5.酸催化水解 机理：苷键原子质子化苷键断裂形成糖基正离子与水结合形成糖。关键步骤（限速步骤）：苷键原子的质子化，只要是有利于苷键原子质子化的因素，都有利于水解的进行。影响因素：苷类的酸催化水解难易程度与苷键原子的电子云密度及其空间环境有关。6.按苷原子的不同，苷类酸水解的易难顺序为：N-苷O-苷S-苷C-苷（氮原子碱度高，易于接受电子，故氮苷最易发生酸水解。而碳原子上无游离电子对，不能质子化，故碳苷很难发生水解）；a酰胺、酰亚胺型以及嘧啶环上的氮苷因其氮原子的碱性极弱，很难水解b酚苷、烯醇苷易于水解，比脂肪苷（萜苷）容易。水解顺序：呋喃糖苷吡喃糖苷、酮糖苷醛糖苷、五碳糖苷甲基五碳糖苷六碳糖苷七碳糖苷糖醛糖苷、2-氨基糖苷2-羟基糖苷3-去氧糖苷（6-去氧糖苷）2-去氧糖苷-酚羟基醌类。例如：2-羟基苯醌或在萘醌的醌核上有羟基时，为插烯酸的结构，表现出与羧基相似的酸性，可溶于碳酸氢钠水溶液， 而-羟基与CO基形成氢键缔合，表现出更弱的酸性，只能溶解于氢氧化钠水溶液。（b）-COOH酚 OH（c）酚- OH的数目决定酸性的强弱，酚羟基数目多，酸性增强。（d）连接基团酸性强弱的顺序为：故可从有机溶剂中依次用5碳酸氢钠、5碳酸钠、1氢氧化钠及5氢氧化钠水溶液进行梯度萃取，达到分离。酸碱性碱性:由于羰基上氧原子的存在，蒽醌类成分也具有微弱的碱性，能溶于浓硫酸中成详盐再转成阳碳离子，同时伴有颜色的显著改变。例如:大黄酚为暗黄色 溶于浓硫酸中转为红色；大黄素橙红溶于浓硫酸中变为红色；其他羟基蒽醌 在浓硫酸中一般呈红至红紫色。7.颜色反应（1）Feigl反应（所有醌类）（2）无色亚甲蓝显色试验（苯醌、萘醌类）（3）Kesting-Craven反应（与活性亚甲基试剂反应）（苯醌、萘醌类）（4）Borntragers反应（羟基蒽醌类）（5）醋酸镁反应（羟基蒽醌类）（6）对亚硝基 二甲苯胺反应（羟基蒽酮类）8.（1）Feigl反应（所有醌类）紫色（2）无色亚甲蓝显色试验（苯醌、萘醌类）无色亚甲蓝溶液用于PPC、TLC、纸斑作为喷雾剂，是检出苯醌及萘醌的专用显色剂；苯醌或萘醌在白色背景上作为蓝色斑点出现，与蒽醌相区别。（3）Kesting-Craven反应（与活性亚甲基试剂反应）（苯醌、萘醌类）试剂：碱性的乙酰乙酸乙酯或丙二酸酯或丙二腈醇溶液阳性 反应条件：苯醌、萘醌的醌核上有未被取代的位置，故蒽醌不反应。（4）Borntragers反应（羟基蒽醌类）试剂：碱液（氢氧化钠、碳酸钠等）现象：红色或紫红色阳性反应条件：羟基蒽醌类及其苷（5）醋酸镁反应（羟基蒽醌类）试剂：0.5乙酸镁的甲醇或乙醇溶液。现象：橙红色、紫红色；蓝紫色阳性条件：【邻二酚羟基】或至少有一个【-羟基】的蒽醌（6）对亚硝基 二甲苯胺反应（羟基蒽酮类）试剂：0.1对亚硝基二甲苯胺吡啶溶液现象：蓝、绿色阳性条件：9位或10位未被取代的【羟基蒽酮】。1.分离游离羟基蒽醌衍生物时常用的吸附剂主要是硅胶，一般不用氧化铝，尤其不用碱性氧化铝（可用中性或酸性处理过的氧化铝），以避免与酸性的蒽醌类成分发生不可逆吸附（氢键吸附）而难以洗脱。2.甲基化反应 化学环境不同的羟基对甲基化反应的难易顺序依次为：醇羟基、-酚羟基、-酚羟基、羧基。（羟基的酸性越强，越易甲基化）甲基化反应用来推测原来分子中羟基的数目和位置。