FSH作业指导书xx9.doc

FSH作业指导书xx9 分析原理采用双抗夹心法原理，整个过程18分钟完成。 第1步40l标本生物素标记抗FSH单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗FSH单克隆抗体混匀混匀。 第2步加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。 第3步反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。 通过检测仪的定标曲线得到最后检测结果（定标曲线通过2定标点和试剂条形码提供的主曲线成）。 标本要求血清按标准常规方法采集。 血浆肝素锂、钠、铵；EDTA-K3抗凝均可。 如采用柠檬酸盐抗凝的血浆，测定结果较用血清的约低20%，用氟化钠/草酸钾抗凝的约低14。 标本在28度可稳定14天，-20度可稳定6个月。 只能冻融一次。 含沉淀的标本使用前需离心。 不要使用加热灭活的标本。 标本和质控品禁用叠氮钠防腐。 试剂、校准品、质控品和其他所需材料采用罗氏原装配套试剂。 试剂M链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。 粒子浓度0.72mg/ml，生物素结合能力470ng生物素/mg粒子。 含防腐剂。 R1生物素化的抗FSH单克隆抗体（灰盖），1瓶，10ml。 浓度2.0mg/l，MES缓冲液0.05mol/l，pH6.0。 含防腐剂。 R2Ru(bpy)32+标记的抗FSH单克隆抗体（黑盖），1瓶，10ml，浓度0.8mg/l，MES缓冲液0.05mol/l，pH6.0。 含防腐剂。 其他所需材料常规实验设备Elecsys E170/E411Elecsys系统清洗液（SysClean）,货号11298500Elecsys E170分析仪所需材料:Elecsys系统缓冲液（ProCell M）,货号12135019Elecsys检测池洗液（CleanCell M）,货号12135027Elecsys PC/CC杯,货号03023141Elecsys清洗液（ProbeWash M），货号03005712Elecsys反应杯/加针头/废物袋（CUP/TIP），货号12102137Elecsys系统清洗适配器（SysClean AdapterM），货号03027651Elecsys E411分析仪所需材料:Elecsys系统缓冲液（ProCell），货号11662988Elecsys测量池清洗液（CleanCell），货号11662970Elecsys系统清洗液（SysWash），货号11930346Elecsys适配器（Adapter forSysClean），货号11933159,Elecsys反应杯（CUP），货号11706829Elecsys加样头（TIP），货号11706802仪器和校准使用仪器瑞士罗氏诊断公司生产Elecsysxx/E170/E411全自动电化学发光免疫自动分析仪仪器校准每批FSH试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。 应用FSHCalSetII定标液定标。 定标频率每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器注册24小时以内）标定一次，如再次标定即根据下列要求一个月（同一批号试剂）7天（放置仪器上的同一试剂盒）根据要求进行标定如质控结果超出范围时。 操作步骤（以E170为例）5.1校准操作步骤在编缉各项目的参数时，已经在ApplicationCalib菜单中定义好了定标类型和几点定标。 因此在对各项目进行定标时，只需在定标菜单Calibration中进行即可。 进入CalibrationStatus菜单，用鼠标选择需定标的项目，再根据需要点单点定标（BLANK键）或两点定标（TWO POINT键）、跨距定标（SPAN键）、多点定标（FULL键），再选择其它项目进行相应选择，最后点SAVE，将定标物放入在CalibrationCalibrator中定义好的位置，点Start，再点Start，仪器开始定标。 在CalibrationStatus菜单中看定标结果，点Calibration Result键看定标结果，点Reaction Monitor键看每个定标物的反应曲线。 5.2样本检测程序单个样本输入，在主菜单下选择Workplace-Testslection，在Sequence No栏输入标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点SAVE键，样本号自动累加。 批量常规标本的输入，在主菜单下选择Workplace-Testslection，在Sequence No栏输入起始标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点REPEAT，输入该批标本的最后一个标本号，点OK即可。 