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硝基呋喃硝基呋喃类药物是一种广谱抗生素，对大多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌、真菌和原虫等病原体均有杀灭作用。它们作用于微生物酶系统，抑制乙酰辅酶A，干扰微生物糖类的代谢，从而起抑菌作用。硝基呋喃类药物曾广泛应用于畜禽及水产养殖业，以治疗由大肠杆菌或沙门氏菌所引起的肠炎、疥疮、赤鳍病、溃疡病等。由于硝基呋喃类药物及其代谢物对人体有致癌、致畸胎副作用，中国卫生部于2010年3月22日将硝基呋喃类药物呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林列入可能违法添加的非食用物质黑名单。中文名 硝基呋喃 外文名 Nitrofuran 应用 抗生素 安全性 致癌、致畸 物质性质 有机物 性状 黄色粉末1简介硝基呋喃类药物常见的有以下4种：呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林。硝基呋喃类物质均为性质稳定的黄色粉末，无味或味微苦。呋喃唑酮几乎不溶于水和乙醇，呋喃西林难溶于水，微溶于乙醇，呋喃妥因几乎不溶于水，微溶于乙醇。硝基呋喃类原型药在生物体内代谢迅速，其代谢产物分别为AOZ、AMOZ、AHD、SEM，和蛋白质结合而相当稳定，故常利用代谢物的检测来反应硝基呋喃类药物的残留状况。常见硝基呋喃类药物及其代谢物和衍生物如下表所示，常见的硝基呋喃类药物：原物名称对应代谢物衍生物呋喃唑酮（Furazolldone）3-氨基-2-恶唑烷酮（AOZ）2-NBA-AOZ呋喃它酮（Furaltatone）5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮（AMOZ）5-morpholine-methyl-3-amino-2-oxazolidinone2-NBA-AMOZ呋喃妥因（Nitrofurantoin）1-氨基-2-乙内酰（AHD）1-Aminohydantoin2-NBA-AHD呋喃西林（Nitrofurazon）氨基脲（SEM）Semicarbazid2-NBA-SEM常见硝基呋喃类药物的分子结构式如下图所示：呋喃妥因呋喃西林呋喃它酮2应用人类疾病治疗硝基呋喃类药物在人类疾病治疗上也有一定的应用，以下是常见硝基呋喃类药物的简单应用介绍。呋喃妥因（呋喃坦啶）为抑菌剂，多数大肠杆菌、肠球菌对其敏感。血药浓度很低，不适用于全身感染的治疗，临床主要用于敏感细菌所致的泌尿道感染。常见消化道反应如恶心、呕吐、腹泻。偶见药热、粒细胞减少等变态反应及头痛、头晕、嗜睡、多发性神经炎等神经系统症状。6-磷酸葡萄糖脱氢酶缺乏者尚可出现溶血性贫血2。呋喃唑酮（痢特灵）口服吸收少，肠内浓度高。主要用于细菌性痢疾和旅游者腹泻。也可用于伤寒、霍乱等。除胃肠道反应和过敏外，偶可引起溶血性贫血和黄疸2。呋喃它酮内服后在肠道不易吸收，故主要用于肠道感染，也可用于球虫病、火鸡黑头病的治疗2。呋喃西林临床仅用作消毒防腐药，用于皮肤及粘膜的感染，如化脓性中耳炎、化脓性皮炎、急慢性鼻炎、烧伤、溃疡等。对组织几无刺激，脓、血对其消毒作用无明显影响3。畜禽及水产养殖业硝基呋喃类因为价格较低且效果好，而广泛应用于畜禽及水产养殖业，以治疗由大肠杆菌或沙门氏菌引起的肠炎、疥疮、赤鳍病、溃疡病等。由于硝基呋喃类药物及其代谢物对人体有致癌、致畸胎副作用，个别国家已经禁止硝基呋喃类药物在畜禽及水产动物食品中使用，并严格执行对水产品中硝基呋喃的残留检测。