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专题一 鉴定观察类实验大题过关本专题考情分析鉴定观察类实验往往需要使用一些特殊的化学试剂与待检测物质发生反应产生不同颜色的产物，或反应产物与试剂接触后呈现不同的颜色变化从而对待测物质做出判断。此外，为了观察到更细微的结构通常需要借助观察工具显微镜，对生物体的形态结构、化合物在细胞中的分布和一些特殊的生命现象等进行更细致的观察，通过观察先获得感性认识然后再上升为理性认识。通过近几年高考试卷中的实验题来看，这部分内容主要以识记为主，也会出现一些具体的语境题目，命题的角度非常灵活。这就需要同学从全新的、应用的角度去重新分析已做过的每一个实验，从中提取出真正要掌握的重要内容。但是无论怎样命题这种类型的题目通常还是以学过的知识点为载体来进行。正是基于此，需要同学特别关注教材中相关实验内容的复习，特别是极容易被忽略掉的知识点，要求对课本中的每个知识点不但要知道“是什么”，还要明白“为什么”。一、鉴定观察类实验大题相关知识必备：（一）特定的物质、特定的试剂及特定的颜色反应物质试剂预期实验结果蛋白质双缩脲试剂（先加A液再加B液，摇匀后使用）紫色反应脂肪苏丹染液或苏丹染液橘黄色或红色还原糖斐林试剂（甲液、乙液现混现用，水浴加热）砖红色沉淀淀粉碘液蓝色酒精酸性重铬酸钾橙色灰绿色CO2澄清石灰水石灰水变浑浊溴麝香草酚蓝水溶液蓝色绿色黄色染色体（质）龙胆紫溶液或醋酸洋红深紫色或紫红色DNA二苯胺（水浴加热）蓝色吡罗红甲基绿染色剂DNA被甲基绿染成绿色RNA吡罗红甲基绿染色剂RNA被吡罗红染成红色线粒体健那绿（生物实验中唯一的一种活体染色剂）蓝绿色说明：并不是所有的实验都需要染色处理才能观察，如用高倍显微镜观察叶绿体、观察植物细胞的质壁分离和复原、叶绿体中色素的提取和分离等实验则不需要染色，利用细胞（或细胞器）自身的颜色即可观察。（二）显微镜的基本结构1目镜：装在镜筒的上端，通常备有23个，上面刻有5、10或16符号以表示其放大倍数，通常使用10的目镜。 2镜筒：连在镜臂的前上方，镜筒上端装有目镜，下端装有物镜转换器。3镜臂：是取放显微镜时手握部位。4粗准焦螺旋：旋转时可使镜筒作快速和较大辐度的升降，所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物像呈现于视野中，通常在使用低倍镜时，先用粗准焦螺旋迅速找到物像。5细准焦螺旋：移动时可使镜筒缓慢地升降，多在运用高倍镜时使用，从而得到更清晰的物像，并借以观察标本的不同层次和不同深度的结构。 6转换器：可自由转动，盘上有34个圆孔，是安装物镜的部位，转动转换器，可以调换不同倍数的物镜，当听到碰叩声时，方可进行观察，此时物镜光轴恰好对准通光孔中心，光路接通。7物镜：装在镜筒下端的转换器上，一般有2个物镜，其中最短的刻有“10”符号的为低倍镜，较长的刻有“40”符号的为高倍镜。8载物台：在镜筒下方，用以放置玻片标本，中央有一孔叫通光孔。9压片夹：固定切片，防止切片滑落。10遮光器：位于载物台的下方，上面有大小不等的孔叫光圈。11反光镜：装在镜座上面，可向任意方向转动，它有平、凹两面，其作用是将光源光线反射到遮光器上，再经通光孔照明标本，凹面镜聚光作用强，适于光线较弱的时候使用，平面镜聚光作用弱，适于光线较强时使用。 12镜柱：连接镜座和镜臂。13镜座：是显微镜的底座，用以支持整个镜体。（三）显微镜的操作步骤：1取（送）显微镜：右手握镜臂，左手托镜座2安放显微镜：胸前偏左，距桌沿大约10cm处3对光：（1）换上目镜（10）（2）将低倍物镜对准通光孔（3）调遮光器（4）左眼视目镜内（右眼同时睁开），调反光镜直至出现明亮视野4用低倍镜观察：（1）放好装片，使目标正对通光孔中央，用压片夹压住（2）侧头视物镜，调粗准焦螺旋，使镜筒下降至距玻片23mm（3）左眼视目镜内（右眼同时睁开）反方向调粗准焦螺旋直至看清物像5用高倍镜观察：（1）将目标在低倍镜下移至视野中央（2）直接转动转换器，换高倍物镜，调细准焦螺旋直至出现清晰物像二、考查中经常出现的关键解题知识点（一）双缩脲试剂和斐林试剂的区别斐林试剂双缩脲试剂甲液乙液A液B液成分0.1g/mLNaOH溶液0.05g/mLCuSO4溶液0.1g/mLNaOH溶液0.01g/mLCuSO4溶液鉴定物质可溶性还原糖蛋白质添加顺序甲乙两液等量混合后立即使用先加A液1mL摇匀，然后加B液4滴，振荡摇匀反应条件5060水浴加热不需要加热，摇匀即可反应现象样液变砖红色样液变紫色特别提醒：两个实验中都不宜选择有颜色的材料，否则会干扰实验现象。