动态MRM优点.docx

对于三重四极杆GC/MS/MS用MRM做定量，需要考虑很多个参数：化合物的保留时间RT，母离子m/z，多个子离子m/z，并需要优化碰撞能量、和每个MRM通道的驻留时间（dwell time）/扫描时间等等，参数的优化和设置很复杂。比如，在用MRM筛查上百个农残时，一次色谱运行中会有多个重叠的MRM ，必须仔细优化每个MRM，采集到足够多的点从而获得足够的灵敏度，可想而知，成百上千个重叠的MRM的优化是极其繁琐的。实验人员为了克服该难题，常把色谱运行分成许多个分段（segment），每个分段中洗脱的组分MRM会在该分段中得以监控。但对于那些在两个相邻分段的接合处附近洗脱的农残，如果这些农残的洗脱从一个分段移到另一个分段，通常需要在两个分段中分别设置它们的MRM，才能“捕捉”到它们。这样在方法中又加入了更多重复的MRM，降低了占空比（duty cycle）即降低了分析方法的通量。比如用MRM做168种农残的筛查，需要用30个分段和336对MRM（Jon Wong et al. J. Agric. Food Chem, 2010, 58 5884-96），而如果保留时间产生了漂移怎么办？如果再加入第169种农残怎么办？方法开发又得重新来！CBS改进了传统的方法创建流程，就像一个真正的化学家一样，CBS重点关注化合物，来建立一个新的工作流程，而不是关注于每一个MRM通道。SCION TQ提供了包括2500个MRM通道和900种常见污染物的化合物库（该库为只读的，用户可无限制地自己建库），库中的每个条目是以化合物为中心的，再关联其它信息，如保留时间、主要的MRM通道、次要的MRM通道、对应的碰撞能量等。这样用CBS的工作流是：1）创建采集方法，自动生成MRM条件。根据化合物名称，从库中选择化合物，添加到方法编辑器，包含了每种化合物的MRM条件。2）用预实验微调保留时间窗口。用标样（如用几组农药混标）做几次预实验，调整定位好每个待测物的保留时间窗口。3）自动优化MRM扫描时间，无需手动设定扫描片段。输入平均峰宽（如：4秒），和每个样品峰的扫描点数（如：15），然后点击“计算扫描时间”按钮，软件将自动计算每个MRM的最佳扫描时间，并在考虑所有重叠的保留时间窗口后进行相应的分配，优化了占空比，不再需要使用分段。4）自动链接采集方法与数据处理方法，使数据处理更加简单。该采集方法和数据处理可互相更新，即：调整了化合物的保留时间，会反映在数据处理中；而数据处理后得到的更新的保留时间或离子比率，可上传至实验方法中，获得一个更新的方法，来检测下批次的样品。而且，对于SCION SQ单四极杆GC-MS，也可用这种CBS库，仅通过使用化合物名称与保留时间，即可迅速将SQ方法转为TQ方法；并可用Excel格式导入样品列表、出具报告，灵活适应于各种报告格式要求。图1显示了CBS工作流的概念。图1 基于化合物的快速筛茶技术（CBS）图2 SCION 上的CBS功能，按化合物名称从库中将化合物及其MRM方法导入方法编辑器，预实验调整保留时间窗口后，点击“Compute Scan Time”，输入所需平均峰宽和采集点数，就能自动优化扫描时间，获得采集方法更多阅读：基于化合物的筛查技术（CBS）：在GC-MS/MS上轻松设置基于MRM的新型多残留改良方法使用三重四极杆GC-MS/MS对蔬菜基质中的258种农药进行分析语言：正在中文化当记者问及“既然您强调简单，那么有没有考虑软件中文化，更适合于中国用户使用”的问题，Meredith先生也是会心一笑地说：“问得好！在布鲁克的气相色谱已经开发了22种语言的操作软件，当然包括中文。对SCION气质联用，我们不是考虑会不会做，而是正在做包括中文的多语言版软件。同样，是为了让全球各地的操作者使用起来更简单！”SCION：体积最小 高灵敏度 稳定耐用SCION TQ：体积最小的三重四极杆GC-MS/MS前文已介绍， SCION TQ是业界体积最小的三重四极杆气质联用系统，其质谱部分的体积为45cm高x 28cm宽x 57cm深。小巧紧凑的设计带来两大好处：（1）为实验室节省空间，比如若把实验室一套原有的单级四极杆GC-MS换成三重四极杆GC-MS/MS，不需要增大任何空间，SCION TQ和单级四极杆GC-MS一样大。（2）让操作者使用更方便，Meredith拿自己作比：“比如像我这样的高度，可以很方便地将手伸到后面开关仪器。”高灵敏度，必须的！质谱界有个“潜规则”，在竞争的市场上，只要发布一款质谱，就一定要比同类竞争产品提高灵敏度指标。起初这种规则只适用于据称整体离子化效率还仅有1的液质联用，而几年前气质联用也加入了这种竞技，新发布的SCION质谱也不例外。比如SCION TQ具有目前业界最高的MRM灵敏度：100 fg八氟萘S/N 5000:1，SCION SQ的全扫描灵敏度为，1 pg八氟萘S/N600:1。稳定耐用先进的无透镜离子通道和axial离子源设计显著提升了SCION系统的稳定性。在一周内对1%柴油基质中的100fgOFN连续进样300次，观察得到基线噪声依然很低，峰强度依然无明显变化。这个例子证明了SCION 系列axial轴向离子源具有超强的抗污染能力和业界领先的稳定性。SCION 系列GC-MS: 稳健的轴向离子源一周内对1%柴油基质中的100fg OFN连续进样300次，经过300针进样后，基线噪声依然很低，峰强度依然无明显变化定位和区别：SCION TQ vs SQ，气质联用 vs 液质联用面向当前市场，SCION SQ仍是主力军针对记者问“三重四极杆GC-MS/MS是否会取代单级四极杆GC-MS”，王克非经理答道：“三重四极杆主要针对复杂基质样品。当前，在中国和发展中国家（包括在美国），单四极杆仍然是实验室的主力军。单四极杆虽然有一些限制，但这些限制可以通过样品制备、增加浓缩倍数来克服，大量的应用还是可以用单四极杆完成。比如，三重四极杆可测到0.1ppb，前处理简单；单四极杆就得增加前处理，收集更多的样品，样品制备时多浓缩一点，还是可以很好测定。所以，单四极杆测定这些农残不是问题，我们仍然还会推广SCION SQ单四极杆及其在农残上的应用，SQ同样可用CBS，很多化合物可以用SIM来检测。可以说这两个是不同档次的产品，比如在省级实验室很多单位都拥有了三重四极杆，但是在县市，大量的应用还是可以用单四极杆。”-我们用MRM模式同时定量测定十几种化合物时，那个按照化合物的保留时间设置时间段有什么用处？一定要设置几个时间段吗？工程师说那个dwell时间不能太少也不能太多，不是很懂先说第一个：比如你要测定15种化合物，因此可以认为一个loop time中有15个SRM行为发生，因此需要大量时间，而针对特定的时间段内，出峰数量有限（比如5个），因此，可以只针对当前可能出峰的目标物做MRM分析，如此可以省却其他（10个）MRM分析的时间来针对当前的5个化合物进行检测，如此可以保证色谱图上的数据点更多，保证峰型以及数据的重复性；再说第二个：dwell time 可以翻译为驻留时间，是四级杆电压稳定后对目标碎片实施信号采集的时间。如果dwell time 太短，则检测器没有足够的时间采集信号，如果dwell time 太长，又会延长每个loop time的长度，导致色谱峰上的数据点减少，因此，合适的dwell time 很重