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一、名词解释 2凝聚:在电解质作用下,破坏了胶体粒子的分散稳态,使胶体粒子聚集的过程。3分配系数:在一定的温度压力下,溶质分散于互不相溶的两相中,达到稳定后,两相中溶质的浓度的比值为分配系数。6絮凝:指在某些高分子絮凝剂存在下,在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程8萃取过程:利用在两个互不相溶的液相中各种组分(包括目的产物)溶解度的不同,从而达到分离的目的9吸附:是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力,使其富集在吸附剂表面的过程。13离子交换:利用离子交换树脂作为吸附剂,将溶液中的待分离组分,依据其电荷差异,依靠库仑力吸附在树脂上,然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来,达到分离的目的。17色谱技术:是一组相关分离方法的总称,色谱柱的一般结构含有固定相(多孔介质)和流动相,根据物质在两相间的分配行为不同(由于亲和力差异),经过多次分配(吸附-解吸-吸附-解吸),达到分离的目的。19等电点沉淀:调节体系pH值,使两性电解质的溶解度下降,析出的操作称为等电点沉淀。20膜分离:利用膜的选择性(孔径大小),以膜的两侧存在的能量差作为推动力,由于溶液中各组分透过膜的迁移率不同而实现分离的一种技术。21化学渗透破壁法:某些化学试剂,如有机溶剂、变性剂、表面活性剂、抗生素、金属螯合剂等,可以改变细胞壁或细胞膜的通透性,从而使胞内物质有选择地渗透出来。23临界胶团浓度:将表面活性剂在非极性有机溶剂相中能形成反胶团的最小浓度称为临界胶团浓度,它与表面活性剂种类有关。24反渗透:在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧,形成大于渗透压的压力差,就可以使溶剂发生倒流,使溶液达到浓缩的效果,这种操作成为反渗透。25乳化液膜系统:乳化液膜系统由膜相、外相和内相三相组成,膜相由烷烃物质组成,最常见的外相是水相,内相一般是微水滴。27色谱阻滞因数:溶质在色谱柱(纸、板)中的移动速率与流动相移动速率之比称为阻滞因数,以Rf表示。28胶团:两性表面活性剂在非极性有机溶剂中亲水性基团自发地向内聚集而成的,内含微小水滴的,空间尺度仅为纳米级的集合型胶体。29膜的浓差极化:是指但溶剂透过膜,而溶质留在膜上,因而使膜面浓度增大,并高于主体中浓度。30超滤:凡是能截留相对分子量在500以上的高分子膜分离过程称为超滤,它主要是用于从溶剂或小分子溶质中将大分子筛分出来。31. 生物分离技术:是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物(发酵液、培养液)及其生物化学产品中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。35盐析:是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异,向溶液中加入一定量的中性盐,使原溶解的物质沉淀析出的分离技术。39功能基团:离子交换树脂中与载体以共价键联结的不能移动的活性基团,又称功能基团43洗脱:利用适当的溶剂,将树脂吸附的物质释放出来,重新转入溶液的过程。44树脂的再生:就是让使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程,树脂的再生反应是交换吸附的逆反应。46流动相:在层析过程中,推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或租临界体等,都称为流动相。47正相色谱:是指固定相的极性高于流动相的极性,因此,在这种层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度快,先从柱中流出来。48反相色谱:是指固定相的极性低于流动相的极性,在这种层析过程中,极性大的分子比极性小的分子移动的速度快而先从柱中流出。49吸附层析:是以吸附剂为固定相,根据待分离物与吸附剂之间吸附力不同而达到分离目的的一种层析技术。50分配层析:是根据在一个有两相同时存在的溶剂系统中,不同物质的分配系数不同而达到分离目的的一种层析技术。