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文档简介

血糖的测定 实验四 血糖及血糖水平的概念 血糖 指血液中的单糖 葡萄糖 血糖水平 血浆中葡萄糖浓度 血糖总维持在恒定水平 3 9 6 7mmol L 调节血糖水平的激素 胰岛素 胰高血糖素 糖皮质激素和肾上腺素 血糖水平异常 高血糖及糖尿病 低血糖 临床 血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的主要依据 科研 在代谢疾病的研究中 常测定血糖 在某些药物的研究中 也涉及血糖的测定 测定血糖的意义 测定方法 无机化学法 Folin Wu法 有机化学法 邻甲苯胺法 酶法 葡萄糖氧化酶法 血糖测定的常用方法 葡萄糖氧化酶 过氧化物酶法原理 1 葡萄糖 O2 H2O 2 H2O2 4 氨基安替吡啉 苯酚 葡萄糖酸 H2O2 葡萄糖氧化酶 GOD H2O 红色醌式物质 过氧化物酶 POD Trinder反应 505nm 光吸收法测定 相对血糖浓度 分光光度计的工作原理 朗伯 比尔定律 朗伯定律 A k1L比尔定律 A k2C朗伯 比尔定律 如同时考虑液层厚度和溶液浓度对吸光度的影响 则吸光度与溶质的浓度和溶液的厚度的乘积成正比 A KLC 朗伯 比尔定律应用 A标 KC标LA样 KC样L 标准品法测定未知样品含量 1 接通电源 调整波长 2 比色杯中加入空白及待测样品 并放入分光光度计中 注意 加入样品量不超过比色杯体积的2 3 3 调模式为 透射比 对空白对照进行调 0 开盖 和调 100 闭盖 4 调模式为 吸光度 将空白对照调 0 测定待测样品的吸光度值 分光光度计的使用 葡萄糖氧化酶 过氧化物酶法检测激素对血糖浓度的影响 方法 1 取4支试管 按下表加入试剂 实验步骤 充分混匀 37 水浴中保温20min 冷却至室温后 505nm处比色 比色方法 以空白管调零 读取标准管及测定管光密度值 2 计算 依据朗伯 比尔定律 A KLC标准管葡萄糖浓度 5mmol L 正确使用比色器皿 手拿比色皿的毛面 比色液应占比色皿的2 3 血糖测定应在取血后2小时内完成 放置太久 血糖易分解 故使含量降低 酶酚混合液一般现用现配 注意事项 小结 1 葡萄糖氧化酶 过氧化物酶比色法测定血糖的原理 2 分光光度计的正确使
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