例如：还原糖的实验中应该选择颜色浅的苹果、梨等材料，而颜色深的绿色白菜、甘蓝叶、西瓜、番茄、血液等就不适合做实验材料；在鉴定还原糖的实验中应该注意选择还原糖，非还原糖的材料比如蔗糖、甜菜的块根等不适合做实验材料，这两种材料中含有的糖为蔗糖，属于非还原糖；在检测蛋白质的实验中，若用鸡蛋清作实验材料，必须稀释，以免实验后粘住试管，不易洗刷；Cu2+呈现蓝色，因此CuSO4的用量较少，以免因过量使用而遮盖实验结果的颜色；唯一需要加热还原糖鉴定，且必需水浴加热，不能用酒精灯直接加热。若不加热则无砖红色沉淀出现。唯一需要显微镜脂肪的鉴定，实验用50%酒精的作用洗掉浮色；非还原糖(如蔗糖)斐林试剂水浴加热后的现象不是无色而是浅蓝色Cu(OH)2的颜色；还原性糖的鉴定是新制的Cu(OH)2与醛基的反应，产生Cu2O沉淀，而蛋白质的鉴定是在碱性环境下Cu2与肽键结合成特定化合物的显色反应，原理的不同决定了实验操作方法的不同。（二）在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中1.选材时应选用口腔上皮细胞、无色的洋葱表皮细胞，而不能用紫色洋葱表皮细胞或叶肉细胞等，防止颜色的干扰；2.甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。两种染色剂混合使用且现配现用；3.质量分数为8%盐酸有两个作用：一是改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞；二是使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合；4.质量分数为0.9% NaCl溶液(生理盐水)的作用是保持口腔上皮细胞正常形态；5.在制备装片时有一个“冲洗涂片”的过程，此时应用蒸馏水的缓水流冲洗，“冲洗”的目的是为了洗掉盐酸，“缓水流”的目的是为了防止玻片上的细胞被冲走。（三）与显微镜相关问题的分析1目镜与物镜的结构、长短与放大倍数之间的关系：（1）目镜无螺纹，直接在镜筒上拔插，物镜有螺纹，需安装在转换器上。（2）放大倍数与长短的关系物镜越长，放大倍数越大，距装片距离越近。目镜越长，放大倍数越小。（3）显微镜放大倍数的含义显微镜放大倍数是指物像边长的放大倍数，而不是面积的倍数。如一个面积为的圆放大100倍后其面积为10000。总的放大倍数是目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积，如物镜为10，目镜为16，其放大倍数就为1016=160倍。若视野中细胞排成一行，则计算时只考虑长度或宽度；若视野中充满了多个细胞，计算时应考虑面积的变化。2成像规律：显微镜成的是倒像（上下左右全倒）如字母b看到的像是q，因此若所要观察的物像在视野的右上方，想要移到视野中央应该向右上方移动。但是如果观察到物像中细胞质的流动方向为逆时针流动，真实的流动方向也为逆时针。3由低倍镜换高倍镜时直接转动转换器，不能调粗、细准焦螺旋，上升或下降镜筒。4由低倍镜换高倍镜视野将会变暗。5由于显微镜的视野是一定的，所以放大倍数越大，观察到的细胞数目越少。放大倍数越小，观察到的细胞数目越多。6观察颜色深的材料，视野应适当调亮，反之则应适当调暗；若视野中出现一半亮一半暗则可能是反光镜的调节角度不对；若观察花生切片标本材料一半清晰一半模糊不清则可能是花生切片厚薄不均造成的。7.污物位置的快速确认方法：移动装片：动在装片上 不动转动目镜：动在目镜上；不动在物镜上 不可能在反光镜上三、分析典型例题，明确考题类型1教材基础实验改编和拓展【例1】洋葱是中学生物实验常用材料之一，下图是与洋葱有关的实验部分步骤，请据图回答问题：(1)表示提取洋葱叶片色素时的研磨步骤，研钵中除了加无水乙醇外，还需加入的化学试剂有 ；表示符合要求的滤纸条,但该滤纸条层析一段时间后，滤纸条上没有一条色素带，最可能的原因是 。