51凝胶过滤:层析是以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相,根据物质的分子大小进行分离的一种层析技术。52离子交换层析:是以离子交换剂为固定相,根据物质的带电性质不同而进行分离的一种层析技术。53高效液相色谱:是指选用颗粒极细的高效耐压新型固定相,借助高压泵来输送流动相,并配有实时在线检测器,实现色谱分离过程全部自动化的液相色谱法。54亲和层析:是利用生物活性物质之间的专一亲和吸附作用而进行的层析方法。是近年来发展的纯化酶和其他高分子的一种特殊的层析技术。55疏水层析:是利用表面偶联弱疏水性基团(疏水性配基)的疏水性吸附剂为固定相,根据蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行分离纯化的层析技术。58等电点:是两性物质在其质点的净电荷为零时介质的pH值,溶质净电荷为零,分子间排斥电位降低,吸引力增大,能相互聚集起来,沉淀析出,此时溶质的溶解度最低。二、选择2针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是( C )。A.凝胶过滤 B.离子交换层析C.亲和层析 D.纸层析4从组织中提取酶时,最理想的结果是( C )A.蛋白产量最高B.酶活力单位数值很大C.比活力最高(代表酶的纯度)D.Km最小6下列哪项酶的特性对利用酶作为亲和层析固定相的分析工具是必需的?( B )A.该酶的活力高B.对底物有高度特异亲合性C.酶能被抑制剂抑制D.最适温度高E.酶具有多个亚基45适合小量细胞破碎的方法是( B )A、高压匀浆法 B.超声破碎法 C.高速珠磨法 D.高压挤压法8盐析法沉淀蛋白质的原理是( B )A.降低蛋白质溶液的介电常数B.中和电荷,破坏水膜C.与蛋白质结合成不溶性蛋白D.调节蛋白质溶液pH到等电点10基因工程药物分离纯化过程中,细胞收集常采用的方法( C )A盐析 B.超声波 C.膜过滤 D.层析11氨基酸的结晶纯化是根据氨基酸的( A )性质。A.溶解度和等电点 B.分子量 C.酸碱性 D.生产方式13人血清清蛋白的等电点为4.64,在PH为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电,清蛋白质分子向(A)A :正极移动;B:负极移动;C:不移动;D:不确定。14蛋白质具有两性性质主要原因是( B )A:蛋白质分子有一个羧基和一个氨基;B:蛋白质分子有多个羧基和氨基;C:蛋白质分子有苯环和羟基;D:以上都对15使蛋白质盐析可加入试剂( D )A:氯化钠;B:硫酸;C:硝酸汞;D:硫酸铵16凝胶色谱分离的依据是( B )。A、固定相对各物质的吸附力不同 B、各物质分子大小不同C、各物质在流动相和固定相中的分配系数不同 D、各物质与专一分子的亲和力不同17非对称膜的支撑层( C )。A、与分离层材料不同 B、影响膜的分离性能C、只起支撑作用 D、与分离层孔径相同20乳化液膜的制备中强烈搅拌( C )。A、是为了让浓缩分离充分 B、应用在被萃取相与W/O的混合中C、使内相的尺寸变小 D、应用在膜相与萃取相的乳化中23在蛋白质初步提取的过程中,不能使用的方法( C )。A、双水相萃取 B、超临界流体萃取 C、有机溶剂萃取 D、反胶团萃取24在液膜分离的操作过程中,( B )主要起到稳定液膜的作用。A、载体 B、表面活性剂 C、增强剂 D、膜溶剂25离子交换法是应用离子交换剂作为吸附剂,通过( A )将溶液中带相反电荷的物质吸附在离子交换剂上。A、静电作用 B、疏水作用 C、氢键作用 D、范德华力27丝状(团状)真菌适合采用( A )破碎。A、珠磨法 B、高压匀浆法 C、A与B联合 D、A与B均不行28用来提取产物的溶剂称( C )。A、料液 B、萃取液 C、萃取剂 D、萃余液。29阴离子交换剂( C )。A、可交换的为阴、阳离子 B、可交换的为蛋白质 C、可交换的为阴离子 D、可交换的为阳离子30分配层析中的载体( C )。A、对分离有影响 B、是固定相 C、能吸附溶剂构成固定相 D、是流动相32洗脱体积是( C )。A、凝胶颗粒之间空隙的总体积 B、溶质进入凝胶内部的体积C、与该溶质保留时间相对应的流动相体积 D、溶质从柱中流出时所用的流动相体积34吸附色谱分离的依据是( A )。