甲基化试剂的组成与反应功能基的关系：CH2N2/Et2O-COOH、-酚OH、-CHOCH2N2/Et2O+MeOH-COOH、-酚OH、两个-酚OH之一、-CHO（CH3）2SO4+K2CO3+丙酮-酚OH、-酚OHCH3I+Ag2O-COOH 、所有的酚OH、醇OH、-CHO3.乙酰化反应 常用的乙酰化试剂按乙酰化能力强弱顺序排列为：CH3COCl(CH3CO)2OCH3COORCH3COOH。乙酰化试剂和反应条件及作用位置（试剂组成反应条件作用位置）：冰醋酸（加少量乙酰氯）-冷置醇OH；冰醋酸（加少量乙酰氯）-加热（短时间）醇OH、-酚OH冰醋酸（加少量乙酰氯）-加热（长时间）醇OH、-酚OH、两个-酚OH之一酸酐+硼酸冷置-醇OH、-酚OH酸酐+浓硫酸室温放置过夜-醇OH、-酚OH、-酚OH酸酐+吡啶（C5H5N）-室温放置过夜-醇OH、-酚OH、烯醇式OH。羟基的乙酰化，以醇羟基最易乙酰化，-酚羟基则相对较难。乙酰化试剂中醋酐-吡啶乙酰化能力最强，而冰醋酸最弱。碳苷芦荟苷和芒果苷；分步结晶-纯物质。4.醌类化合物红外光谱的主要特征是羰基吸收峰以及双键和苯环的吸收峰。Vc=o(16751653cm-1)、VOH（36003130cm-1）、V芳环（16001480cm-1）。Vc=o吸收峰位与分子中-酚羟基的数目及位置有较强的相关性；影响红外吸收峰的因素：氢键（形成氢键会使吸收峰向低波数方向移动）。羟基使羰基吸收峰向低波数方向移动。5.1H-NMR谱 当醌环上有供电取代基时，使邻对位芳氢向高场方向移动；当醌环上有吸电取代基时，使邻对位芳氢向低场方向移动。-酚羟基比-酚羟基信号出现在更低场，均10。甲氧基一般在3.8-4.2（s），芳香甲基一般在2.1-2.5（s），-甲基在2.7-2.8（s），羟甲基（-CH2OH）中-CH24.4-4.7(s)、-OH4.0-6.0（s）。1.七叶内酯 易溶于甲醇、乙醇和冰乙酸，可溶于丙酮，不溶于乙醚和水。也易溶于稀碱液，并显蓝色荧光。2.七叶苷 易溶于甲醇、乙醇和乙酸，可溶于沸水。也易溶于稀碱液，并显蓝色荧光。3.木酯素是一类有两分子苯丙素衍生物聚合而成的天然化合物，主要存在于被子植物和裸子植物的木部和树酯中（其他部位也有），多数呈游离状态，少数与糖结合成苷。4.木质素是由四种醇单体（对香豆醇、松柏醇、5-羟基松柏醇、芥子醇）形成的一种复杂酚类聚合物。5.（要求：能辨认出结构即可）按化学结构分类法，将木酯素分成下列几类：简单木酯素（简单木酯素由两分子苯丙素仅通过位碳原子(C8-C8)连接而成。此类化合物也是其它一些类型木酯素的生源前体）单环氧木酯素（单环氧木酯素结构特征是在简单木酯素基础上，还存在7-O-7或9-O-9或7-O-9等四氢呋喃结构）木酯内酯（木酯内酯的结构特征是在简单木酯素基础上，9、9位环氧，C9为C=O基）环木酯素（在简单木酯素基础上，通过一个苯丙素单位中苯环的6位与另一个苯丙素单位的7位环合而成的环木酯素）环木酯内酯（环木酯内酯是环木酯素C9-C9间环合成的内酯环。按其内酯环上羰基的取向可分为上向和下向两种类型）双环氧木酯素（这是由两分子苯丙素侧链相互连接形成两个环氧(即具有双骈四氢呋喃环)结构的一类木酯素）联苯环辛烯型木酯素（这类木酯素的结构中既有联苯的结构，又有联苯与侧链环合成的八元环状结构。