(2)表示观察洋葱根尖细胞有丝分裂临时装片制作的压片步骤，该步骤的目的是 。(3)实验室有2瓶质量分数均是30%的葡萄糖溶液和蔗糖溶液。由于不慎丢失了瓶上粘贴的标签。请你用活细胞作材料设计一个鉴别的方案。材料：2瓶质量分数均是30%的葡萄糖溶液和蔗糖溶液、紫色洋葱鳞片叶、清水。用具：刀片、滴管、载玻片、盖玻片、镊子、显微镜等。方法步骤： ； 。结果预测：请用文字和坐标图表示。【解析】提取洋葱叶片色素时的研磨过程中，研钵中需要加入无水乙醇、碳酸钙和二氧化硅。滤纸条上有明显的滤液细线，而分离后没有发现色素，说明层析时层析液没及滤液细线，使色素扩散到了层析液中，实验失败。细胞有丝分裂临时装片制作的压片是为了使细胞分散开，便于进行观察。滴加葡萄糖溶液后，洋葱细胞中液泡体积由于失水而逐渐变小，后由于细胞不断吸收葡萄糖，使细胞液浓度不断上升，细胞又会吸收水分，液泡体积又会逐渐增大。而细胞不能吸收蔗糖，所以滴加蔗糖后细胞会逐渐失水出现质壁分离现象，液泡体积不断变小，而不能发生质壁分离自动复原。【答案】(1)碳酸钙和二氧化硅层析时层析液没及滤液细线，使色素扩散到了层析液中(2)使细胞分散开来(3)做2个紫色洋葱表皮细胞的临时装片，并用低倍显微镜观察紫色液泡的大小将30%的葡萄糖溶液和蔗糖溶液分别滴在两盖玻片的一侧，用吸水纸吸引，反复几次，并用显微镜观察液泡的变化结果预测：当葡萄糖缓慢被洋葱表皮细胞吸收时，结果为图a蔗糖滴上后，液泡的变化结果为图b【点评】显微观察类实验应注意的问题：1注意取材：根据观察对象选用合适的材料，如观察植物细胞的有丝分裂，应选取根尖分生区细胞；观察质壁分离与复原，应选取成熟的植物细胞等。2注意材料处理：根据不同材料，不同的观察对象，做不同的材料处理，如浸泡、染色、解离、保持生活状态等。2.将知识点融入到具体的环境中考查【例2】 植物细胞细胞壁的主要成分是纤维素和果胶。细菌细胞壁的主要成分是什么？有人认为细菌细胞壁中含有糖类和蛋白质。为探究其化学成分，某生物课题小组设计了如下实验 (已知糖类加硫酸水解后用碱中和，再加斐林试剂加热有砖红色沉淀生成，蛋白质与双缩脲试剂作用，生成紫色物质，且二者单独检验时互不干扰)。请补充完善实验内容。实验步骤：(1)将细菌细胞粉碎后，用高速离心机分离得到细菌细胞壁。(2)将细菌细胞壁分成两等份，编号为A、B。(3) 。预测实验现象及结论实验现象实验结论若A出现砖红色沉淀，B出现紫色细菌细胞壁中含有糖类和蛋白质【解析】糖类加硫酸水解后用碱中和，加斐林试剂加热可出现砖红色沉淀，蛋白质与双缩脲试剂反应能产生紫色。根据题干中所给的这个信息，我们可以设计实验去探究细菌细胞壁中是否有糖类和蛋白质。可能的情况是同时还有糖类和蛋白质，只含糖类或者只含蛋白质，或者既不含糖类也不含蛋白质，实验现象就可以写出来了。【答案】实验步骤：(3)取A加硫酸水解后用碱中和，再加斐林试剂并加热；取B加双缩脲试剂，摇匀。并观察实验现象。实验现象及结论实验现象实验结论若A出现砖红色沉淀，B不出现紫色细菌细胞壁中含有糖类，而不含有蛋白质若A中不出现砖红色沉淀，B中出现紫色细菌细胞壁中含有蛋白质，不含糖类若A中不出现砖红色沉淀，B中不出现紫色细菌细胞壁中既不含糖类，也不含有蛋白质【点评】解决这种类型的题目根本还是熟练掌握课本中的基础知识，然后认真分析题干，从中得到有效的信息，并结合相关的基础知识进行解答。3对教材多个实验的基础知识综合考查【例3】(2012江苏无锡期中)下表列出了教材中部分实验的材料、实验条件和观察内容，请回答有关问题：（1）A组实验中50酒精的作用是 。（2）B组实验中，如取材合适且提取色素的过程操作很规范，但得到的滤纸条上的色素带颜色均非常淡，可能的原因除了滤纸条湿度大，没有预先干燥处理外，最可能的原因还有 。（3）在做C组实验时，应选择图甲 （填编号）处细胞为材料。某同学在低倍显微镜下观察到乙图所示图像，若要在高倍镜下看清视野中处于分裂中期的细胞，应将装片适当向 移动。此视野中分裂期的细胞数目过少，可能的原因有 。视野选择不合适取材时间不合适制片时压片力量不合适解离时间不合适（4）研究洋葱根尖处于有丝分裂各阶段细胞核中DNA和细胞质中mRNA的含量变化，获得如丙图所示曲线，在a和c两时期， 催化mRNA分子合成，在e时期，最活跃的细胞器是 。