A、固定相对各物质的吸附力不同 B、各物质分子大小不同C、各物质在流动相和固定相的分配系数不同 D、各物质与专一分子的亲和力不同37下面哪一种是根据酶分子专一性结合的纯化方法( A )。A. 亲和层析 B. 凝胶层析 C. 离子交换层析 D. 盐析38纯化酶时,酶纯度的主要指标是:( D )A .蛋白质浓度 B. 酶量 C .酶的总活力 D. 酶的比活力39盐析法纯化酶类是根据( B )进行纯化。A.根据酶分子电荷性质的纯化方法 B.调节酶溶解度的方法C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法 D.根据酶分子专一性结合的纯化方法43颗粒与流体的密度差越小,颗粒的沉降速度( A )A.越小 B.越大 C.不变 D.无法确定45下列物质属于絮凝剂的有( A )。A、明矾 B、石灰 C、聚丙烯类 D、硫酸亚铁51发酵液的预处理方法不包括( C )A. 加热 B絮凝 C.离心 D. 调pH52其他条件均相同时,优先选用那种固液分离手段( B )A. 离心分离 B过滤 C. 沉降 D.超滤53那种细胞破碎方法适用工业生产( A )A. 高压匀浆 B超声波破碎 C. 渗透压冲击法 D. 酶解法55关于萃取下列说法正确的是( C )A. 酸性物质在酸性条件下萃取 B碱性物质在碱性条件下萃取 C. 两性电解质在等电点时进行提取 D. 两性电解质偏离等电点时进行提取56液一液萃取时常发生乳化作用,如何避免( D )A.剧烈搅拌 B低温 C.静止 58当两种高聚物水溶液相互混合时,二者之间的相互作用不可能产生(D)A. 互不相溶,形成两个水相 B两种高聚物都分配于一相,另一相几乎全部为溶剂水 C. 完全互溶,形成均相的高聚物水溶液 D.形成沉淀61盐析操作中,硫酸铵在什么样的情况下不能使用( B )A.酸性条件 B碱性条件 C.中性条件 D.和溶液酸碱度无关63有机溶剂为什么能够沉淀蛋白质( B )A.介电常数大 B介电常数小 C.中和电荷 D.与蛋白质相互反应65若两性物质结合了较多阳离子,则等电点pH会( A )A.升高 B降低 C.不变 D.以上均有可能66若两性物质结合了较多阴离子,则等电点pH会( B )A.升高 B降低 C.不变 D.以上均有可能68那一种膜孔径最小( C )A.微滤 B超滤(用于活性染料的盐与浓缩) C.反渗透(主要用于海水的淡化) D. 纳米过滤69超滤技术常被用作( C )A. 小分子物质的脱盐和浓缩 B小分子物质的分级分离 C. 小分子物质的纯化 D.固液分离70微孔膜过滤不能用来( D )A. 酶活力测定 B mRNA的测定及纯化 C. 蛋白质含量测定 D.分离离子与小分子71吸附剂和吸附质之间作用力是通过( A )产生的吸附称为物理吸附。A. 范德华力 B库伦力 C.静电引力 D.相互结合76离子交换树脂适用( B )进行溶胀A.水 B乙醇 C.氢氧化钠 D.盐酸79下列关于正相色谱与反相色谱说法正确的是( C )A. 正相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性 B正相色谱层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度慢 C. 反相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性 D. 反相色谱层析过程中,极性大的分子比极性小的分子移动的速度慢80一般来说,可使用正相色谱分离( B )A. 酚 B带电离子 C. 醇 D. 有机酸81分子筛层析指的是( C )A. 吸附层析 B分配层析 C. 凝胶过滤 D. 亲和层析94气相色谱的载气不能用( C )A. 氢气 B氦气 C.氧气 D. 氮气95关于电泳分离中迁移率描述正确的是( A )A.带电分子所带净电荷成正比 B分子的大小成正比 C. 缓冲液的黏度成正比 D.以上都不对99为加快过滤效果通常使用( C )A.电解质 B高分子聚合物 C.惰性助滤剂 D.活性助滤剂102下列哪个不属于高度纯化:( B )A. 层析 B. 吸附法 C. 亲和层析 D.凝胶层析103酶提取液中,除所需酶外,还含有大量的杂蛋白、多糖、脂类和核酸等,为了进一步纯化,可用( E )方法除去杂质。A、调pH值和加热沉淀法 B、蛋白质表面变性法C、降解或沉淀核酸法 D、利用结合底物保护法除去杂蛋白 E、以上都可以104物理萃取即溶质根据( B )的原理进行分离的A.