其主要来源是五味子属植物）联苯型木酯素（这类木酯素中两个苯环通过3-3直接相连而成，其侧链为非氧化型）其他类。6.多数木酯素化合物是无色结晶，一般无挥发性，少数具升华性，如二氢愈创木酯酸。游离木酯素多具有亲脂性，一般难溶于水，易溶于苯、乙醚、氯仿及乙醇等有机溶剂，具有酚羟基的木酯素类可溶于碱性水溶液中（有内酯环结构）。木酯素苷类水溶性增大。木酯素常有多个手性碳原子或手性中心，大部分具有光学活性，遇酸易异构化。7.木酯素的分离可采用溶剂萃取法、分级沉淀法与重结晶等方法。游离的木酯素亲脂性较强，能溶于乙醚等低极性溶剂，在石油醚和苯中溶解度比较小。木酯素苷类极性较大，可按苷类的提取方法提取，如用甲醇或乙醇提取。一般常将药材先用乙醇或丙酮提取，提取液浓缩成浸膏后，用石油醚、乙醚、乙酸乙酯等依次萃取。8.碱溶酸沉法 某些具有酚羟基或内酯环结构的木酯素可用碱水溶解，碱水液加酸酸化后，木酯素游离又沉淀析出，从而达到与其它组分分离目的。不适用于有旋光活性的木酯素。9.色谱法（吸附色谱法、柱色谱法） 木酯素的进一步分离还需要依靠色谱法。常用吸附剂为硅胶和中性氧化铝，洗脱剂可根据被分离物质的极性，选用石油醚-乙醚、氯仿-甲醇等溶剂洗脱。香豆素有荧光性；木酯素难溶于水，有旋光性。提取香豆素的方法：碱溶酸沉法、乙醚提取法、乙醇提取法、水蒸气蒸馏法、溶剂提取法。木酯素分子中常有功能基如醇羟基、酚羟基、甲氧基、亚甲二氧基，可用三氯化铁反应（或重氮化试剂）检查酚羟基的有无。10.在labat反应中，具有亚甲二氧基的木酯素加浓硫酸后，再加没食子酸，可产生蓝绿色。如以变色酸代替没食子酸，并保持温度在70oC80oC20分钟，可产生蓝紫色，此反应称为Ecgrine反应。11.木酯素类成分一般具有较强的亲脂性，常用硅胶薄层色谱，展开剂一般用亲脂性的溶剂如苯、氯仿、氯仿-甲醇（9:1）、氯仿-二氯甲烷（1:1）、氯仿-乙酸乙酯（9:1）和乙酸乙酯-甲醇（95:5）等系统。常用的显色剂有：1%茴香醛浓硫酸试剂，110 oC加热5分钟。5%或10%磷钼酸乙醇溶液，120 oC加热至斑点明显出现。10%硫酸乙醇溶液，110 oC加热5分钟。三氯化锑试剂，100 oC加热10分钟，在紫外灯下观察。碘蒸气，熏后观察应呈黄棕色或置紫外灯下观察荧光。12.黄酮类化合物经典的概念主要是指基本母核为2-苯基色原酮的一系列化合物。现在，黄酮类化合物是泛指两个苯环（A与B环）通过三个碳原子相互联结而成的一系列化合物。13.黄酮类化合物在植物体内的生物合成途径是复合型的，即分别经莽草酸途径和乙酸-丙二酸途径，由一个桂皮酰辅酶A和三个丙二酰辅酶A在查尔酮合成酶的作用下生成查尔酮，其中，由三个丙二酰辅酶A形成A环，桂皮酰辅酶A则构成B环和提供A、B环之间的三碳链。生成的查尔酮，再经过异构化酶的作用形成二氢黄酮。二氢黄酮在各种酶的作用下，经转化而得到其它类型黄酮类化合物。14.根据黄酮类化合物A环和B环中间的三碳链的氧化程度、三碳链是否构成环状结构、3位是否有羟基取代以及B环（苯基）连接的位置（2或3位）等特点，可将主要的天然黄酮类化合物分为（注：后3种只需要能辨认结构）：黄酮类（以2-苯基色原酮为基本母核，且3位上无含氧基团取代的一类化合物）和黄酮醇类（在黄酮基本母核的3位上连有羟基或其他含氧基团）二氢黄酮类（黄酮基本母核的2、3位双键被氢化而成）和二氢黄酮醇类（黄酮类的2、3位被氢化的基本母核，且常与相应的黄酮醇共存于同一植物体中）异黄酮类（豆科植物葛根的主要成分。