进样分析，将标本按在Workplace菜单中输入的标本号顺序在样本架上排好，放入进样盘内,按START键，输入该批上机标本的起始标本号，再点START键，仪器自动开始推架检测标本。 质量控制Elecsys通用质控品（PreciControl Universal）1和2或其它合适的质控品。 各浓度区域的质控至少每24小时或每一次定标后测定一次。 质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。 检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。 计算方法分析仪自动计算每份标本的测定浓度，单位为mIU/ml。 参考范围FSH(mIU/ml)测试总数百分位数50595男性3194.61.512.4女性卵泡期3766.93.512.5排卵期5612.34.721.5黄体期3493.61.77.7停经后1816725.8134.8LH/FSH比值(从育龄期妇女的标本中测算出来):卵泡期:0.82(n=315),黄体期:1.12(n=279)各实验室应对各自地区人群的促黄体生成激素正常值波动范围进行调查，如有必要应自己测定一个参考值范围。 分析性能分析性能精密度干扰因素该方法不受黄疸（胆红素64mg/dl）、溶血（血红蛋白1g/dl）、脂血（脂质1900mg/dl）和生物素5mg/天）治疗的病人，至少要等最一次摄入生物素8小时后才能采血。 不受类风湿因子干扰（7000U/ml）的干扰。 FSH浓度高达2000mIU/ml也不出现钩状效应。 接受过小鼠单抗治疗或体内诊断的病人可能会出现假阳性反应。 偶尔可遇到高链霉亲和素抗体的干扰。 Elecsys FSH测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。 临床意义促卵泡激素（FSH）与促黄体生成激素一样同属促性腺激素家族。 二者协同调节和刺激性腺(卵巢和睾丸)的发育和功能。 与LH、TSH和hCG一样，FSH也是糖蛋白，由二种亚单位（-和-）组成，分子量32kD。 对于女性，该激素在下丘脑-垂体-卵巢调节环路中发挥作用，控制月经周期。 FSH和LH从垂体的促性腺细胞中阵发性释放。 血中的浓度由类固醇类激素通过下丘脑的负反馈机制控制。 在卵巢中FSH和LH一起刺激卵泡的成长和成熟，进而刺激卵泡中雌激素的生物合成。 FSH水平在月经周期的的中期呈现一高峰，尽管不如LH明显。 由于卵巢功能的变化和雌激素水平的下降，绝经期FSH达到高水平。 对于男性，FSH起诱导精原细胞发育的作用。 FSH检测对查明下丘脑-垂体-卵巢系统的功能失常有作用。 FSH和LH联合检测用于先天性的疾病，如染色体异常的先天性疾病、闭经（病因）、多囊性卵巢（PCO）和绝经期综合征等。 男性低促性腺激素见于无精子症。 Elecsys FSH测定方法采用二种抗人FSH特异的单克隆抗体。 与LH、TSH、hCG、hGH和hPL的交叉反应可忽略不记。 12参考文献1.Johnson MR,Carter G,Grint C,Lightman SL.Relationship betweenovarian steroids,gonadotropin andrelaxin duringthe menstrualcycle.Acta Endocrinol1983;129/2:121-125.2.Beastall GH,Ferguson KM,OReilly DSJ,Seth J,Sheridan B.Assays forfollicle stimulatinghormone andluteinizing hormone:Guidelines forthe provisionof aclinical biochemistryservice.Ann ClinBiochem1987;24:246-262.3.Runnebaum B,Rabe T.Gyn?kologische Endokrinologieund FortpflanzungsmedizinSpringer Verlag1994.Band1:17,253-255,Band2:152-154,360,348.ISBN3-540-57345-3,ISBN3-540-57347-X.4.Juhl UM,Rippegather G,Weller J,Zawta B.Important Factson ReproductionMedicine/Fertility Diagnosis,Questions andAnswers.1994;Boehringer Mannheim,Cat.No.1322958.5.Schmidt-Mathiesen H.Gyn?kologie undGeburtshilfe.Schattauer Verlag1992.6.Scott MG,Ladenson JH,Green ED,Gast MJ.Hormonal evaluationof femaleinfertility andrepro