绿茶素及壳多糖抗肿瘤实验研究.doc

绿茶素及壳多糖抗肿瘤实验研究绿茶素及壳多糖抗肿瘤实验研究更新日期：2011-01-24 点击： 应自忠张慧胡松黄丽霞韩志红 摘要：采用武汉市职工医学院从湖北绿茶中提取的绿茶素(TP-91)及湖北大学生命科学院从蚕蛹中提取的壳多糖进行抗肿瘤实验研究。瘤株为小鼠EAC。结果表明绿茶素及壳多糖对肿瘤的抑瘤率分别为40.33%和52.10%；对外周血淋巴细胞计数分别为8.802.41，8.303.18与对照组(2.840.61)比较有显著差异(P0.01)；对外周血T淋巴细胞计数分别为24.204.56，14.144.37与对照组(4.103.35)比较有显著性差异(P0.01)。结果提示绿茶素及壳多糖均有抗肿瘤作用，显示这两种天然物质在对肿瘤防治方面有良好的发展前景。 关键词：绿茶素(TP-91)；壳多糖；荷瘤小鼠；抗肿瘤 中图分类号：R285.5文献标识码：A文章编号：1008-0805(2000)09-0783-02 The Experimental Study on Antineoplastic Effect of Tea Pigment and Chitin YING Zi-zhong，ZHANG Hui，HU Song，HUANG Li-xia，HAN Zhi-hong (Wuhan Medical College for Continuing Education, Wuhan, 430016,China) Abstract: We have conducted the experimental research on antineoplastic effect of tea pigment (TP-91) extracted from Hubei green tea by our college and chitin extracted from silkwormchrysalis by Life Science College of Hubei University. Mice EAC were used as experimental subjects. The results showed that the rates of inhibiting tumor of TP-91 and chitin were 40.33% and 52.1% respectively; Lymphocyte counts of peripheral blood were 8.802.41 and 8.303.18 respectively, which had a significant difference from control group (2.840.61), (P0.01); T lymphocytes counts of peripheral blood were 24.204.56 and 14.414.37, which were significantly different from control group (4.103.35), (P0.01). The results suggest that both TP-91 and chitin have antineoplastic effect and there will be a good development in preventing and treating tumors. Key words: TP-91;Chitin (poly-N-acetylglucosamine);Mice EAC;Antineoplastic 近来研究发现，许多天然物质在抗肿瘤方面有巨大的潜力。临床资料也表明，肿瘤患者机体免疫功能降低，而免疫功能低下又是导致肿瘤发生的主要原因之一。我们将从湖北绿茶中提取的绿茶素1及从蚕蛹壳中提出的壳多糖进行抗肿瘤实验研究，表明这两种天然物质对荷瘤小鼠的抑瘤率及提高外周血淋巴细胞数及T淋巴细胞数均有明显作用。表明这两种天然物质在抗肿瘤提高机体免疫功能方面有显效，为今后临床广泛的应用提供了一定的实验依据。 1材料 1.1动物：昆明种小鼠，体重(202)g，雌雄兼有，由本院实验动物中心提供。 1.2瘤株：Ehrlich (EAC)腹水癌，由同济医科大学提供。 1.3药品：绿茶素(TP-91)，本院肿瘤室制备，10 mg/ml；壳多糖，湖北大学生命科学院提供，5 mg/ml。 1.4给药剂量：绿茶素，小鼠用剂量为200 mg/kg；壳多糖，小鼠用剂量为100 mg/kg。 2方法 选择接种8 d肿瘤生长旺盛，健康状况良好的荷瘤小鼠，颈锥脱臼处死，用碘酒消毒动物皮肤，无菌条件下抽取腹水瘤悬液，以生理盐水13稀释，给每一健康小鼠的右腹部皮下注射0.2 ml悬液，细胞数4.5106以形成实体瘤。小鼠接种后24 h随机分组，每组10只，分为对照组，绿茶素组，灌胃0.4 ml给药，壳多糖组，灌胃0.4 ml给药，绿茶素+壳多糖组，各0.2 ml共0.4 ml灌胃给药，1次/d，连续7 d。停药24 h后颈锥脱臼处死小鼠，称体重，解剖剥离瘤块，称瘤重。对照组平均瘤重1 g以上表明肿瘤生长良好，可进行疗效评定。按下列公式计算抑瘤率，取其瘤重平均直径值经 停药24 h后将活体小鼠眼球取血，抗凝，测淋巴细胞数及酯酶染色方法2检测T淋巴细胞阳性百分率。 3结果 3.1对荷瘤小鼠抑瘤率比较：治疗组中，绿茶素组抑瘤率平均为40.33%，壳多糖组抑瘤率平均为52.10%，绿茶素+壳多糖组抑瘤率平均为46.73%，经统计处理各治疗组与对照组比较P0.01，表明对EAC实体瘤均有明显抑制作用。详见表1。 表1治疗组对荷瘤小鼠抑瘤率的比较(s) 组别 动物数 瘤重m/g 抑瘤率(%) 对照组 20 1.090.31 - 绿茶素组 20 0.650.13 40.33 壳多糖组 20 0.490.31 52.10 绿茶素+壳多糖 20 0.580.31 46.73 各治疗组与对照组比较P0.01 3.2对荷瘤小鼠免疫功能作用比较：实验中观察到各治疗组均能使外周血淋巴细胞总数明显增加和T淋巴细胞阳性率明显增高，经统计处理各治疗组与对照组比较，P0.01，表明药物对机体免疫功能有良好的促进作用，详见表2，表3。 表2荷瘤小鼠外周血淋巴细胞数(s) 组别 动物数 淋巴细胞/109.L-1 对照组 20 2.840.61 绿茶素组 20 8.802.41 壳多糖组 20 8.303.18 绿茶素+壳多糖组 20 8.502.35 各治疗组与对照组比较P0.01 表3荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞(s) 组别 动物数 T淋巴细胞率(%) 对照组 20 4.103.35 绿茶素组 20 24.204.56 壳多糖组 20 14.414.37 绿茶素+壳多糖组 20 22.204.75 各治疗组与对照组比较P0.01 4讨论 茶为我国传统饮料，也是世界三大饮料之一。茶作为药用，在我国最早的药学著作神农本草经中就有记载。近来研究表明，茶中有效成分具有抗菌、利尿、降血脂、防治心血管疾病等医用疗效。流行病学调查表明，产茶区居民的癌死亡率低于非产茶区，有饮茶习惯人群的癌发生率低于不饮茶人群。提示茶对人类特定肿瘤的发生有保护作用。近来我院肿瘤研究室通过化学方法处理，以湖北绿茶为原料，提制出具有多种生物活性的天然、高效、安全的中药绿茶素(TP-91)结晶。提取工艺获得国家专利(专利号：ZL92115082.2)1。我们利用其进行抗肿瘤作用实验，研究表明绿茶素对荷瘤小鼠的肿瘤抑制率及提高外周血淋巴细胞总数及T淋巴细胞阳性率增高疗效明显。绿茶素是一种含黄烷醇类和硒、锗等微量元素的复合物1。其抗癌机理是多方面的，包括抗氧化、抗突变。动物实验证明，从茶中提取的茶色素中茶多酚能够抑