母核为3-苯基色原酮的结构，即B环连接在C环的3位上）和二氢异黄酮类（异黄酮的2、3位被氧化的基本母核）查尔酮类（二氢黄酮C环的1、2位键断裂生成的开环衍生物，即三碳链不构成环）和二氢查尔酮类（查尔酮,位双键氢化而成）橙酮类双黄酮类（3,8-双芹菜素型、8,8-双芹菜素型、双苯醚型）花色素类、黄烷醇类（黄烷-3-醇类、黄烷-3,4-二醇类）、其他黄酮类。1.橙酮类 又称为噢哢类，其结构特点是C环为含氧五元环。2.花色素类的结构特点是基本母核的C环无羰基，1位氧原子以佯盐形式存在。3.黄烷醇类可根据其C环的3,4位存在羟基的情况分为黄烷-3-醇和黄烷-3,4-二醇。此类化合物在植物体内可作鞣质的前体。包括黄烷-3-醇类、黄烷-3,4-二醇类。4.双黄酮类是由二分子黄酮衍生物聚合而成的二聚物。常见的天然双黄酮是由两个分子的芹菜素或其甲醚衍生物构成，根据它的结合方式可分为三类：3,8双芹菜素型8,8-双芹菜素型双苯醚型。5.其他黄酮类 口山酮类又称双苯吡酮或苯骈色原酮，其基本母核由苯环与色原酮的2,3位骈合而成。6.游离态黄酮类化合物多为结晶性固体，少数（如黄酮苷类）为无定形粉末。黄酮类化合物大多呈黄色：黄酮（醇）、查耳酮-黄色（交叉共轭体系）；异黄酮-微黄色（共轭链略短）；二氢黄酮（醇）、黄烷醇无色（共轭体系阻断）。7.颜色与结构的关系：与分子中是否存在交叉共轭体系和助色团的种类、数目、取代位置有关，“共轭链越长，颜色越深”。常见苷元：氧苷和碳苷（黄酮类、蒽醌类-芦荟苷、芒果苷）。电子云密度越大，酸性越小。8.在黄酮、黄酮醇分子中，在7位或4位引入-OH及-OCH3等供电子基团后，产生p-共轭，促进电子移位、重排，使共轭系统延长，化合物颜色加深。花色素的颜色可随pH不同而改变，一般pH8.5时显蓝色。9.旋光性：除二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷醇、二氢异黄酮等类型外，其余均无光学活性，黄酮苷多为左旋。苷可溶于甲醇、乙醇和热水，（难）不溶于苯、氯仿等亲脂性有机溶剂。所有（黄酮）苷均有旋光性。10.游离黄酮类化合物一般难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、氯仿、乙醚等有机溶剂及稀碱水溶液中；黄酮、黄酮醇、查耳酮等难溶于水（平面型分子，分子间排列紧密）；二氢黄酮及二氢黄酮醇在水中溶解度稍大（非平面型分子，分子间排列不紧密，）；异黄酮类化合物溶解度稍大（非平面型分子）。分子中引入的羟基越多，则水溶性增大，脂溶性降低；而羟基被甲基化后，则脂溶性增加；糖基越多，水溶性越大（黄酮类化合物的羟基苷化后，则水溶性增加，脂溶性降低）。花色素以离子形式存在，具有盐的通性，水溶性大。11.以黄酮为母核，不同位置酚羟基酸性大小：7,4-二OH7-或4-OH一般酚羟基5-OH（可用碱溶酸沉法分离）。黄酮类化合物因有未共用电子对，故表现出微弱的碱性（全甲基化的多羟基黄酮类化合物碱性较强），可与强无机酸，如浓硫酸、盐酸等生成佯盐，该佯盐极不稳定，加水后即分解。