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实验六次溴酸钠法测定海水中的氨 氮 海水中的营养元素 氧 碳 氮 磷 硅等主要元素 还有铁 锰 铜 钼等微量元素 氮化合物在海洋中的存在形态 NH4 NH3 NO2 NO3 三种无机化合氮溶解有机氮化合物不溶于海水的颗粒氮其中无机氮化合物是海洋植物最重要的营养物质 3 吸光光度法原理 在一定的实验条件下 物质对光的吸收与物质的浓度成正比 显色剂 波长的选择 孔雀绿的吸收光谱 7 2 1吸光分析的几种方法 目视比色法 特点 利用自然光 比较吸收光的互补色光 准确度低 半定量 不可分辨多组分 方法简便 灵敏度低 光电比色法 分光光度法 紫外 可见分光光度法 UV VIS UltravioletVisualSpectroscopy 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 实验原理 在碱性条件下 以次溴酸钠为氧化剂 将海水中的氨氧化为亚硝酸盐 亚硝酸盐在一定的pH值下与磺胺及盐酸萘乙二胺作用形成深红色偶氮染料 于543毫微米波长处进行光度测定 使用液 注意 氧化剂储备液 实验步骤 工作曲线的制作 1分别移取0 1 0 2 0 3 0 4 0 5 0毫升NH4Cl标准使用液于6个比色管 用人工海水稀释至刻度线 溶液浓度分别为0 2 00 4 00 6 00 8 00 10 00微克氨 升 3用移液管依次加入5毫升氧化剂 以次溴酸钠 使用液 混匀放置30分钟 2量取2份水样于50毫升比色管中 管上做标签 与1一起做下面步骤 5用移液管依次加入5毫升磺胺溶液 混匀放置5分钟 6用移液管依次加入1毫升盐酸萘乙二胺液 混匀放置10分钟 7在分光光度计上543毫微米波长处测量1的吸光值A 未加NH4Cl溶液的吸光值为空白吸光值Ab 样品的吸光值AW NO2 N的吸光值ANO2 N 4量取2份水样于50毫升比色管中 管上做标签 与前面的一起做下面步骤 来测定海水中的NO2 N NH4 浓度 A Ab 7以1的NH4 N浓度和A Ab为横纵坐标作图 得到工作曲线 8水样的NH4 N吸光值为 A NH4 N AW Ab ANO2 N 9根据A NH4 N 在工作曲线上查出水样氨 氮的浓度 721型分光光度计的使用方法1用调波长的旋钮调波长至543毫微米2将上面的盖子打开 用中间的调零旋钮调透光值至零3将里面盛比色皿的盒子拿出来4用手拿比色皿的侧面 避免用手接触光面 用蒸馏水里外冲洗两次 5最里面的比色皿盛蒸馏水 80 满 剩下的三个由颜色浅到深的顺序盛样品 在盛之前要用样品润洗相对应的比色皿2次 然后盛入对应的样品 80 满 6先用滤纸擦比色皿外面一遍 然后用擦镜纸擦干净 特别是光面 按顺序放入盛比色皿的盒子中 放正 用盒子上的铁皮固定好 7将盒子放入分光光度计内 注意和下面固定孔对好 盖住分光光度计的盖子8在蒸馏水位置 旋转100 旋钮调透光值至100 然
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