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一、 名词解释1cDNA与cccDNA:cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA;cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。3CAP:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMP receptor protein ),cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMP activated protein )4回文序列:DNA片段上的一段所具有的反向互补序列,常是限制性酶切位点。5micRNA:互补干扰RNA或称反义RNA,与mRNA序列互补,可抑制mRNA的翻译。6核酶:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。8信号肽:在蛋白质合成过程中N端有1536个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。9弱化子:在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。10魔斑:当细菌生长过程中,遇到氨基酸全面缺乏时,细菌将会产生一个应急反应,停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸(pppGpp)。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子,而是影响一大批,所以称他们是超级调控子或称为魔斑。11上游启动子元件:是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列,-10区的TATA、-35区的TGACA及增强子,弱化子等。12DNA探针:是带有标记的一段已知序列DNA,用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13SD序列:是核糖体与mRNA结合序列,对翻译起到调控作用。14单克隆抗体:只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。15考斯质粒:是经过人工构建的一种外源DNA载体,保留噬菌体两端的COS区,与质粒连接构成。16蓝-白斑筛选:含LacZ基因(编码半乳糖苷酶)该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-D-半乳糖苷)产生蓝色,从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后,LacZ基因不能表达,菌株呈白色,以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。17顺式作用元件:在DNA中一段特殊的碱基序列,对基因的表达起到调控作用的基因元件。18Klenow酶:DNA聚合酶I大片段,只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5 3外切酶活性19锚定PCR:用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴,然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。20融合蛋白:真核蛋白的基因与外源基因连接,同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。1.质粒质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核酸(DNA)分子。现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子。在基因工程中质粒常被用做基因的载体。2.启动子是DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合的部位,也就是使转录开始的部位。在基因表达的调控中,转录的起始是个关键。常常某个基因是否应当表达决定于在特定的启动子起始过程。3. 信号肽:在蛋白质合成过程中N端有1536个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。4. 核受体细胞内受体分布于胞浆或核内,本质上都是配体调控的转录因子,均在核内启动信号转导并影响基因转录,统称核受体。5.hnRNA核不均一RNA,即mRNA的前体,经过5加帽和 3酶切加多聚A,再经过RNA的剪接,将外显子连接成开放阅读框,通过核孔进入细胞质就可以作为蛋白质合成的模板了。 6.分子杂交互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。 7.基因组文库将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段,并与合适的载体重组后导入宿主细胞,进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合,即基因组文库,它包含了该生物的所有基因。8. 密码的简并性由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称为密码的简并性三.简答题(每题12分,共52分)1.简述乳糖操纵子的正负调控机制答案要点:包括正负调控两种()阻遏蛋白的负调控当细胞内有诱导物时,诱导物结合阻遏蛋白,此刻聚合酶与启动子形成开放式启动子复合物转录乳糖操纵子结构基因。当无诱导物时,阻遏蛋白结合与启动子与蛋白质部分重叠不转录。(=)CAP正调控当细胞内缺少葡萄糖时ATPCAMP结合,CRP生成CAP与CAP位点结合,增前RNA聚合酶转录活性。当有葡萄糖存在时CAMP分解多合成少,CAP不与启动子上的CAP位点结合RNA聚合酶不与操纵区结合无法起始转录结构基因表达下降。2.简述转录的基本过程?答案要点: 转录的基本过程包括:模板的识别;转录起始;通过启动子;转录的延伸和终止。 要求叙述各过程设计到的因子。3.简述原核和真核细胞在蛋白质翻译过程中的差异.答案要点:(1)起始因子不同;(2)翻译过程(肽链延伸)因子不同;(3)终止因子不同。要求详述其差异。4.试比较原核和真核细胞的mRNA的异同.答案要点:真核生物5端有帽子结构大部分成熟没mRNA 还同时具有3多聚A尾巴,原核一般没有;原核的没mRNA 可以编码几个多肽真核只能编码一个。原核生物以AUG作为起始密码有时以GUG,UUG作为起始密码,真核几乎永远以AUG作为起始密码。原核生物mRNA半衰期短,真核长。原核生物以多顺反子的形式存在,真核以单顺反子形式存在。三、选择题1、DNA复制中解开双螺旋的酶是( )A. 拓扑酶B. 解螺旋酶C. DNA结合蛋白D. 连接酶2、原核生物基因组中没有( )A. 内含子B. 外显子C. 转录因子D. 插入序列3、mRNA中的遗传信息可来自( )A. RNAB. DNAC. RNA或DNAD. 蛋白质4、决定大肠杆菌RNA聚合酶识别启动子特异性的是( )A. RNA聚合酶的亚基B. RNA聚合酶的亚基C. RNA聚合酶的亚基D.因子5、在蛋白质生物合成中转运氨基酸的RNA是( )A. tRNAB. mRNAC.rRNAD. hnRNA6、翻译是从mRNA的( )A. 3端向5端进行B. 5端向3端进行C. N端向C端进行D. C端向N端进行7、Western杂交用于下列杂交技术中的哪一个( )A. DNA-DNAB. RNA-RNAC. DNA-RNAD. 抗体-抗原结合8、T4 DNA连接酶( )A. 是一种分子质量为74kD的单链酶B. 既能催化平末端的连接又能催化粘性末端的连接C. 既能催化单链DNA的连接又能催化双链DNA的连接D. 催化连接反应时既可以ATP为能量又可以NAD

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