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文档简介

课下能力提升(一)dna重组技术的基本工具【基础题组】1下列关于限制酶和dna连接酶的理解,正确的是()a其化学本质都是蛋白质bdna连接酶可以恢复dna分子中的氢键c它们不能被反复使用d在基因工程操作中可以用dna聚合酶代替dna连接酶2下列有关基因工程的相关叙述,正确的是()a重组dna技术所用的工具酶是限制酶、dna连接酶和载体b一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列c目的基因是指重组dna分子d只要检测出受体细胞中含有目的基因,那么,目的基因一定能成功地进行表达3人们将苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因导入棉花细胞中培育成抗虫棉,这个过程中所利用的主要原理是()a基因突变b基因重组c基因工程 d染色体变异4作为基因的运输工具载体,必须具备的条件之一及理由是()a能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的基因b具有多个限制酶切点,以便于目的基因的表达c具有某些标记基因,以便为目的基因的表达提供条件d能够在宿主细胞中复制并稳定保存,以便于进行筛选5利用ecor 限制酶处理下列dna片段,被切开的部位是()a bc d6下列关于细菌质粒的叙述,正确的是()a所有的质粒都可以作为基因工程中的载体b是独立于细菌拟核dna之外的双链dna分子,不与蛋白质结合c质粒对侵入的宿主细胞都是无害的d细菌质粒的复制过程都是在宿主细胞内独立进行的7在基因工程中用来修饰、改造生物基因的工具是()a限制酶和dna水解酶b限制酶和dna连接酶c限制酶和载体ddna连接酶和载体8限制酶ecor 对dna的识别序列是gaattc,当用它处理环状dna分子时,可形成()a两端相同的线性dna,有黏性末端b两端相同的线性dna,无黏性末端c两端不同的线性dna,一端有黏性末端,一端无黏性末端d两种末端无法判断【能力题组】9下面是四种不同质粒的示意图,其中ori为复制必需的序列,amp为氨苄青霉素抗性基因,tet为四环素抗性基因,箭头表示一种限制性核酸内切酶的酶切位点。若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组dna的细胞,应选用的质粒是()10某线性dna分子含有3 000个碱基对(bp),先用限制酶a切割,再把得到的产物用限制酶b切割,得到的dna片段大小如表所示。限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示。下列有关说法正确的是()a酶切割产物(bp)b酶再次切割产物(bp)1 600;1 100;300800;300a在该dna分子中,a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个ba酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接ca酶与b酶切断的化学键不相同d用这两种酶和dna连接酶对该dna分子进行反复切割、连接操作,若干循环后,序列会明显增多11如图为dna分子在不同酶的作用下所发生的变化,图中依次表示限制性核酸内切酶、dna聚合酶、dna连接酶、解旋酶作用的正确顺序是()a bc d12下列所示的黏性末端是由几种限制酶作用产生的()a1种 b2种c3种 d4种13限制酶是一种核酸切割酶,可识别并切割dna分子上特定的核苷酸序列。如图为四种限制酶bamh 、ecor 、hind 以及bgl 的识别序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的dna片段末端可以互补黏合,其正确的末端互补序列是()abamh 和ecor 末端互补序列为aattbbamh 和hind 末端互补序列为gatccecor 和hind 末端互补序列为aattdbamh 和bgl 末端互补序列为gatc14根据基因工程的有关知识,回答下列问题:(1)限制酶切割dna分子后产生的片段,其末端类型有_和_。(2)质粒运载体用ecor 切割后产生的片段如下:aattcg gcttaa为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的dna除可用ecor 切割外,还可用另一种限制酶切割,该酶必须具有的特点是_。(3)按其来源不同,基因工程中所使用的dna连接酶有两类,即_dna连接酶和_dna连接酶。(4)基因工程中除质粒外,_和_也可作为运载体。