吸附 B.相似相溶 C分子筛 D 亲和105纳米过滤的滤膜孔径( D )A 0.0210m B 0.0010.02m C 2nm D 1nm108单宁沉析法制备菠萝蛋白酶实验中,加入1%的单宁于鲜菠萝汁中产生沉淀,属于( D )沉析原理。(单宁是一种有机酸)A盐析 B有机溶剂沉析 C等电点沉析 D有机酸沉析115下列哪项不属于发酵液的预处理: ( D )A.加热 B.调pH C.絮凝和凝聚 D.层析116下列哪个不属于初步纯化:( C )A .沉淀法 B. 吸附法 C. 离子交换层析 D. 萃取法119高效液相色谱仪的种类很多,但是无论何种高效液相色谱仪,基本上由( D )组成。A 高压输液系统、进样系统、分离系统、过滤系统、记录系统或色谱工作站等五大部分B进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站四大部分C高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统四大部分D高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站等五大部分121超滤膜通常不以其孔径大小作为指标,而以截留分子量作为指标。所谓“分子量截留值”是指阻留率达( B )的最小被截留物质的分子量。A 80%以上 B 90%以上 C 70%以上 D 95%以上123“类似物容易吸附类似物”的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质( B ) A极性溶剂 B非极性溶剂 C水 D溶剂124能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是 ( C ) A 过滤 B 萃取 C 离子交换 D 蒸馏126当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时,蛋白质溶解度 ( C )A、增大 B、减小 C、先增大,后减小 D、先减小,后增大129亲和层析的洗脱过程中,在流动相中减去配基的洗脱方法称作 ( D )A、 阴性洗脱 B、剧烈洗脱 C、正洗脱 D、负洗脱130下列细胞破碎的方法中,哪个方法属于非机械破碎法( A )A.化学法 B. 高压匀浆 C. 超声波破碎 D.高速珠磨131下列哪一项不是常用的滤布材料 ( C )A. 法兰绒 B. 帆布C. 滤纸 D.斜纹布132超滤膜截留的颗粒直径为( B )A 0.0210m B 0.0010.02m C 2nm D 1nm140微滤膜所截留的颗粒直径为( A )A 0.0210m B 0.0010.02m C 2nm D 1nm143气相色谱柱主要有( C )。A填充柱 B毛细管柱 C A或B D A或B及其他148分离纯化早期,由于提取液中成分复杂,目的物浓度稀,因而易采用 ( A )A、分离量大分辨率低的方法 B、分离量小分辨率低的方法C、分离量小分辨率高的方法 D、各种方法都试验一下,根据试验结果确定154反渗透膜的孔径小于( C )A 0.0210m B 0.0010.02m C 2nm D 1,其原因是 ( B )A、凝胶排斥 B、凝胶吸附 C、柱床过长 D、流速过低158将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物,该复合物可选择性地与蛋白质结合,在一定条件下沉淀出来,此方法称为 ( A )A、亲和沉淀 B、聚合物沉淀 C、金属离子沉淀 D、盐析沉淀159在一定的pH和温度下改变离子强度(盐浓度)进行盐析,称作 ( A )A、KS盐析法 B、盐析法 C、重复盐析法 D、分部盐析法160在超滤过程中,主要的推动力是 ( C )A、浓度差 B、 电势差 C、压力 D、重力161下面关于亲和层析载体的说法错误的是 ( B )A、载体必须能充分功能化。B、载体必须有较好的理化稳定性和生物亲和性,尽量减少非专一性吸附。C、载体必须具有高度的水不溶性和亲水性。D、理想的亲和层析载体外观上应为大小均匀的刚性小球。162在选用凝胶层析柱时,为了提高分辨率,宜选用的层析柱是 ( A )A、粗且长的 B、粗且短的 C、细且长的 D、细且短的163如果用大肠杆菌作为宿主细胞,蛋白表达部位为周质,下面哪种细胞破碎的方 法最佳? ( C ) A.