、黄酮类化合物溶于浓硫酸中生成的佯盐常常表现出特殊颜色：黄酮、黄酮醇类显黄色至橙色，并有荧光；二氢黄酮类显橙色（冷时）至紫红色（加热时）；查耳酮类显橙红色至洋红色；异黄酮、二氢异黄酮类显黄色；橙酮类显红色至洋红色。12.黄酮类化合物的颜色反应主要是利用分子中的酚羟基及-吡喃酮环的性质。（一）还原反应 盐酸-镁粉（或锌粉）反应：多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显橙红紫红色，少数显紫蓝色，B环有-OH或-OCH3取代时，颜色随之加深；查耳酮、橙酮、儿茶素类不显色。异黄酮类一般不显色。注意：花色素及部分查耳酮、橙酮等在单纯浓盐酸酸性条件下颜色也会发生变化，故须先做空白对照（若提取液颜色太深，可用石油醚萃取）（自己看）钠汞齐还原反应：黄酮、二氢黄酮、异黄酮、二氢异黄酮类显红色（简单了解）四氢硼钠还原反应：NaBH4是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂。与二氢黄酮类化合物产生红紫色。其它黄酮类化合物均不显色。（二）金属盐类试剂的络合反应 三氯化铝反应：生成的络合物多为黄色，置紫外灯下显鲜黄色荧光，但4-羟基黄酮醇或7,4-二羟基黄酮醇显天蓝色荧光锆盐-枸橼酸反应：黄酮类化合物分子中有游离的3-或5-OH存在时生成黄色络合物，再加2%枸橼酸甲醇溶液，黄色不减退，有3-OH或3，5-二OH；如果黄色显著减退，无3-OH，但有5-OH。因为5-羟基、4-羰基与锆盐生成的络合物稳定性没有3-羟基、4-羰基锆络合物稳定，容易被弱酸分解；得到的锆盐络合物斑点多呈黄绿色并有荧光氨性氯化锶反应：黄酮类化合物有邻二酚羟基时，生成棕色至黑色沉淀。醋酸镁反应：二氢黄酮、二氢黄酮醇类与醋酸镁的甲醇溶液，加热可显天蓝色荧光，若具有C5-OH，色泽更为明显。而黄酮、黄酮醇及异黄酮类等则显黄橙黄褐色。醋酸铅反应：含有酚羟基的黄酮类化合物，产生黄色至红色沉淀；往铅盐沉淀中投入硫化氢气体，可产生硫化铅沉淀。三氯化铁反应：多数黄酮类化合物分子中含有酚羟基，与三氯化铁水溶液或醇溶液发生显色反应，出现紫、绿、蓝等不同颜色。1. 黄酮类化合物的颜色反应主要是利用分子中的酚羟基及-吡喃酮环的性质。（一）还原反应 盐酸-镁粉（或锌粉）反应：多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显红或紫红色，少数显紫蓝色，B环有-OH或-OCH3取代时，颜色随之加深；查耳酮、橙酮、儿茶素类不显色。异黄酮类一般不显色。注意：花色素及部分查耳酮、橙酮等在单纯浓盐酸酸性条件下颜色也会发生变化，故须先做空白对照（若提取液颜色太深，可用石油醚萃取）（自己看）钠汞齐还原反应：黄酮、二氢黄酮、异黄酮、二氢异黄酮类显红色（简单了解）四氢硼钠还原反应：NaBH4是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂。与二氢黄酮类化合物产生红至紫色。其它黄酮类化合物均不显色。（二）金属盐类试剂的络合反应 ：黄酮类化合物分子中若有3-羟基、4-羰基，或5-羟基、4-羰基或邻二酚羟基，生成有色的络合物或有色沉淀三氯化铝反应：生成的络合物多为黄色，置紫外灯下显鲜黄色荧光，但4-羟基黄酮醇或7,4-二羟基黄酮醇显天蓝色荧光（重要）锆盐-枸橼酸反应：黄酮类化合物分子中有3-或5-OH存在时生成黄色络合物，再加2%枸橼酸甲醇溶液，黄色不减退，有3-OH或3，5-二OH；如果黄色显著减退，无3-OH，但有5-OH。