丁图、表示的生理变化过程分别发生在有丝分裂的 时期。【解析】（1）在脂肪的鉴定中50酒精的作用是洗去浮色；（2）B组是色素的提取与分离，如果滤纸条上的色素带颜色非常淡，可能是滤液细线划的次数太少；（3）在观察植物细胞有丝分裂的实验时，应选择分生区细胞为材料。此图中处于分裂中期的细胞在左方，由于在显微镜下看到的是倒像，所以要将装片适当向左移动。此视野中分裂期的细胞数目过少，可能的原因有取材的时间不合适，视野的位置不正确；（4）mRNA分子合成过程需要RNA聚合酶的作用；e时期为有丝分裂末期，植物细胞要形成细胞板，所以最活跃的细胞器是高尔基体。丁图进行DNA的复制，所以发生在有丝分裂的间期，是由染色质向染色体变化的时期，表示有丝分裂的前期。【答案】（1）洗去浮色 （2）划滤液细线的次数不够 （3） 左 （4）RNA聚合酶 高尔基体 间期、前期【点评】这部分内容主要是以知识点重现的形式进行考察，所以在复习的过程中要注意课本上的原理、步骤、实验现象等的复习。四、赏析高考试题，把握复习方向 1.（2012江苏）某研究组对籼稻开展了组织培养及相关研究，请回答下列问题：（1）2，4D常用于籼稻愈伤组织的诱导， 对形态的发生有一定的抑制作用。为促进愈伤组织再分化，在配制分化培养基时需（填“升高”、“保持”或“降低”）2，4D的浓度。（2）当籼稻愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时，出现具有分生能力的绿色芽点，但不能继续出芽，通常在培养基中添加，以促进幼苗形成。（3）研究中用显微镜可以观察到的现象是（填下列序号）。绿色芽点细胞排列松散刚融合的籼稻和稗草杂交细胞发生质壁分离胚状体细胞中有叶绿体分化的愈伤组织内各细胞的形态大小一致（4）经组织培养筛选获得的籼稻叶绿素突变体，其叶绿素a与叶绿素b的比值显著大于对照，叶绿素总量不变。某同学用（填序号：绿色红色蓝紫色黄色）光照射突变体和对照叶片，检测到两者光合放氧差异不大。若取等量色素提取液进行层析，会发现突变体第条色素带（自上而下）窄于对照组。（5）胚乳（3n）由一个精子与两个极核受精发育而成。若用籼稻种子的胚乳诱导愈伤组织，培育三倍体，需适时剔除胚，以免胚的存在影响愈伤组织细胞的，还可避免再生苗中混有。【解析】2，4-D常用于植物愈伤组织的诱导和生长，但它趋向于抑制植物形态的发生，当愈伤组织再分化形成新的植株个体时，要减小2，4-D抑制植物形态发生的作用。所以在配制分化培养基时需降低2，4-D的浓度。根据题意，此时已经出现具有分生能力的绿色芽点，但不能继续出芽。由于生长素有促进再分化过程中芽的生长，所以在培养基中添加适量的生长素，以促进幼苗形成。绿色芽点细胞为分生区细胞，排列紧密；刚融合的杂种细胞没有细胞壁，不可能发生质壁分离；愈伤组织细胞排列疏松无规则；再分化产生胚状体，需要光照刺激，会促进叶绿体的形成，可在光学显微镜下观察到叶绿体。色素具有不同的吸收光谱，叶绿素a、b主要吸收的是红光和蓝紫光。而对绿光和黄光吸收很少。在本题中，通过光合放氧速率反映出二者光合作用强度的大小，自变量是叶绿素a、b比例上的差异。从结果来看，二者放氧速率差异不大，而突变体中叶绿素a与叶绿素b的比值显著大于对照。说明该同学用的光不是红色和蓝紫色。所以是绿色和黄色。通过纸层析法分离色素时，叶绿素a、b分布于第3、4条（自上而下）。因为突变体中叶绿素a与叶绿素b的比值显著大于对照，所以会发现突变体第4条色素带窄于对照组。利用胚乳诱导愈伤组织，由于胚中含有植物激素，会影响愈伤组织的增殖和分化，所以需适时剔除胚。因为胚是由受精卵发育而来的，是二倍体。剔除胚也可以避免再生苗中混有二倍体幼苗。【答案】（1）降低（2）适量的生长素（3）（4）4（5）增殖与分化二倍体幼苗2.（2012重庆）乙醇可部分替代石油燃料，利于纤维素酶、酵母菌等可将纤维素转化成乙醇、耐高温纤维素酶可以加速催化纤维素的水解，从而有利于酵母菌发酵产生乙醇。（1）某研究小组将产生纤维素酶的菌株，通过诱变和高温筛选获得新菌株，为探究新菌株所产纤维素酶能否耐受80高温，进行了以下实验。