匀浆法 B.超声波法 C. 渗透压休克法 D. 冻融法 164盐析法与有机溶剂沉淀法比较, 其优点是 ( B ) A分辨率高 B变性作用小 C杂质易除 D沉淀易分离 165在萃取液用量相同的条件下, 下列哪种萃取方式的理论收率最高 ( C ) A.单级萃取 B.三级错流萃取 C.三级逆流萃取 D.二级逆流萃取 三、判断题1助滤剂是一种可压缩的多孔微粒。() 2通过加入某些反应剂是发酵液进行预处理的方法之一。()5极性溶剂与非极性溶剂互溶。()6溶剂萃取中的乳化现象一定存在。()9液膜能把两个互溶但组成不同的溶液隔开。()10流动相为气体则称为气相色谱。()11用冷溶剂溶出固体材料中的物质的方法又称浸煮。( )12用热溶剂溶出固体材料中的物质的方法又称浸渍。( )14要增加目的物的溶解度,往往要在目的物等电点附近进行提取。( )15应用有机溶剂提取生化成分时,一般在较高温度下进行。( )17生物物质中最常用的干燥方法是减压干燥。()18冷冻干燥适用于高度热敏的生物物质。()20蛋白质变性,一级、二级、三级结构都被破坏。( )21蛋白质类的生物大分子在盐析过程中,最好在高温下进行,因为温度高会增加其溶解度。( )25离子交换剂是一种不溶于酸、碱及有机溶剂的固态学分子化合物。( )26蛋白质变性后溶解度降低,主要是因为电荷被中和及水膜被去除所引起的。( )28当某一蛋白质分子的酸性氨基酸残基数目等于其碱性氨基酸残基数目时,此蛋白质的等电点为7.0。( )29采用氧化铝为吸附剂时,用洗脱剂应从高极性开始,逐渐减低,洗脱剂的极性。( )33超声波破碎法的有效能量利用率极低,操作过程产生大量的热,因此操作需在冰水或有外部冷却的容器中进行。( )35有机溶剂被细胞壁吸收后,会使细胞壁膨胀或溶解,导致破裂,把细胞内产物释放到水相中去。( )36蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pHpI蛋白质带正电。( )37蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pHpI蛋白质带负电。( )38蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pHpI蛋白质带负电。( )39蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pHpI蛋白质带正电。( )40离心是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异而实现分离的。( )43超临界流体温度不变条件下,溶解度随密度(或压力)的增加而增加,而在压力不变时,温度增加情况下,溶解度有可能增加或下降。( )44盐析是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异,向溶液中加入一定量的中性盐,使原溶解的物质沉淀析出的分离技术。( )46在低盐浓度时,盐离子能增加生物分子表面电荷,使生物分子水合作用增强,具有促进溶解的作用。( )47向含有生化物质的水溶液中加入一定量亲水性的有机溶剂,能使生化物质沉淀析出。( )49有机溶剂与水混合要在低温下进行。( )56离子交换速率总是取决于内部扩散速率。( )63只有树脂对被交换离子比原结合在树脂上的离子具有更高的选择性时,静态离子交换操作才有可能获得较好的效果。( )64层析分离是一种化学的分离方法。( )65分离纯化极性大的分子(带电离子等)采用反相色谱(或正相柱),( )66而分离纯化极性小的有机分子(有机酸、醇、酚等)多采用正相色谱(或反相柱)。( )67吸附力较弱的组分,有较低的Rf值。( )69任何情况都优先选择较小孔隙的交换剂。( )70凝胶柱层析可进行生物大分子分子量的测定。( )71在高浓度盐溶液中疏水性相互作用减小。( )72色谱分离技术中固定相都是固体。( )73色谱分离技术中被检测物质的峰越宽越好。( )74制备型HPLC对仪器的要求不像分析型HPLC那样苛刻。( )75在聚丙烯酰胺凝胶中加入阴离子去污剂十二烷基硫酸钠(SDS),影响凝胶的形成。( )76等电聚焦电泳会形成的一个由阳极到阴极逐步递减的pH梯度。( )77在恒速干燥阶段,过程速度由水分从物料内部移动到表面的速度即内扩散所控制。( )78在降速干燥阶段,干燥速度由水的表面汽化速度即外扩散所控制法。