15如图为体外对dna分子进行切割和拼接的示意图,请据图回答以下问题:(1)ecor是一种_酶,其识别序列是_,切割位点是_与_之间的_键,切割产生的dna片段末端形式为_。(2)将不同来源的dna片段“缝合”起来,需要_酶或_酶。它们均属于_酶,作用是_。其中能“缝合”两个双链dna片段的平末端的酶是_。课下能力提升(一)1解析:选a限制酶与dna连接酶的化学本质都是蛋白质;dna连接酶连接的是两个dna片段间相邻两个核苷酸间的磷酸二酯键;酶在化学反应前后其数量、性质、功能均不发生改变,因此可以反复利用;dna聚合酶是在细胞内dna分子复制时发挥作用的,不能替代dna连接酶。2解析:选b载体不是工具酶;重组dna分子是目的基因和载体重组后形成的;目的基因是否成功表达仅仅在受体细胞中检测出目的基因是不够的,最重要的是受体生物或细胞表现出我们所需要的性状。3解析:选b基因工程是一种技术手段,而不是生物学原理,抗虫棉的培育利用基因工程使基因发生重组。4解析:选a作为载体要携带目的基因进入受体细胞并使之表达,必须能够在宿主细胞内稳定地保存下来并大量复制,以便通过复制提供大量的目的基因;具有某些标记基因,是为了通过标记基因是否表达来判断目的基因是否进入了受体细胞,从而进行筛选受体细胞;具有多个限制酶切点,则是为了便于与外源基因连接。5解析:选aecor 限制酶只能识别gaattc序列,并切断g和a之间的磷酸二酯键,且不会切割碱基对之间的氢键。6解析:选b质粒上可能含有抗生素、毒素基因,对宿主细胞产生破坏作用。细菌质粒是独立于细菌拟核之外的细胞质dna分子,侵入宿主细胞后有的可以独立地进行自我复制,有的则整合到宿主细胞染色体dna上,随着宿主细胞染色体dna的复制而同步复制。7解析:选bdna水解酶不是基因工程的工具,a错误;载体的作用是将目的基因导入受体细胞,而不是修饰改造基因,c、d错误。8解析:选a限制酶ecor 在识别序列的中心轴线两侧进行切割,产生黏性末端。9解析:选ca项破坏了复制必需的序列。b项氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因都完好,在四环素培养基上和氨苄青霉素培养基上都能生长。c项氨苄青霉素抗性基因被破坏,四环素抗性基因完好,能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长。d项氨苄青霉素抗性基因完好,四环素抗性基因被破坏,能在氨苄青霉素培养基上生长而不能在四环素培养基上生长。10解析:选d限制酶a切割产物为三段,有2个切割位点,其产物又被限制酶b切割,形成两种产物,由其产物可知,有两个切割位点。a酶与b酶切出的黏性末端能相互连接。两种限制酶切断的化学键都是磷酸二酯键。a酶与b酶切割后形成的黏性末端可以相互配对连接,形成的重组dna中已不存在原来两种限制酶的识别序列,不能再被切割,可以保存下来,因此经过若干次循环操作后和序列会明显增多。11解析:选c限制性核酸内切酶、dna聚合酶、dna连接酶三者均作用于磷酸二酯键处,限制性核酸内切酶使键断开,而dna聚合酶连接的是单个脱氧核苷酸,dna连接酶作用于dna片段。解旋酶作用于氢键,使dna双链打开,形成dna单链。12解析:选d读图知题目中给定的这4种黏性末端均不相同,由限制酶的专一性特点知这4种末端应是由4种限制酶切割形成的。13解析:选d读图知bamh 识别ggatcc且从g与g间切割;ecor 识别gaattc且从g与a间切割;hind 识别aagctt且从a与a间切割;bgl 识别agatct且从a与g间切割。比较这4个脱氧核苷酸序列知,bamh 与bgl 切割的序列中有互补黏合部分,即gatc。14解析:当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将dna的两条链分别切开时,产生黏性末端,当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时,产生平末端。为使运载体与目的基因相连,用另一种限制酶切割后形成的黏性末端必须与ecor 切割形成的黏性末端相同。根据酶的来源不同,可以将dna连接酶分为两类:一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为ecoli dna连接酶;另一类是从t4噬菌体中分离出来的,称为t4 dna连接酶。基因工程中除质粒外,还有噬菌体的衍生物、动植物病毒等也可作为运载体。答案:(1)黏性末端平末端(2)切割产生的dna片段末端与ecor 切割产生的相同(3)大肠杆菌(ecoli)t4(4)噬菌体的衍生物动植物病毒15解析:图解表示ecor将两个dna分子在特定序列的特定位点切开并通过dna连接酶进行拼接的过

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