试管1试管2第一步加入适量缓冲液加入等量纤维素酶溶液（缓冲液配制）第二步_30min第三步加入_第四步60水浴保温10min第五步加入_第六步沸水浴中加热2min，观察实验现象 结果与结论：若_，则表明该纤维素酶能耐受80高温；若_，则表明该纤维素酶不能耐受80高温；（2）酵母菌发酵产生的乙醇属于_（填“初级”或“次级”）代谢产物。【解析】根据实验是探究纤维素酶能否耐受80高温，所以应先对纤维素酶用80高温处理，常用方法为水浴80保温，对酶进行高温处理后，然后再加入适量的纤维素酶作用的底物纤维素，利用纤维素酶能使纤维素水解为还原糖，来验证经高温处理的酶是否还有活性，还原糖可用斐林试剂或班氏糖定性试剂检测。如果纤维素酶能耐受80高温，则经80高温处理后，依然能使纤维素水解，经斐林试剂检测能出现砖红色沉淀反之，不能出现砖红色沉淀。乙醇是对酵母菌无明显生理功能，并非是酵母菌生长和繁殖所必需的物质，这样的物质为次生代谢产物。【答案】80水浴保温 适量纤维素液 斐林试剂或班氏糖定性试剂试管1内呈蓝色，试管2内有砖红色沉淀产生试管1和2内均呈蓝色次生 3.（2012四川）科研人员获得一种叶绿素b完全缺失的水稻突变体，该突变体对强光照环境的适应能力更强。请回答：（1）提取水稻突变体的光合色素，应在研磨叶片时加入 ，以防止色素被破坏。用纸层析法分离该突变体叶片的光和色素，缺失的色素带应位于滤纸条的 。（2）该突变体和野生型水稻O2释放速率与光照强度的关系如右图所示。当光照强度为n时，与野生型相比，突变体单位面积叶片中叶绿体的氧气产生速率 。当光照强度为m时，测得突变体叶片气孔开放程度比野生型更大，据此推测，突变体固定的CO2形成 的速率更快，对光反应产生的 消耗也更快，进而提高了光合放氧气速率。（3）如果水稻出现叶绿素a完全缺失的突变，将无法进行光合作用，其原因是 【解析】（1）提取叶绿体色素的过程中，叶绿素容易被酸性物质破坏，所以一般加入碳酸钙，防止色素被破坏；该突变植物缺乏叶绿素b，在叶绿体的色素的层析过程中，滤纸条上由上到下的色素分布分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b，所以这里缺失的色素带是位于滤纸条的最下端。（2）据图可知，突变体和野生型水稻的呼吸作用速率不同，而且突变体的呼吸作用比野生型植株的呼吸作用强。在n点时，两者的氧气释放速率相等，即两者的净光合速率相等。而氧气的产生速率表示植物真正的光合速率，真正的光合速率等于植物的呼吸速率加上植物的净光合速率。所以n点时，突变体的氧气产生速率大于突变体。在光合作用的过程中，二氧化碳的固定，产物为三碳化合物；三碳化合物的还原需要消耗光反应阶段产生的ATP、还原性辅酶氢。（3）在光合作用的光反应阶段，只有少量的叶绿素a可以吸收光能，这部分叶绿素a被光子激活产生电能，电能再向其他色素传递形成活跃的化学能。如果缺乏叶绿素a，则无法吸收光能。 【答案】（1）CaCO3 最下端 （2）较大 C3 NADPH、ATP （3）缺失叶绿素a不能完成光能转换 4.（2011福建）使用染色剂染色是生物学实验常用的方法，某同学对有关实验做了如下归纳：实验观察对象染色剂实验结果花生子叶细胞的脂肪颗粒苏丹脂肪颗粒被染成橘黄色人口腔上皮细胞中的DNA和RNA分布吡罗红甲基绿细胞内染成绿色的面积显著大于染成红色的面积人口腔上皮细胞中的线粒体健那绿线粒体呈现蓝绿色洋葱根尖分生组织细胞的有丝分裂龙胆紫间期细胞不着色，分裂期细胞染色体着色（1）上述实验结果的归纳，正确的有_（实验序号）。（2）实验和实验在染色之前，都使用了一定浓度的盐酸处理。其中，实验用盐酸可改变_通透性，加速染色剂进入细胞；实验用盐酸与酒精混合，对材料进行解离。在两个实验操作中，都要注意盐酸浓度，处理材料时的温度和_。（3）健那绿使线粒体着色与线粒体内膜的酶系统有关。线粒体内膜上的酶主要催化有氧呼吸的第_阶反应，该反应变化是_。【解析】（1）脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色（或被苏丹染液染成红色），正确。DNA主要分布在细胞核内，RNA大部分存在于细胞质中。甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使 RNA呈现红色，细胞内染成红色的面积大于染成绿色的面积。健那绿染液是将活细胞中线粒体染色的专一性染料，可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，正确。染色体和染色质是同样的物质在细胞不同时期的两种存在状态，染色质是极细的丝状物，因容易被碱性染料染成深色。（2）在观察DNA和RNA在细胞中的分布实验中，盐酸的作用是能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合；在观察洋葱根尖分生组织细胞的有丝分裂实验中解离用盐酸与酒精（1：1）混合液，用药液使组织中的细胞相互分离开来，注意解离的温度（室温）和时间（35min）。（3）第一、二阶段产生的H，经过一系列的化学反应，在有氧呼吸第三阶段H与氧结合形成水，同时释放出大量的能量。这一阶段需要氧的参与，是在线粒体内膜上进行的。【答案】（1） （2）细胞膜 时间（3）三 H与氧结合形成水，同时释放大量的能量5.（2011重庆）某兴趣小组将豆腐块灭菌，接种微生物后培养2天，加入适量食盐，经密封放置10天后制得豆腐乳。（1）在保质期内，豆腐乳放置时间越长，蛋白质含量越低，短肽和氨基酸含量越高。为研究其原因，该小组取适量豆腐乳之称样液，等量加入各试管，进行了以下实验。处理编号处理方法显色结果37放置0min加入等量双缩脲试剂紫色37放置10min？37放置120min？100加热5min后，37放置120min紫色实验中，加入双缩脲试剂A后，样液的颜色将 。处理中，100加热的目的是 。如果处理与处理相比，显色较 ，且处理与处理相比，显色较 ，则表明豆腐乳中蛋白质被微生物产生的 分解。最终使肽和氨基酸含量增加，因此保质期内豆腐乳放置越久风味越佳。（2）食用豆腐乳后，其中的氨基酸可以在人体内通过 作用形成的氨基酸，还可以由氨基酸产生的不含氨部分合成 。 【解析】借微生物考查学生实验分析、探究能力以及动物代谢的相关知识。属中档题、较难。可贵的是实验中设计了两个实验变量：时间的长短和酶的活性有无。审题的关键是把握住；“豆腐乳放置时间越长，蛋白质含量越低，短肽和氨基酸含量越高。”设计探究时间，设计探究酶的活性有无。了解双缩脲试剂A、B的成分，双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液；呈无色。双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液，呈浅蓝色。如果学生没有做过实验或没有观察过实验第一空将不能正确作答。 【答案】（1）不变；使酶失活；浅；浅；蛋白酶（肽酶）。 （2）氨基转换；糖类和脂肪。6.（2011广东）中国的饮食讲究“色香味”，颜色会影响消费。小李同学拟研发“绿色”食用色素，他以生长很快的入侵植物水葫芦为材料进行如下实验。I提取叶绿素II.探究pH对叶绿素稳定性的影响 取一些叶绿素粗产品，配成一定浓度的溶液，于室温（约25）下进行实验，方法和结果如下表。实验组号叶绿素溶液（mL）调pH至处理时间（min）溶液颜色3.0Y10绿色3.07.010绿色3.06.010黄绿色3.05.010黄褐色注：叶绿素被破坏后变成黄褐色。根据所学知识和实验结果，请回答：（1）提取食用叶绿素的X应该为 ，原因是 。（2）表中Y应该为 ，原因是 。（3）若用作食品色素，天然叶绿素色素不适用于 食品，否则 。（4）小李想了解叶绿素产品中是否含有其他色素，请你提供检测方法并写出主要步骤。 【解析】（1）叶绿素的提取应该加入二氧化硅和碳酸钙，碳酸钙在图示中有了，它的作用是防止研磨过程中色素被破坏，二氧化硅有助于研磨的充分。（2）本实验来研究的是不同的pH值下对叶绿素的影响，观察可以看出以1.0作为pH梯度进行实验。（3）由于在酸性条件下色素会破坏，所以不适合用于酸性食品的添加剂。（4）色素的鉴定采用纸层析法进行鉴定。这个鉴定的步骤可以借用叶绿素的分离或者胡萝卜素的鉴定。主要的步骤如下：量做基线：在18cm30cm滤纸下端距底边2cm处做一基线，在基线上取A、B、C、D四点。对照点样：A、D点叶绿素标准样品，B、C点提取样品。