( )79渗透压冲击是各种细胞破碎法中最为温和的一种,适用于易于破碎的细胞,如动物细胞和革兰氏阳性菌。( )80等密度梯度离心中,梯度液的密度要包含所有被分离物质的密度。( )81可以用纸色谱的方法来选择、设计液-液萃取分离物质的最佳方案。( )83酸性、中性、碱性氨基酸在强碱性阴离子交换树脂柱上的吸附顺序是碱性氨基酸中性氨基酸酸性氨基酸( )84等密度梯度离心适于分离大小相同密度不同的物质。( )85当气体的温度超过其临界温度,压力超过临界压力之后,物质的聚集状态就介于气态和液态之间,成为超临界流体。( )86盐析反应完全需要一定时间,一般硫酸铵全部加完后,应放置30min以上才可进行固-液分离。( )88疏水柱层析可直接分离盐析后或高盐洗脱下来的蛋白质、酶等生物大分子溶液( )89某结晶物质经硅胶薄层色谱,用一种展开剂展开,显示单一斑点,所以该晶体为一单体。( )90水提醇沉法时根据物质溶解度差别进行分离的方法。( )91采用溶剂提取法提取中草药有效成分时,选择溶剂的原则是“相似相溶原则”。 ( )92凝聚与絮凝作用的原理是相同的,只是沉淀的状态不同。( )93冻结-融化法冻结的作用是破坏细胞膜的疏水键结构,增加其亲水性和通透性来破坏细胞的。( )94发生乳化现象对萃取是有利的。()96由于pH值可能对蛋白的稳定性有较大的影响,故一般通常采用改变离子强度的梯度洗脱( )97盐析作用也能减少有机溶剂在水中的溶解度,使提取液中的水分含量减少。可以促使生化物质转入有机相从而提高萃取率。( )98珠磨法中适当地增加研磨剂的装量可提高细胞破碎率。( )99要增加目的物的溶解度,往往要在目的物等电点附近进行提取。( )100水蒸气蒸馏法是提取挥发油最常用的方法。( )101中性多糖类药物常用水作溶剂来提取,也可用水浸煮,也可以用冷水浸提。( )102凝胶层析会使得大分子物质后流出,小分子物质先流出。()103透析设备简单、操作容易,可用于工业化生产()104有机溶剂(如胍、乙醇、尿素和异丙醇等)可以削弱疏水分子间的相互作用。可以用于任何规模的细胞破碎。( )105液一液萃取时,常发生乳化作用,使有机溶济与水相分层困难。而且无法恢复。()107活性氧化铝可分三种类型:碱性氧化铝、中性和酸性氧化铝。( )108细胞破碎技术是生物分离操作中必需的步骤。( )110分配系数K与溶质的浓度和相体积比无关,它主要取决于相系统的性质、被萃取物质的表面性质和温度。( )111甲醇沉淀作用与乙醇相当,但对蛋白质的变性作用比乙醇、丙酮都小,所以应用广泛。()112氨基酸、蛋白质、多肽、酶、核酸等两性物质可用等电点沉析。( )113同时含有酸、碱两种基团的树脂叫两性树脂( )115盐析一般可在室温下进行,当处理对温度敏感的蛋白质或酶时,盐析操作要在低温下(如04)进行。 ( )116蛋白质类的生物大分子在盐析过程中,最好在高温下进行,因为温度高会增加其溶解度。( )118沉淀法、吸附法、萃取法、超滤法都是进行初步纯化。( )119渗透压冲击是各种细胞破碎法中最为温和的一种,适用于易于破碎的细胞,如动物细胞和革兰氏阴性菌。( )121化学萃取即溶质根据相似相溶的原理在两相间达到分配平衡,萃取剂与溶质之间不发生化学反应。()123采用凝胶过滤分离蛋白质主要取决于蛋白质分子的大小,先将蛋白质混合物上柱然后进行洗脱,小分子的蛋白质由于所受排阻力较小首先被洗脱出来。( )124树脂使用后不可再回收。()四、填空1发酵液常用的固液分离方法有( 离心 )和( 过滤 )等。2常用的蛋白质沉析方法有(等电点沉淀),(盐析)和( 有机溶剂沉淀 )。4过饱和溶液的形成方式有:(饱和溶液冷却),(部分溶剂蒸发),(化学反应结晶法)和(解析法)。5蛋白质分离常用的色谱法有(凝胶色谱法) ,(多糖基离子交换色谱法),(高效液相色谱法)和(亲和色谱法) 。6为使过滤进行的顺利通常要加入(惰性助滤剂)。7离子交换分离操作中,常用的洗脱方法有(pH梯度) 和(离子强度(盐)梯度)。8阴离子交换树脂按照活性基团分类,可分为(强碱型),(弱碱型)和(中等强度);10离子交换树脂由(载体),(活性基团)和(可交换离子)组成。11常用的化学细胞破碎方法有(渗透冲击),(酶消化法),(增溶法),(脂溶法)和(碱处理法)。13影响离子交换选择性的因素有(离子化合价),(离子水化半径),(溶液浓度),(离子强度),(溶液的pH值) ,(有机溶剂),(树脂物理结构)和(辅助力)。