生化需氧量的测定.doc

_生化需氧量的测定1 实验目的 通过本实验，熟悉生化需氧量(BOD5)的测定过程。2 原理 生化需氧量是指在好氧条件下，生物分解有机物质的生物化学过程中所需要的溶解氧量。生物分解有机物是一个缓慢的过程，要把可分解的有机物全部分解掉常需要20天以上的时间，目前国内外普遍采用20下5天培养时间所需要的氧作为指标，以氧的mgL表示，称为BOD5。 取两份水样分别置于溶解氧瓶中，其中1份放人20培养箱中培养5天后，测定溶解氧，另1份当天测定溶解氧，按公式计算BOD5。3 仪器 （1）恒温培养箱(201)。 （2）20L细口玻璃瓶。 （3）1000mL量筒。 （4）其他仪器和碘量法测定溶解氧相同。4 试剂 除需要测定溶解氧的全部试剂外，尚需配制下列试剂。 （1）氯化钙溶液 称取27.5g无水氯化钙，溶于水中，稀释到1000mL。 （2）三氯化铁溶液 称取0.25g三氯化铁(FeCl36H2O)溶于水中，稀释到1000mL。 （3）硫酸镁溶液 称取22.5g硫酸镁(MgSO47H2O)溶于水中，稀释到1000mL。 （4）磷酸盐缓冲液 称取8.5g磷酸二氢钾(KH2PO4)、21.75g磷酸氢二钾(K2HPO4)、33.4g磷酸氢二钠(NaH2PO47H2O)和1.7g氯化铵(NH4C1)溶于500mL水中，稀释到1000mL。此溶液的pH值应为7.2。（5）稀释水 在20L大玻璃瓶内装入一定量的蒸馏水。其中每1L蒸馏水加入上述4种试剂。各1mL，用水泵均匀连续通人经活性炭过滤的空气12天，使水中溶解氧接近饱和，然后用清洁的棉塞塞好，静置稳定1天。稀释水本身的5天生化需氧量必须小于0.2mgL方可使用。5 步骤 （1）水样的稀释 首先要根据水样中有机物含量来选择适当的稀释比。如果对水样性质不了解，需要做3个以上稀释比。对清洁地面水可不必稀释，直接培养测定。受污染的河水的稀释倍数约为14倍，普通和沉淀过的污水约为2030倍，严重污染的水样约为1001000倍。也可通过COD值求得参考稀释倍数，将酸性高锰酸钾法测得的COD值除以4，或重铬酸钾法测得的COD除以5，其商即为应稀释的倍数(稀释倍数指稀释后体积与原水样体积之比)。 按照选定污水和稀释水比例，用虹吸法先把一定量污水引入1000mL量筒中，再引入所需要量的稀释水，用特制的搅拌器(一根粗玻璃棒底端套上一个比量筒口径略小的约2mm厚的橡皮圆片)在水面以下缓缓搅匀(不应产生气泡)。然后用虹吸管将此溶液引入两个同一编号的溶解氧瓶中，到充满后溢出少许，盖严，加上封口水。注意瓶内不应有气泡，如有气泡需轻轻敲击瓶体，使气泡逸出。 用同样方法配制另外两个稀释比的水样。 （2）另取两个同一编号的溶解氧瓶加入稀释水，作为空白。 （3）每个稀释比各取一瓶测定当时的溶解氧，另一瓶放人培养箱中，在201培养5天，在培养过程中需要每天添加封口水。 （4）从开始放人培养箱算起，经过5昼夜后，取出水样测定剩余的溶解氧。6 计算 （1）不经过稀释而直接培养的水样。 BOD5(mgL)DlD2式中 B1稀释水在培养前的溶解氧，mg/L； B2稀释水在培养后的溶解氧，mg/L；D1培养液在培养将的溶解氧，mgL； D2培养液在培养五天后的溶解氧，mgL。 （2）稀释后培养的水样：根据上述3个稀释比，分别按下式计算出水样的耗氧率。 耗氧率式中 B1稀释水在培养前的溶解氧，mgl； B2稀释水在培养后的溶解氧，mgL： f1稀释水在培养液中所占比例； f2水样在培养液中所占比例。 f1、f2的计算：例如培养液的稀释比为3，即3份水样97份稀释水，则f1=97%=0.97，f2=3%=0.03。 如果有2个和3个稀释比培养水样的耗氧率均在4070范围内，则取其测定计算结果的平均值为BOD5数值。如3个稀释比培养的水样其耗氧率均在4070以外，则应调整稀释比后重做。7 注意事项 （1）稀释水应在20左右，冬季低于20时应预热，夏季高于20时应冷却。 （2）样中若有游离的碱和碘，应预先中和再进行稀释培养。可用麝香草酚蓝作为指示剂，用lmol