张志友开题报告03版1.doc

皖南医学院研究生开题报告课题名称：皖南尖吻蝮蛇毒有效抗肿瘤组分分离纯化及生物学鉴定 学生姓名： 张 志 友 导师姓名： 芮 景 （教 授）专业名称： 肿 瘤 学研究方向：蛇毒抗肿瘤的基础与临床联系电话：皖南医学院研究生部制填 表 说 明 一、开题报告各项内容务必实事求是，逐条认真填写。表达要明确、严谨，字迹要清晰易辨。外来语要同时用原文和中文表达。第一次出现的缩写词，需注出全称。二、开题报告的纸质件为A4纸，于左侧装订成册。一式二份（其中原件一份），报送研究生部备案。一、简表课题名称皖南尖吻蝮蛇毒有效抗肿瘤组分的分离纯化及生物学鉴定 研究类型BA、基础研究 B、应用基础研究 C、应用研究研究生姓名张志友性别男民族汉出生日期1975.8.26导师姓名芮景导师职称教授 主任医师研究起止 2010年 1 月 至 2010年 12 月所在科室普外科联系电导小组成员姓 名 性别 年龄专业职务研究专长学位学历工作单位芮景男53教授普外科本科学士皖南医学院弋矶山医院谢海棠女43副教授临床药理研究生博士皖南医学院弋矶山医院吕坤男30检验师临床药理研究生博士皖南医学院弋矶山医院陈斌男45主任医师普外科本科学士皖南医学院弋矶山医院张正明男37主治医师普外科研究生硕士皖南医学院弋矶山医院研究内容和意义摘要 要蛇毒属于生物毒素，成分复杂。主要有蛋白质、多肽及一些酶类，具有抗血栓、镇痛、止血及抗肿瘤等广泛的生物学活性。近年来,大量体外及动物实验显示蛇毒提取物具有良好的抗肿瘤作用。本课题组在芮景教授指导下，通过体内外实验均已证实皖南尖吻蝮蛇毒抗凝蛋白组分具有抗肿瘤作用，但该抗凝蛋白组分为一混合物，主要由相对分子量约为25000、30000、50000三种蛋白组成，不明确何种蛋白为有效抗肿瘤成分。本研究旨在前期研究基础上进一步对该抗凝蛋白组分进行分离纯化、理化及生物学性质鉴定，确认有效抗肿瘤成分，期望能开发出新的抗肿瘤药物。填 写 简 表 注 意 事 项一、必须逐项认真填写,用国家公布的标准化汉字.二、凡选择性栏目,相应提示符（如A、B等）之一填入该栏.三、部分栏目填写要求: 项目名称: 准确反应研究范围和内容，最多不超过40个汉字(含点符号)； 基础研究: 拟以认识自然现象,探索自然规律为目的,不直接考虑应用标的研究活动;应用基础研究: 有广泛应用前景,但以获取新原理、技术、方法为主要目的的研究；应用研究: 为某种具体实用目标提供技术管理、方法和途径的研究. 究内容和意义:写出200字左右的摘要.二、立论依据 (包括项目的研究意义、国内外研究现状分析,并附主要参考文献和出处。) 1、研究意义：恶性肿瘤是当前危害人类健康的主要疾病之一。随着生命科学的进展，人们对肿瘤的发生、发展和转移机理有了一定的了解。目前肿瘤的治疗主要以手术、化疗及放疗等综合治疗为主，其中化疗在肿瘤的治疗中具有重要作用，但在化疗过程中，经常因化疗药物产生的毒副作用和肿瘤细胞的抗药性而导致治疗失败，因此开发高效、低毒的抗肿瘤药物有着十分重要的意义。近年来,大量体外及动物实验显示蛇毒提取物具有良好的抗肿瘤作用。（1）本研究小组在芮景教授的领导下，前期进行的体内外实验均已证实皖南尖吻蝮蛇毒抗凝蛋白组分具有抗肿瘤作用, 但该抗凝蛋白组分为一混合物，主要由相对分子量约为25000、30000、50000三种蛋白组成，不明确何种蛋白为有效抗肿瘤成分(2)-(6)。 本实验将在此基础上进一步对该抗凝蛋白组分进行分离纯化、理化及生物学性质鉴定，确认有效抗肿瘤成分，期望能开发出新的抗肿瘤药物。同时皖南山区具有丰富的蛇资源，若能达到合理科学的开发，将对地方经济的发展起到积极的推动作用。2、国内、外研究现状：蛇毒属于生物毒素，成分复杂。主要有蛋白质、多肽及一些酶类，具有抗血栓、镇痛、止血及抗肿瘤等广泛的生物学活性。