15工业离心设备从形式上可分为(管式),(卧螺式),(碟片式),等型式。16膜分离过程中所使用的膜,依据其膜特性(孔径)不同可分为 (微滤膜) ,(超滤膜),(纳滤膜)和(反渗透膜)。17工业上常用的超滤装置有(板式) ,(管式),(螺旋卷式)和(中空纤维式)。18. 影响吸附的主要因素有(吸附剂的性质),(吸附质的性质) ,(温度),(溶液pH值),(盐浓度)和(吸附物浓度和吸附剂用量)。19影响盐析的因素有(溶质种类) ,(溶质浓度),(pH值)和(温度)。20.在结晶操作中,工业上常用的起晶方法有(自然起晶法),(刺激起晶法)和(晶种起晶法)。21.简单地说,离子交换过程实际上只有(外部扩散),(内部扩散)和(化学交换反应) 三步;23.反相高效液相色谱的固定相是(非极性)的,而流动相是(极性)的; 24.超临界流体的特点是与气体有相似的(粘度(扩散系数),与液体有相似的(密度)。25.离子交换树脂的合成方法有(共聚(加聚)和(均聚(缩聚) 两大类; 26.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其(等电点(pI)的不同;28.根据分离机理的不同,色谱法可分为(吸附色谱) ,(离子交换色谱),(凝胶色谱),(分配色谱)和(亲和色谱)。30.常用离心设备可分为(离心沉降)和(离心过滤) 两大类;31.根据物化理论,萃取达到平衡时,溶质在萃取相和萃余相中的(浓度的比值)一定;32.根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同,可将吸附分为(物理) 、(化学) 、(极性)和(交换)吸附;33.离子交换操作一般分为(动态)和(静态)两种;34.蛋白质等生物大分子,在溶液中呈稳定的分散状态,其原因是由于(分子表面电荷) 和(水化层);35.盐析用盐的选择需考虑(盐析作用强)、(溶解度大)、(生物学惰性)和(来源丰富、经济) 等几个方面的因素;36.影响有机溶剂沉淀的因素有(温度)、(pH)、(样品浓度)、(中性盐浓度)和(金属离子)。37.结晶包括三个过程(过饱和溶液的形成)、(晶核的形成)和(晶体的生长)。38.过饱和溶液的形成方法有(饱和溶液冷却)、(部分溶剂蒸发)、(解析)和(化学反应结晶)。39.物料中所含水分可分为(结合水)和(非结合水)三种;40.根据干燥曲线,物料干燥可分为(恒速干燥阶段)和(降速干燥阶段) 两个阶段;41.液液萃取从机理上分析可分为(物理萃取)和(化学萃取)两类;42.大孔网状吸附剂有(非极性)、(中等极性)和(极性)三种主要类型;43.影响离子交换速度的因素有(树脂粒度)、(交联度)、(溶液流速)、(温度)、(离子的大小)、(离子的化合价)和(离子浓度)。44.分配色谱的基本构成要素有(载体)、(固定相)和(流动相)。45.分子筛色谱也称(凝胶色谱)的主要应用是(脱盐)和(分级分离)46.根据膜结构的不同,常用的膜可分为(对称性膜)、(非对称膜)和(复合膜)三类;五、简答1溶剂萃取过程的机理是什么?答:1、简单分子萃取:简单的物理分配过程,被萃取组分以一种简单分子的形式在两相间屋里分配。以中型分子存在,不发生化学反应。2、中型溶剂络合萃取:被萃取物是中型分子,萃取剂也是中型分子,萃取剂与被萃取物结合成为络合物进入有机相。3、酸性阳离子交换萃取:萃取剂为弱酸性有机酸或酸性鳌合剂。金属离子在水相中以阳离子或能解离为阳离子的络离子的形式存在,金属离子与萃取剂反应生成中性鳌合物。4、离子络合萃取:金属离子在水相中形成络合阴离子,萃取剂与氢离子结合形成阳离子,二者构成离子缔合体系进入有机相; 金属阳离子与中性鳌合剂结合成鳌合阳离子,再与水相中的阴离子构成离子缔合体系而进入有机相。2试述凝胶色谱的原理?答:将混合原料加在柱上并用流动相洗脱,则无法进入孔隙内部的大分子直接被洗脱下来,小分子因为可以进入孔隙内部而受到很大的阻滞,最晚被洗脱下来,而中等大小的分子,虽然可以进入孔隙内部但并不深入,受到的阻滞作用不强,因而在两者之间被洗脱下来。4以羧酸吸附蛋白质为例,简要说明离子交换树脂的洗脱方法及其原理?答:1、加碱:主要是调节蛋白质到达等电点,是蛋白质带电量减少,吸附力下降从而被洗脱下来。2、加酸:主要是抑制羧酸的电离,使活性基团带电量下降,吸附力下降从而蛋白质被洗脱下来。3、加盐:依照质量作用定律,把蛋白质洗脱下来。