第一次盆栽试验.doc

有机螯合剂对东南景天吸收重金属影响的盆栽试验一 试验方案处理代号螯合剂及其浓度CK1不种东南景天，不施螯合剂（每kg土浇200mL双蒸水）CK2只种东南景天，不施螯合剂（每kg土浇200mL双蒸水）湿地松11每kg土施200mL 11湿地松叶子汁液过滤液湿地松12每kg土施200mL 12湿地松叶子汁液过滤液湿地松13每kg土施200mL 13湿地松叶子汁液过滤液酸藤果11每kg土施200mL 11酸藤果叶子汁液过滤液酸藤果12每kg土施200mL 12酸藤果叶子汁液过滤液酸藤果11每kg土施200mL 13酸藤果叶子汁液过滤液湿地松浆施200mL 12湿地松叶子汁液滤液/kg土，再加产生200mL滤液所需残渣酸藤果浆施200mL 12酸藤果叶子汁液滤液/kg土，再加产生200mL滤液所需残渣EDTA1.25每kg土施1.25mmol EDTA 二钠(每kg土200ml 6.25 mmol/LEDTA 二钠)EDTA2.50每kg土施2.50mmol EDTA 二钠(每kg土200ml 12.5 mmol/LEDTA 二钠)EDTA5.00每kg土施5.00mmol EDTA 二钠(每kg土200ml 25 mmol/LEDTA 二钠)柠檬酸5.00每kg土施5.00mmol柠檬酸(每kg土200ml 25mmol/L柠檬酸)MC5.00每kg土施5.00mmol 混合添加剂(每kg土200ml 25 mmol/L混合添加剂)1. 空白1(CK1，不种东南景天，不施螯合剂)2. 空白2（CK2，只种东南景天，不施螯合剂）3. EDTA 1.25 mmol/kg土(每kg土200ml 6.25 mmol/L)4. EDTA 2.50 mmol/kg土(每kg土200ml 12.5 mmol/L)5. EDTA 5.00mmol/kg土 (每kg土200ml 25 mmol/L)6. 柠檬酸 5.00mmol/kg土(每kg土200ml 25 mmol/L)7. MC 5.00 mmol/kg土(每kg土200ml 25 mmol/L)8. 湿地松12（不过滤）(200ml/kg土，再加入产生200mL汁液所需残渣)9. 酸藤果12（不过滤）(200ml/kg土，再加入产生200mL汁液所需残渣)10. 湿地松11（过滤）(200ml/kg土)11. 湿地松12（过滤）(200ml/kg土)12. 湿地松13（过滤）(200ml/kg土)13. 酸藤果11（过滤）(200ml/kg土)14. 酸藤果12（过滤）(200ml/kg土)15. 酸藤果13（过滤）(200ml/kg土)每处理4次重复，约2008年1月10施用。1.25mmol/kg土，可配成6.25mmol/L溶液2000mL，每盆施400mL。2.50mmol/kg土，可配成12.5mmol/L溶液2000mL，每盆施400mL。5.00mmol/kg土，可配成25mmol/L溶液2000mL，每盆施400mL。植物汁液每盆施400mL。25mmol/L柠檬酸（分子量：210.14）2000mL：250.0012210.14=10.5070g125mmol/L EDTA二钠（分子量：372.24）2000mL：1250.0012372.24=93.0600 g（无法配1000 mmol/L EDTA二钠，因为浓度太高，无法溶解）取125mmol/L EDTA 400mL定容至2000mL即得25 mmol/L EDTA溶液；取125mmol/L EDTA 200mL定容至2000mL即得12.5 mmol/L EDTA溶液；取125mmol/L EDTA 100mL定容至2000mL即得6.25 mmol/L EDTA溶液。