干燥层析：吹干滤纸溶剂，放入色谱容器中层析。对比观察：对比观察样品色素点与叶绿素标准色素点的异同。 【答案】（1）二氧化硅（SiO2） 使研磨更加充分（2）8.0 以1.0作为pH梯度进行实验（3） pH小于6.0 叶绿素会由于酸性pH值而被破坏（4）色素的鉴定采用纸层析法进行鉴定。主要的步骤如下：量做基线：在18cm30cm滤纸下端距底边2cm处做一基线，在基线上取A、B、C、D四点。对照点样：A、D点点叶绿素标准样品，B、C点点提取样品。干燥层析：吹干滤纸溶剂，放入色谱容器中层析。对比观察：对比观察样品色素点与叶绿素标准色素点的异同。 7.（2011江苏）洋葱(2n=16)为二倍体植物。为比较不同处理方法对洋葱根尖细胞分裂指数（即视野内分裂期细胞数占细胞总数的百分比）的影响，某研究性学习小组进行了相关实验，实验步骤如下： 将洋葱的老根去除，经水培生根后取出； 将洋葱分组同时转入质量分数为0.01%、0.1%秋水仙素溶液中，分别培养24h、36h、48h；秋水仙素处理停止后再转入清水中分别培养0h、12h、24h、36h； 剪取根尖，用Carnoy固定液（用3份无水乙醇、1份冰乙酸混匀）固定8h，然后将根尖浸泡在1mol/L盐酸溶液中58 min； 将根尖取出，放入盛有清水的培养皿中漂洗； 用石炭酸品红试剂染色； 制片、镜检；计数、拍照。实验结果：不同方法处理后的细胞分裂指数(%)如下表。秋水仙素溶液处理清水培养时间(h)质量分数(%)时间(h)01224360.012410.7113.6814.1914.46369.9411.9913.5913.62487.9810.0612.2211.970.1247.749.0911.0710.86366.127.879.989.81485.976.687.988.56 请分析上述实验，回答有关问题：(1)步骤中“将根尖浸泡在1 mol/L盐酸溶液中”的作用是 。(2)步骤为了获得相应的观察视野，镜检时正确的操作方法是 。 (3)根据所学知识推测，石炭酸一品红试剂是一种 性染料。(4)为了统计数据更加科学，计数时应采取的方法是 。(5)根据上表结果可以得出如下初步结论： 质量分数为 秋水仙素溶液诱导后的细胞分裂指数较高； 本实验的各种处理中，提高细胞分裂指数的最佳方法是 。 (6)右面为一位同学在步骤所拍摄的显微照片，形成细胞a的最可能的原因是 。 【解析】典型的实验分析题。解题时务必明确并紧扣实验目标“为比较不同处理方法对洋葱根尖细胞分裂指数（即视野内分裂期细胞数占细胞总数的百分比）的影响”。（1）步骤的处理，实质是对根尖进行“解离”，使根尖细胞相互分离开来。（2）要求是为“获得相应的观察视野”，措施是在“镜检时”，而不是其他环节。进行“正确的操作”，先在低倍镜下观察，缓慢移动装片，发现理想视野后换用高倍镜。 (3)观察细胞的染色体作用的染色剂是碱性的。 (4)为了尽量的减小误差，获得的数据更科学、更准确，那就应该每组装片观察多个视野，这样可取这些数据的平均值作为结果。 (5)读表中数据，分析归纳对应的结论：在相同秋水仙素处理时间和相同清水培养时间下，比较两种浓度的秋水仙素溶液的处理效果，指数较高的是0.01% ； 先在图表中找到最高的细胞分裂指数14.46%，而后查找对应的处理方法：0.01%秋水仙素溶液诱导24h，再在清水中培养36h。 (6)首先还是要看清图中细胞a和其左下角细胞中的染色体数数目少得多，此细胞中的染色体数未加倍，那就是秋水仙素没能发挥作用，秋水仙素处理发生在上一个细胞周期纺锤体形成之后。 【答案】(1)使组织中细胞相互分离开来 (2)先在低倍镜下观察，缓慢移动装片，发现理想视野后换用高倍镜 (3)碱 (4)每组装片观察多个视野 (5)0.01% 0.01%秋水仙素溶液诱导24h，再在清水中培养36h (6)秋水仙素处理发生在上一个细胞周期纺锤体形成之后8.（2010全国卷二）请回答下列问题（1）氮、磷、镁3种元素中，构成生命活动所需直接能源物质的元素是 ，构成细胞膜的元素是 。（2）缺镁时植物叶片发黄，其原因是 。（3）在提取叶绿体色素的过程中，研磨叶片时通常需加少量二氧化硅、碳酸钙及适量丙酮，二氧化硅的作用是 ；碳酸钙的作用 ； 丙酮的作用是 。