中华人民共和国农业部于2002年12月24日发布的公告第235号及于2005年10月28日发布的公告第560号，硝基呋喃类药物为在饲养过程中禁止使用的药物，在动物性食品中不得检出。自此，在动物饲养过程中使用硝基呋喃类药物成为非法行为。3安全性评价研究表明，硝基呋喃类药物具有严重的致癌、致畸胎等毒副作用4-5，1995年起欧盟禁止硝基呋喃类药物在畜禽及水产动物食品中使用，并严格执行对水产中硝基呋喃的残留检测，2002年美国亦随之制订相应法规。2002年12月24日发布的中华人民共和国农业部公告第235号及2005年10月28日发布的中华人民共和国农业部公告第560号，硝基呋喃类药物为在饲养过程中禁止使用的药物，在动物性食品中不得检出。鉴于此，2010年3月22日卫生部发布的食品中可能违法添加的非食用物质名单（第四批）中，明确将硝基呋喃类药物呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林、呋喃妥因列为非食用物质。4检测硝基呋喃类原型药在生物体内代谢迅速，无法检测。但其代谢产物因和蛋白质结合而保证长时间稳定存在。所以一般以硝基呋喃类药物代谢物为目标分析物的检测，来达到检测硝基呋喃类药物残留量的目的。检测前处理在检测前一般需要对样品进行处理，一般分为洗涤、水解和衍生化及净化等处理步骤，下面以国家标准检测方法（GB/T20752-2006）和行业标准方法（SN/T 1627-2005）为例介绍一下检测前处理的一般步骤。洗涤GB/T20752-2006：2g均质好的样品，15ml的甲醇-水（2+1），混匀1min，4000rmp离心，弃掉上清液。SN/T 1627-2005：1g组织，不用洗涤。水解和衍生化GB/T20752-2006：加入20ml 0.2M盐酸，加入0.3ml的衍生化试剂（75mg 2-硝基苯甲醛溶于10ml二甲基亚砜，0.05M），37避光振荡16h。SN/T 1627-2005：加入30ml 0.125M盐酸，加入1ml的衍生化试剂（100mg 2-硝基苯甲醛溶于12.5ml二甲基亚砜），37避光振荡16h。净化GB/T20752-2006：加入5ml 0.1M的磷酸氢二钾，并用1M氢氧化钠调pH到7.4，离心上清液过HLB柱，5ml乙酸乙酯洗脱，40 吹干，定容到1ml（10ml乙腈+0.3ml，用水定容到100ml）SN/T 1627-2005：加入4ml 1M的氢氧化钠，并用1M盐酸和0.1M氢氧化钠调pH到7-7.5，3000rmp离心10min，上清液倒入250ml的分液漏斗中，残渣用5ml水洗， 3000rmp离心10min，上清液也倒入250ml的分液漏斗中，加乙酸乙酯40ml，振摇1ml，静置3min，重复提取1次，合并乙酸乙酯，通过装无水硫酸钠的漏斗过滤至鸡心瓶中，50 旋蒸至3-5ml，再转移到试管中， 50 吹干，定容至1ml（0.1%乙酸：乙腈：甲醇 3：3：2）。检测方法经过对样品检测前的处理后，就可以对样品中的硝基呋喃类药物代谢物残留量进行检测，有关猪肉、禽肉、水产品中硝基呋喃类药物代谢残留量测定的方法，国家有相应的检测标准，也有相关的行业标准，另外文献报道也有一些检测方法。国家和行业标准检测方法基本是液相色谱法或液相色谱-串联质谱法，区别在于提取溶液和净化方法上有差异，以及外标法或内标法定量的不同，检出限大多为0.5ug/kg。文献报道有固相萃取液相色谱-质谱法和液相色谱-串联质谱组合法，其中前者与国家、行业标准检测方法的检出限相同，后者检出限能达到0.03 ug/kg。