MC：柠檬酸:EDTA:KCl摩尔比10:2:325mmol/L MC（KCl分子量：74.55）2000mL的配制：柠檬酸：250.00110/152210.14 = 7.0047gEDTA：250.0012/152372.24 = 2.4816gKCl：250.0013/15274.55 = 0.7455g二 盆子规格：上口直径16.5cm，底部直径：11cm，高：14cm。三 土壤来源：广东省清远市佛冈县水头镇铜溪村四 土壤处理：风干后，磨碎，过5mm筛子。五 称土（2007年9月7日）：称2 kg土，置于塑料盆中，加蒸馏水500mL，使其平衡；9月12日浇一次500mL蒸馏水；9月21日再浇一次400mL。六 盆栽土水分测定（2007年9月8日）：称过1mm筛的土壤约5.0000g，置于铝盒中，在105烘箱中烘6小时，测其水分含量。七 施肥：总施肥量：0.40g尿素/盆，0.80g KH2PO4/盆。分期施用：基肥0.20g尿素/盆，0.40g KH2PO4/盆； 追肥0.20g尿素/盆，0.40g KH2PO4/盆。(土壤分装于塑料小花盆中,每盆装土0.4kg(按干土计),每盆各施0.08g尿素和0.16gKH2PO4.参考：龙新宪等.超积累生态型东南景天吸收锌的特性.生态学报，2006，26(2):334-340 .)八07年10月8日种上东南景天，5株/盆，每株8厘米左右，先浇300mL蒸馏水/盆，再用100mL蒸馏水溶解肥料（0.20g尿素/盆，0.40g KH2PO4/盆），浇入盆中。经验教训：0.2g20盆4.00g尿素，0.4g20盆8.00g KH2PO4，溶于2000mL，每盆浇100mL，得20盆。种后十几天，发现有部分东南景天腐烂，症状先从两端开始，可能与施肥有关，所以可不施基肥，改作施两次追肥；也可能与通气有关，种前应松土，水不能浇得太多。浇水时应把水倒入底盆，使土壤经毛细管将水往上吸。不能从上往下浇，否则土壤易板结。种植前应松土。九08年1月6日到佛冈水头镇铜溪村采松树叶和酸藤子叶，此时酸藤子已经开花，叶子已经减少，变老。松树叶由于受霜冻有些叶尖已变黄。1月7日打浆，用纱布过滤更好。请曾曙才老师鉴定植物，他让林学院风景园林系的秦新生老师帮忙鉴定，结果是酸藤子（Embelia Laeta(L.) Mez）；湿地松（Pinus elliottii Engelm.）；马尾松（Pinus massoniana Lamb.）打浆时需湿地松、酸藤果和双蒸水重植物比例需叶子重(kg)需双蒸水重 (kg)湿地松112212（留渣）241313酸藤子112212（留渣）241313植物产生汁液体积(mL)产生残渣重量(g)产生400mL汁液需渣量(g)12酸藤子2186725.58132.7712湿地松2000812.22162.44编号处理具体操作（每盆）1空白1(CK1)(不种东南景天，不施螯合剂) 加400mL双蒸水2空白2（CK2）（只种东南景天，不施螯合剂）加400mL双蒸水3EDTA 1.25 mmol/kg土加入6.25 mmol/L EDTA 400mL4EDTA 2.50 mmol/kg土加入12.5 mmol/L EDTA 400mL5EDTA 5.00mmol/kg土加入25 mmol/L EDTA 400mL6柠檬酸5.00mmol/kg土加入25 mmol/L柠檬酸 400mL7MC 5.00 mmol/kg土加入25 mmol/L MC 400mL8湿地松12（不过滤）加入400mL汁液，再加入162.44g残渣9酸藤子12（不过滤）加入400mL汁液，再加入132.77g残渣10湿地松11（过滤）加入400mL 湿地松11汁液11湿地松12（过滤）加入400mL 湿地松12汁液12湿地松13（过滤）加入400mL 湿地松13汁液13酸藤子11（过滤）加入400mL 酸藤子11汁液14酸藤子12（过滤）加入400mL 酸藤子12汁液15酸藤子13（过滤）加入400mL 酸藤子13汁液盆钵排序a3a2a9a12a10a7a1a14a4a11a5a8a6a13a15b10b12b7b5b4b2b14b1b13b9b6b15b8b11b3c4c1c6c3c14c13c5c2c8c11c15c9c12c7c10d7d15d8d10d1d4d6d12d3d9d13d11d2d14d5十2008年1月10日施入螯合剂，先施200mL/盆。