临床微生物SOP-克雷伯菌属检验标准操作规程.doc

XXXX医院检验科微生物实验室克雷伯菌属检验标准操作规程编号：MYCH/ 版本：第1版 第0次修改页数：第 4 页 共 4 页克雷伯菌属检验标准操作规程1. 概述克雷伯菌属包括肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、鼻硬结克雷伯菌和鼻臭克雷伯菌4个种。临床以肺炎克雷伯菌最为常见。2. 标本类型 血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。3. 鉴定3.1形态与染色 革兰阴性粗短杆菌。3.2培养特性 在血琼脂平板上35培养1824小时，呈灰白色、不溶血的菌落。在麦康凯琼脂平板上形成大而隆起、黏液样、易融合的、粉红色菌落，用接种环挑取呈丝状粘连。3.3生化反应 氧化酶试验阴性，发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖等多种糖类，TSI为A/A，IMViC - - + + ，硝酸盐还原、脲酶和赖氨酸脱羧酶试验阳性，动力、H2S、鸟氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶试验均为阴性。3.4鉴定要点3.4.1菌属特征 琼脂平板上菌落较大、隆起、黏液样、用接种环挑取呈丝状粘连，发酵葡萄糖等多种糖类，IMViC - - + + ，脲酶和赖氨酸脱羧酶试验阳性，动力试验阴性。3.4.2 克雷伯菌属的种间鉴别见下表克雷伯菌属种间鉴别的关键性试验（阳性%）菌名吲哚VP枸橼酸盐脲酶赖氨酸丙二酸盐乳糖肺炎克雷伯菌0989895989398产酸克雷伯菌999595909998100鼻硬结克雷伯菌00000950鼻臭克雷伯菌003010403303.5 操作步骤3.5.1 氧化酶试验 参见氧化酶试验标准操作规程。3.5.2 鉴定 从麦康凯琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反进行细菌鉴定。4. 药敏参见抗菌药物敏感试验标准操作规程及CLSI最新版本文件。5.质量控制见质量管理程序。6. 检验结果解释与分析6.16检验结果解释与分析肺炎克雷伯菌可产生ESBLs，据国内文献报道产酶率在30%以上，产酶株对青霉索、头孢菌素类及单酰胺类抗生素均产生耐药。如果检出产ESBLs肺炎克雷伯菌，即使体外药敏试验对青霉素类、头孢菌素类或氨曲南敏感，也应报告该菌对所有青霉素类、头孢菌素类或氨曲南耐药。但其对头霉素、部分加酶抑制剂的复合抗菌药和碳青霉烯类抗菌药敏感。7临床意义肺炎克雷伯菌是人类呼吸道的常居菌，在人和动物肠道内也常见，是一种条件致病菌。在临床分离到的克雷伯菌属中，肺炎克雷伯菌占80%以上，是本属中最为常见的病原菌，可引起肺炎、脑膜炎、腹膜炎、泌尿系统感染、菌血症等疾病。8. 鉴定流程尿液、痰、血液等 麦康凯琼脂平板呈黏液样、粉红色菌落 氧化酶试验阴性 仪器鉴定或手工生化鉴定并做药敏试验 克雷伯菌属参考文献1 中国合格评定国家认可委员会CNAS - GL23：2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南20082 周庭银编著临床微生物学诊断与图解第二版上海：上海科学技术出版社，20073 叶应妩，王毓三，申子瑜主编全国临床检验操作规程第三版南京：东南大学出版社，20064 Murray PR. Manual O/F Clinical Microbilogy.9thed. Washington:ASM Press, 20075 IS0 15189：2007医学实验室一质量和能力认可准则2007 编写人签名复审人签名审