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西葫芦、南瓜中可溶性蛋白质和糖含量的测定和探讨摘 要: 本实验通过对西葫芦、南瓜提取液中可溶性蛋白质和糖含量的测定，研究了不同种类植物组织中可溶性蛋白质和糖的含量。结果如下：西葫芦、南瓜中蛋白质的含量分别是：2.437（mg/g）, 13.225（mg/g）采用蒽酮法测定南瓜、西葫芦中可溶性糖的含量分别是：1.115（g/100g鲜重）,0.491（g/100g鲜重）关键词: 西葫芦;南瓜;可溶性蛋白质;可溶性糖引 言：随着生活质量的提高，我们对食品价值与营养追求越高，身边的水果蔬菜的各种含量的多少，什么身体素质应该多吃何种食物，怎样搭配可以物尽其用，平衡饮食，是我们现代人越来越高的追求。虽然我们可以吃出比如南瓜比较甜，但是具体含量多少，我们也得做一下实验，更加有个了解。 参考百度文献各位学者的论文如百度文库：考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量测定作者：吕淑霞，百度文库：植物组织中可溶性糖含量测定。考马斯亮蓝可以方便测可溶性蛋白质含量，蒽酮法和苯酚法测定可溶性糖，我此次采用蒽酮法测定可溶性糖。主要是通过西葫芦和南瓜的蛋白质，糖的含量大致了解植物中蛋白质，糖含量的相关含量。对蔬菜的这些含量大致了解，对人们生活起一定帮助。1 材料和方法 1.1 材料和试剂 实验材料为西葫芦、南瓜样品。标准蛋白质溶液:由25mg牛血清蛋白加水稀释而成。考马斯亮蓝试剂:100mg考马斯亮蓝，95%乙醇，85%磷酸加蒸馏水混合而成。标准葡萄糖溶液：由100mg葡萄糖加水稀释而成。蒽酮试剂：1g蒽酮，乙酸乙酯混合而成。1.2 方法1.2.1蛋白质和糖类标准曲线的绘制：1.2.1.1蛋白质标准曲线的绘制取6支试管，按下表加入试剂后，在向各管中加入5ml考马斯亮蓝试剂，5min后，以0管为空白对照，在595nm下比色测定吸光值。以蛋白质含量为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。试 剂管 号012345标准蛋白质（ml）00.200.400.600.801.00蒸馏水量(ml)1.000.800.600.400.200蛋白质含量（ug）0204060801001.2.1.2糖类标准曲线的绘制取6支具塞试管，按下表加入试剂后，在向各管中加入0.5ml蒽酮试剂，再缓慢加入5ml浓硫酸，在沸水浴中煮沸10min后冷却。在620nm下比色测定吸光值。以葡萄糖含量为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。管号123456标准葡萄糖原液（ml）00.20.40.60.81.0蒸馏水（ml）2.01.81.61.41.21.0葡萄糖含量（ug）040801201602001.2.2样品测定：1.2.2.1蛋白质样品的测定分别取西葫芦、南瓜各0.25-0.5g，用5ml蒸馏水研磨成浆后，3000r/min离心10min,测上清液总体积。吸取样品提取液1.0ml稀释，加入5ml考马斯亮蓝试剂，摇匀，放置两分钟后在595nm下比色，测吸光度，并通过标准曲线查得蛋白质含量。1.2.2.2糖类样品的测定分别取西葫芦、南瓜各1g，置于研钵中，用5ml蒸馏水研磨成浆，然后转入20ml试管中，用5ml蒸馏水充分洗涤研钵，洗液一并转入刻度试管中。置沸水浴中加盖煮沸10min，冷却后在4000r/min下离心10min，滤液收集到100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀备用。用移液管吸取1ml提取液于20ml具塞刻度试管中，加1ml水和0.5ml蒽酮试剂，再缓慢加入5ml浓硫酸，盖上试管塞后摇匀，再置沸水浴中10min，冷却至室温，在波长620nm下比色，测定吸光值。并通过标准曲线得知相应的葡萄糖含量。2结果2.1蛋白质和糖类标准曲线：各管中标准蛋白质的吸光值见表1 表1 各试管中标准蛋白质的吸光值管号012345蛋白质含量（ug）020406080100吸光度00.00080.0050.0120.0180.030各管中标准葡萄糖的吸光值见表2表2 各试管中标准葡萄糖的吸光值管号123456葡萄糖含量（ug）04080120160200吸光度00.1050.2620.3880.4760.653蛋白质标准曲线的绘制：多糖标准曲线的绘制:2.2西葫芦、南瓜中蛋白质和糖吸光度：样品西葫芦南瓜蛋白质吸光度0.0960.646糖类吸光度1.3092.436蛋白质提取液总体积（ml）8.16.6 2.3结果: C查标准曲线值， ugVt提取液总体积， mlVs测样时加样量，mlWf样品鲜重，g蛋白质含量(ug)提取液总体积ml测样时加样量，ml样品鲜重，g西葫芦260.754.31.00.46南瓜1635.753.81.00.47将西葫芦蛋白质吸光值代入y=0.0004x-0.0083，得x=260.75所以西葫芦中蛋白质的含量=2.437（mg/g）将南瓜蛋白质吸光值代入y=0.0004x-0.0083,得x=1635.75所以南瓜中蛋白质的含量=13.225（mg/g）样品含糖量=样品含量（ug）*稀释倍数*100/样品重（g）*106g/100g鲜重糖含量 (ug) 糖样品鲜重（g）糖提取液总体积（ml）稀释后总体积(ml)稀释倍数西葫芦401.5761.00998.110012.34南瓜743.091.00956.610015.15将西葫芦糖类吸光度代入y=0.0033x-0.0162，得x=401.576所以西葫芦中糖含量=0.491（g/100g鲜重）将南瓜糖类吸光度代入y=0.0033x-0.0162，得x=743.09所以南瓜中糖含量=1.115（g/100g鲜重）3讨论由上表可以看出，南瓜中蛋白质和糖含量均高于西葫芦，两种蔬菜营养价值不同。而它们的蛋白质和糖类含量与其他蔬菜相比并非很高，可见，不同蔬菜含有不同比例的营养，应合理膳食。通过对两种蔬菜中蛋白质和糖含量的测定，清楚的知道了南瓜含有更多的蛋白质和糖类。4参考文献1 文赤夫.董爱文.李国章.雷姝.雷勇 蒽酮比色法测定紫花地丁中总糖及还原糖含量 期刊论文 -现代食品科技2005(3)2 何照范;张迪青 保健食品化学及其检测技术 19983 刘魁英 食品研究与数据分析 1998 4 李娟,张耀庭,曾伟,罗璇,廖长春应用考马斯亮蓝法测定总蛋白含量2000年第13