国内外实验和临床应用均显示蛇毒具有良好的抗肿瘤作用。如Schmitmeier S通过培养T98G人的恶性胶质瘤发现一种解离素与细胞外基质作用而抑制肿瘤的转移（7）。Tabeli RG 等研究发现从蝮蛇中提取的L-氨基酸氧化酶BmooLAAO-I能诱导凋亡人早幼粒细胞白血病细胞HL-60（8）。Zhang L 等从五步蛇中提取的细胞毒素ACTX-8能诱导人子宫颈腺癌传代细胞（Hela cells）凋亡（9）。Kim S-H等发现一种解离素Salmosin减少肿瘤内血管生成，抑制肿瘤的生长和转移，延长荷瘤小鼠的生存期10。张及禄等从长白山岩栖蝮蛇蛇毒中分离纯化1种小分子多肽Saxis, 对多种肿瘤细胞的生长有抑制作用。（11）按作用机制可将蛇毒抗肿瘤组分分为四类:(1)抑制肿瘤组织内的血管增生以及肿瘤细胞之间的黏附；(2)直接作用于癌细胞膜,有溶胞作用,称为细胞毒素；(3)诱导细胞凋亡组分；(4)酶及蛇毒因子等。但蛇毒的确切抗肿瘤机理至今尚未完全明确(12-17)。皖南尖吻蝮蛇毒抗凝蛋白组分由皖南山区蝮蛇蛇毒经柱层析法提取，国内芮景等对此进行了深入研究，该研究小组采用蝮蛇毒抗凝蛋白组份对小鼠肝癌的作用开展了系列研究，通过体内外实验均证实该蛋白组分具有抗肿瘤作用，诱导肿瘤细胞凋亡，并发现还有免疫改善和骨髓保护作用(2-6)。3、参考文献：1. Debnath A,Chatterjee U,Das M,et al.Venom of indian monocellate cobra and Russells viper show anticancer activity in experimental modelsJ.J Ethnopharmacol,2007,111(3):681-684.2. 程明荣，芮景，徐永强，等蛇毒抗高凝状态酶抑制小鼠肝癌H22生长作用的实验研究J皖南医学院学报，2003，22(4)：256-2583. Rui J,Cheng MR,Xu YX.Wen SW.Experimental study on inhibitory effect of antihypercoagulability state enzyme of snake venom in different dosages in mice with Hepatocatcinoma Chin J Clin Pharmacol Ther 2004;9(2):157-1614. 柴智明， 张正明， 芮景. 蛇毒抗高凝状态酶对人肝癌细胞及肝细胞作用的研究(J).中华肿瘤防治杂志,2006,13(4)266-2705. 陈冬云，潘学兵，吉兆林. 皖南尖吻蝮蛇毒提取物体外抗肿瘤活性的实验研究J. 中国临床药理学与治疗学，2009,14 (1) :37 416. 怀建国，芮景. 皖南尖吻蝮蛇抗凝蛋白组分的分离纯化及其急性毒性试验研究J. 中国临床药理学与治疗学，2009，14（3）：274-278 7. Schmitmeier S，Markland FS，Ritter MR，et a1 Functional efect of contortrostatin，a snake venonl disintegrin，on human gliomacell invasion in vitroCell Commun Adhes，2003，10(1)：1-68. Tabeli RG, Ribeiro PH, Costa TR, et al. Cytotoxic L-amino acid oxidase from Bothrops moojeni: biochemical and functional characterization. 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