（4）光反应中能把光能转换成电能的叶绿素是少数处于特殊状态的 。 【解析】（1）直接能源物质是ATP，含有C 、H、 O、 N、 P 。构成细胞膜的成分有磷脂、蛋白质和糖类，所以细胞膜也含有这五种元素。（2）镁是叶绿素的组成成分，缺镁时叶绿素不能合成，叶片显示类胡萝卜素的颜色。（3）在提取叶绿体色素时，为了研磨更充分，常加入少量二氧化硅，为防止叶绿素被细胞中的酸破坏，常加入碳酸钙。丙酮为有机溶剂，可以将色素萃取出来。大多数叶绿素a、全部叶绿素b、叶黄素、胡萝卜素具有吸收、传递光能的作用，只有少数叶绿素a具有吸收光能、转换光能的作用。 【答案】（1）氮、磷 氮、磷 （2）镁是叶绿素的组成成分，缺镁导致叶绿素合成受阻（其他合理答案也给分） （3）有助于磨碎植物细胞 防止研磨过程中叶绿体色素被破坏 色素的提取溶剂（其他合理答案也给分） （4）叶绿素a9(2010广东)假设你去某饲料研究所进行课外实践活动，需要完成以下任务：（1）选用恰当的试剂检测某样品中是否含有蛋白质。提供的试剂有：碘液，苏丹溶液，双缩脲试剂，斐林试剂。你选用的试剂应该是 ；蛋白质与相应试剂反应后，显示的颜色应为 。（2）完善以下实验设计并回答问题。 探究A动物蛋白对小鼠生长的影响资料：饲料中的蛋白含量一般低于20%；普通饲料可维持小鼠正常生长； A动物蛋白有可能用于饲料生产。一、 研究目的：探究A动物蛋白对小鼠生长的影响。二、 饲料：1基础饲料：基本元蛋白质的饲料；2普通饲料（含12%植物蛋白）：基础饲料+植物蛋白；3试验饲料：基础饲料+A动物蛋白。三、 实验分组：实验组号 小鼠数量（只） 饲料 饲养时间（天）1 10 基础饲料 212 10 试验饲料1（含6%A动物蛋白） 213 10 试验饲料2（含12%A动物蛋白） 214 10 试验饲料3（含18%A动物蛋白） 21 5 10 试验饲料4（含24%A动物蛋白） 216 10 备注：小鼠的性别组成、大小、月龄、喂饲量和饲养环境均相同。四、 实验方法和检测指标：略实验组6中，应该为 ，原因是 ；应该为 ，原因是 ；要直观和定量地反映小鼠的生长情况，可以测量小鼠的 和 。【解析】本题主要考查学生的理解能力、获取信息能力、实验探究能力和综合运用能力。要鉴定蛋白质，需要利用双缩脲试剂和蛋白质发生紫色颜色反应的原理进行。要探究A动物蛋白对小鼠生长的影响，不同浓度A动物蛋白的组合即2、3、4、5为实验组，且为相互对照组；第1组为空白对照组，排除基础饲料对实验结果的影响；还缺乏另外一个对照组，来排除植物蛋白对实验结果的影响，即第6组，所以应该为普通饲料，饲养时间为无关变量，应处于相同且适宜的状态，所以应该为21；反应变量的检测方法可以选择测量小鼠的平均体长和平均重量。【答案】（1）双缩脲试剂 紫色 （2） 普通饲料 普通饲料可维持小鼠正常生长，作为对照组 21 实验中遵循单一变量原则 体重 体长五、冲关检测，你能行！本测试共有13道简答题1.（2012湖南衡阳六校联考改编）使用染色剂染色是生物学实验常用的方法，某同学对有关实验做了如下归纳：实验观察对象染色剂实验结果花生子叶细胞的脂肪颗粒苏丹脂肪颗粒被染成橘黄色人口腔上皮细胞中的DNA和RNA分布吡罗红甲基绿细胞内染成绿色的面积显著大于染成红色的面积人口腔上皮细胞中的线粒体健那绿线粒体呈现蓝绿色洋葱根尖分生区细胞的有丝分裂龙胆紫间期细胞不着色，分裂期细胞染色体着色（1）上述实验结果的归纳，不正确的有 （填实验序号）。（2）实验在染色之后，用吸水纸吸去染液，再滴加12滴体积分数为50%的酒精溶液，作用是 。（3）在上述实验中，所用的染色剂，属于活体染色剂的是_，其他的染色剂只能将细胞杀死以后才能染色，这是因为一般的染色剂对细胞都是有害的，由于细胞膜具有_，对细胞需要的物质不允许进入细胞内。实验中除了用龙胆紫进行染色以外，还可以用 进行染色。（4）健那绿使线粒体着色与线粒体内膜的酶系统有关。线粒体内膜上的酶主要催化有氧呼吸的第 阶段反应。（5）实验在低倍镜下观察到整个视野中共有400个细胞，若目镜不变，物镜由10换为40，则视野中能看到 个细胞。【解析】 (1)利用苏丹染液可将脂肪颗粒染成橘黄色；健那绿染液可将线粒体染成蓝绿色；吡罗红、甲基绿混合染色剂对DNA和RNA进行处理时，甲基绿可使DNA呈现绿色