7简述软水和无盐水的制备方法?答:软水的制备:利用钠型磺酸树脂除去水中的钙离子和镁离子等碱金属后即可制得软水。 无盐水的制备:将原水通过氢型强酸性阳离子交换树脂和羟型强碱或弱碱性阴离子交换树脂的组合,经过离子交换反应,将水中所有的阴、阳离子除去,从而制得纯度很高的无盐纯水。8简述盐析的原理及产生的现象?答:当中性盐加入蛋白质分散体系时可能出现以下两种情况:(1)“盐溶”现象低盐浓度下,蛋白质溶解度增大,原因如下:(a)无机离子与蛋白质表面电荷中和,形成离子对,部分中和了蛋白质的电性,使蛋白质分子之间的排斥力减弱,从而能够相互靠拢;(b)中性盐的亲水性大,使蛋白质脱去水化膜,疏水区暴露,由于疏水区的相互作用导致沉淀;9.简述吸附色谱分离技术的原理?答: 利用溶质与吸附剂之间的分子吸附力(范德华力,包括色散力、诱导力、定向力以及氢键)的差异而实现分离10.区分渗透与反渗透?答:渗透是由于存在化学势存在梯度而引起的自发扩散现象。因此,通常情况下,其结果是水从纯水一侧透过半透膜向溶液侧渗透,使后者的液位抬高。如果在溶液一侧施加压力,外界力做功使溶液中水的化学势升高,则纯水通过膜的渗透就会逐渐减小,并最终停止(条件?),此时的压力差就是溶液的渗透压。当时,水将从溶液一侧向纯水一侧移动,此种渗透称之为反渗透。10.何谓等电点沉析法?答:蛋白质再等电点下的溶解度最低,根据这一性质,再溶液中加入一定比例的有机溶剂,破坏蛋白质表面的水化层和双电层,降低分子间斥力,加强了蛋白质分子间的疏水相互作用,使得蛋白质分子得以聚集成团沉淀下来。11.简述凝胶色谱的分离原理?答:凝胶排阻色谱的分离介质(填料)具有均匀的网格结构,其分离原理是具有不同分子量的溶质分子,在流经柱床是,由于大分子难以进入凝胶内部,而从凝胶颗粒之间流出,保留时间短;而小分子溶质可以进入凝胶内部,由于凝胶多孔结构的阻滞作用,流经体积变大,保留时间延长。这样,分子量不同的溶质分子得以分离。12.膜分离过程中,有那些原因会造成膜污染,如何处理?答:(1)膜污染主要有两种情况:一是附着层被滤饼、有机物凝胶、无机物水垢胶体物质或微生物等吸附于表面;另一种是料液中溶质结晶或沉淀造成堵塞。(3分)(2)膜污染是可以预防或减轻的,措施包括料液预处理、膜性质的改善、操作条件改变等方式。(2分)(3)膜污染所引起的通量衰减往往是不可逆的,只能通过清洗的处理方式消除,包括物理方法冲洗和化学药品溶液清洗等。(2分)13.何谓亲和吸附,有何特点?答:亲和吸附是吸附单元操作的一种,它是利用亲和吸附剂与目标物之间的特殊的化学作用实现的高效分离手段。亲和吸附剂的组成包括:惰性载体、手臂链、特异性亲和配基。亲和吸附的特点是高效、简便、适用范围广、分离速度快、条件温和,但载体制备难度大,通用性差,成本较高。14.简述生物分离过程的特点?答: 1、产品丰富:产品的多样性导致分离方法的多样性2、绝大多数生物分离方法来源于化学分离3、生物分离一般比化工分离难度大(1)成分复杂(2)悬液中的目标产物浓度低(3)生物活性,条件相对温和(4)生物产品要求高质量(5)获得高纯度的干燥产品(6)卫生16.何谓反微团,反微团萃取?其特点有哪些?答:胶束是表面活性剂在非极性有机溶剂中形成的一种聚集体当表面活性剂浓度超过临界微团浓度时,表面活性剂会在水溶液中形成聚集体微团和反微团1、微团:表面活性剂的极性头朝外,疏水的尾部朝内,中间形成非极性的“核”2、反微团:表面活性剂的极性头朝内,疏水的尾部向外,中间形成极性的“核”3、反微团的优点(1)极性“水核”具有较强的溶解能力。(2)生物大分子由于具有较强的极性,可溶解于极性水核中,防止与外界有机溶剂接触,减少变性作用。(3)由于“水核”的尺度效应,可以稳定蛋白质的立体结构,增加其结构的刚性,提高其反应性能。因此,可作为酶固定化体系,用于水不溶性底物的生物催化17.简述有机溶剂沉析的原理?答:1、概念:在含有溶质的水溶液中加入一定量亲水的有机溶剂,降低溶质的溶解度,使其沉淀析出。2、原理:(1)降低了溶质的介电常数,使溶质之间的静电引力增加,从而出现聚集现象,导致沉淀。(2)由于有机溶剂的水合作用,降低了自由水的浓度,降低了亲水溶质表面水化层的厚度,降低了亲水性,导致脱水凝聚。19. 影响液一固分离的因素?(一)微生物种类的影响一般真菌的菌丝比较粗大,液一固分离

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