发现所加的残渣量过大（已经全加入，湿地松加162.44g，酸藤子加132.77g），特别是湿地松，几乎没空间可加。可能是加400mL量太大，或者是每盆种的密度过大（每盆5株，最好3株）。1月12日再施200mL/盆。此时酸藤子渣已经开始腐烂，长白毛。十一2008年1月14日测定螯合剂pH处理pH双蒸水7.326.25 mmol/L EDTA5.0112.5 mmol/L EDTA4.7825 mmol/L EDTA4.6625 mmol/L MC2.8125 mmol/L柠檬酸2.3311酸藤子汁液3.0512酸藤子汁液3.1613酸藤子汁液3.2211湿地松汁液3.2712湿地松汁液3.3213湿地松汁液3.32许田芬08年1月16日在广州好当家市场购买几种柑桔，打浆测其pH名称果肉pH果皮pH(加双蒸水)江西甜橙（红牛橙）4.055.54沙糖桔3.995.50金桔4.29冰糖橙4.005.67芦柑3.405.30食用醋3.30十二2008年1月19日 昨天（1月18日）发现第五处理（EDTA 5.00mmol/kg土）的四个重复的叶尖边缘（特别是嫩叶）出现黑褐色枯斑坏死。第四处理也出现如此现象，只是程度低些。a12和a9从一开始就长得很差，估计其生物量是最小的。十三2008年1月22日 施追肥（此时是东南景天生长旺盛期，可能在最后一个月内养分不足） 0.2g20盆=4g尿素，0.4g20盆=8g KH2PO4，溶于2000mL，每盆浇100mL，至少得19盆。称3份。 0.2g5盆=1g尿素，0.4g5盆=2g KH2PO4，溶于500mL，每盆浇100mL，至少得4盆。称1份。十四2008年2月23日收获东南景天，用剪刀剪取地上部，留根部作为第二次盆栽试验。（可能剪得太厉害，应留一两个节芽。）马上称（用百分之一电子天平）其鲜重，然后留120克左右，先用自来水冲洗干净，再用双蒸水漂洗，晾干，取16个样品用于测定东南景天的水分含量，置于烘箱中先在105杀青30分钟，然后在65下烘干至恒重。十五2008年3月5日测定东南景天重金属含量，发现只有EDTA5.0这一处理与其它处理有显著差异，酸藤子和松树叶对于提高东南景天重金属含量没有效果。因此，第二次盆栽试验只保留一部分处理，不再做为重点。十六2008年3月12日取土样，每盆取70克土，将四个重复处理混为一个样（每个重复取15克混合）用于测定土壤细菌，放在冰箱（4）里保存待测；其它风干，用于测定土壤重金属和有机质。十七. 土壤有效重金属的测定（DTPA提取态，DTPA-TEA浸提-AAS法）DTPA提取剂的配制：称取TEA（三乙醇胺，液体）29.984g，置于烧杯中，加DTPA（二乙基三胺五乙酸）3.934g，再加CaCl22H2O 2.94g，加双蒸水溶解，转移至2000mL容量瓶，稀释至1900mL，在pH计上用6molL-1 HCl调节至pH7.3（2000mL提取液约需加6molL-1 HCl 17mL），定容，倒入塑料桶中保存。需配12000mL。6molL-1 HCl的配制：量取浓HCl（优级纯）125mL，定容于250mL容量瓶。测定步骤：称取通过1mm筛的风干土12.50g，置于50mL塑料瓶，加DTPA提取剂25.0mL，25振荡2h，过滤。稀释20倍。原液测定Cd、Pb，稀释液测定Zn。在原子吸收分光光度计上测定。十八. 09年2月18日测定重金属有效态（DTPA提取态）（过100目土）第一次盆栽试验编号处理1a12a23a3