已公开的各类硝基呋喃类药物代谢物质残留的检测方法编号方法名称方法简单介绍1猪肉、牛肉、鸡肉、猪肝和水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法6样品中残留的硝基呋喃类代谢物在酸性条件下用2-硝基苯甲醛衍生化，正己烷脱脂，用HLB柱净化，点喷雾离子化，液相色谱-串联质谱检测，外标法或同位素内标法定量2动物源食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法高效液相色谱/串联质谱法7样品中残留的硝基呋喃类代谢物在酸性条件下用2-硝基苯甲醛衍生化，乙酸乙酯提取，正己烷脱脂净化，点喷雾离子化，液相色谱-串联质谱检测，同位素内标法定量。3动物源食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量的测定高效液相色谱-串联质谱法8样品依次用甲醇、乙醇、乙醚洗涤，在酸性条件下用2-硝基苯甲醛衍生化，乙酸乙酯提取，电喷雾离子化，液相色谱-串联质谱检测，同位素内标法定量。4进出口动物源食品中硝基呋喃类代谢物残留量测定方法高效液相色谱串联质谱法9样品中残留的硝基呋喃类代谢物在酸性条件下用2-硝基苯甲醛衍生化，乙酸乙酯提取，氯化钠溶液反萃取净化，电喷雾离子化，液相色谱-串联质谱检测，同位素内标法定量。5水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法10样品中残留的的硝基呋喃类代谢物在酸性条件下用2-硝基苯甲醛衍生化，乙酸乙酯提取，电喷雾离子化，液相色谱-串联质谱检测，同位素内标法定量。6水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定高效液相色谱法11样品中残留的硝基呋喃类代谢物用三氯乙酸-甲醇溶液提取，经邻氯苯甲醛衍生化，乙酸乙酯提取，固相萃取柱净化，电喷雾离子化，液相色谱-串联质谱检测，外标法定量。7固相萃取高效液相色谱-质谱法测定动物组织中硝基呋喃代谢产物12样品中残留的硝基呋喃类代谢物在酸性条件下用2-硝基苯甲醛或2-氯苯甲醛衍生化，固相萃取柱净化，电喷雾离子化，液相色谱-质谱检测，同位素内标法定量。8液相色谱/串联质谱线性组合法测定动物组织中硝基呋喃类代谢产物13样品中残留的硝基呋喃类代谢物在酸性条件下用2-硝基苯甲醛衍生化，乙酸乙酯提取，氯化钠溶液洗涤，自制净化试剂净化，电喷雾离子化，液相色谱-串联质谱检测，同位素内标法定量。除表格中介绍的检测方法用于猪肉、禽肉、动物性水产品中外，高效液相色谱或高效液相色谱-串联质谱法还可以用于测定奶粉14、蜂王浆15、饲料16中硝基呋喃类药物的含量。5相关报道1.全国多宝鱼养殖面积已超过500万平方米，年产量在4万吨左右。但自上海查出含硝基呋喃、孔雀石绿等违禁药物后，水产品有毒物质残留问题瞬间引爆。有人担心，被确定使用禁用药物喂养的多宝鱼可能面临“退市”命运。北京市场停止销售多宝鱼，上海超市、饭店主动停售，广州多宝鱼销量价格下挫，山东暂停多宝鱼出货销售17。2.宁波慈溪某进出口公司的27.5吨冻烤鳗由于被检测出硝基呋喃类代谢产物（AOZ）超标而遭到日本方面的退货，损失高达54.6万美元 是宁波口岸2006年来首批因药物残留超标遭退运的出口海产品。据统计，2006年1月份宁波口岸遭退运的水产品共计85.15吨，价值19.58万美元，同比分别增长400.88%和993.85%，出口水海产品的品质问题值得关注18。3. 2006年10月18日，台湾媒体称，台湾民进党立委郑国忠指出，“卫生署”委托“经济部标准检验局”抽检从中国大陆进口的大闸蟹，验出含有禁用抗生素。“卫生署”食品卫生处长萧东鸣晚间响应，9月1日至10月12日，大陆销到台湾的大闸蟹共154批，其中对59批进行抽检，至少有一批629公斤验出含致癌