因为5-羟基、4-羰基与锆盐生成的络合物稳定性没有3-羟基、4-羰基锆络合物稳定，容易被弱酸分解；得到的锆盐络合物斑点多呈黄绿色并有荧光（重要）氨性氯化锶反应：黄酮类化合物有邻二酚羟基时，生成棕色至黑色沉淀。醋酸镁反应：邻二酚羟基或兼有3-OH、4-羰基或5-OH、4-羰基的黄酮类化合物可与醋酸镁的甲醇溶液，加热可显天蓝色荧光，若具有C5-OH，色泽更为明显。而黄酮、黄酮醇及异黄酮类等则显黄或橙黄色。醋酸铅反应（重要）：含有邻二酚羟基的黄酮类化合物，产生黄色至红色沉淀；往铅盐沉淀中投入硫化氢气体，可产生硫化铅沉淀。碱式醋酸铅与一般酚类化合物均可成沉淀。三氯化铁反应：多数黄酮类化合物分子中含有酚羟基，与三氯化铁水溶液或醇溶液发生显色反应，出现紫、绿、蓝等不同颜色。（三）硼酸显色反应 在无机酸或有机酸存在条件下，5-羟基黄酮及6-羟基查耳酮可与硼酸反应，呈亮黄色。在草酸存在下，显黄色并带绿色荧光。在枸橼酸丙酮存在条件下，只显黄色而无荧光。（四）碱性试剂显色反应 黄酮类化合物与碱性溶液可生成黄色、橙色或红色等。在日光及紫外光下，通过纸斑反应，观察样品用氨蒸气和其他碱性试剂处理后的颜色变化的情况。二氢黄酮类可转变为查耳酮类化合物，显橙或黄色。黄酮类在冷和热的氢氧化钠水溶液中能产生黄或橙色查尔酮类或橙酮类在碱液中能很快产生红或紫红色；二氢黄酮类在冷碱中呈黄或橙色，放置一段时间后加热则呈深红或紫红色，这是二氢黄酮类在碱性条件下开环后变成查耳酮的缘故黄酮醇类在碱液中先呈黄色，当溶液中通入空气后，因3-羟基易氧化，溶液即转变为棕色当黄酮类化合物分子中有3个羟基相邻时，在稀氢氧化钠溶液中往往能产生暗绿色或蓝绿色纤维状沉淀。（五）与五氧化锑反应 查尔酮类生成红或紫红色沉淀，而黄酮、二氢黄酮醇类显黄色至橙色；反应时所用溶剂必须是水（六）其它显色反应 黄酮类化合物酚羟基对位未被取代者加入Gibbs试剂后即显蓝或蓝绿色。2. 黄酮类在花、叶、果等组织中，多以苷的形式存在；在木部坚硬组织中，多以游离苷元形式存在。黄酮类化合物才提取：（一）乙醇或甲醇提取法（提出的杂质较多） 乙醇或甲醇是最常用的提取黄酮类化合物的溶剂，高浓度的醇（如90%95%）适于提取游离黄酮，60%左右浓度的醇适于提取黄酮苷类。提取方法包括冷浸法、渗漉法和回流法（连续回流法）。（二）热水提取法 热水仅限于提取黄酮苷类。热水提取出的杂质较多。（三）碱性水或碱性稀醇提取液（碱溶酸沉法） 适于含有酚羟基的黄酮类化合物。常用的碱性水溶液为稀氢氧化钠溶液和石灰水。稀氢氧化钠水溶液浸出能力较大，但浸出杂质较多。用碱性溶剂提取时，应注意所用的碱浓度不宜过高，以免在强碱下加热时破坏黄酮类化合物母核。在加酸酸化时，酸性也不宜过强，以免生成佯盐。当分子中有邻二酚羟基时，可加硼酸保护。苷元多用CHCl3、Et2O、EtOAc等极性较小溶剂提取；对于-OCH3等成分，用苯、石油醚提取；对于极性大成分，如查耳酮、橙酮、双黄酮、羟基黄酮等用Et0Ac、EtOH等。提取花青素类可加入少量酸，但一般黄酮苷类避免；含羟基的苷或苷元可用碱水提取。黄酮类化合物的分离 （一）溶剂萃取法（系统溶剂分离法）（二）pH梯度萃取法：适用于酸性强弱不同的游